186941. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a sertés torzító orrgyulladása, valamint a bordellák és pasteurellák okozta tüdőgyulladása elleni elölt vakcina előállítására
4 186941 5 a centrifugálással történő koncentrálásra (60 milliárd csíra/ml), illetve 0,5% glutáraldehiddel történő elölésre került sor. e) A Pasteurella multocida P—6995 törzset zselatin alapú, 10% marhavért tartalmazó táptalajra oltottuk, 22 órán keresztül 37,4 °C-on kelesztettük, majd a telepeket olyan 7,6 pH-jú levesbe oltottuk, amelynek 1000 ml-re desztillált vízzel kiegészített oldata 10 g proteora-peptont (Oxoid L46), 5 g répacukrot, 3,75 g nátrium-kloridot, 10 g emésztett májat (Oxoid L27) és 100 ml lóvérsavót (Oxoid SR35) tartalmazott. A továbbiakban az ld) példa szerint jártunk el. f) Ezután az öt vakcinatörzs antigén szuszpenziójának azonos mennyiségeit összekevertük és 18 tf% olyan Al-hidroxid-géllel adjuváltuk, amelynek alumíniumtartalma ml-enként 24—25 mg. A leírt vakcina ellenőrzése és az optimális összetétel meghatározása üzemi modellkísérletben 55 ezer sertésen történt. Ennek során több vakcinát próbáltunk ki. Ezek védőhatását a következő kísérletek eredményei mutat ják. A kísérletekhez három, mindkét betegséggel súlyosan terhelt nagyüzemi sertésállományt használtunk. A vakcinázások kocáknál 4 ml, malacoknál 2 ml/ adag vakcinával történtek a következő három oltási séma szerint. 1. A koca ellés előtt 4 és 2 héttel, valamint a malac a 10. és a 30. napos korban. 2. A malac a 20. és a 90. napos korban. 3. A malac a 10., a 30. és a 90. napos korban. 1. Kísérlet Három nagyüzemben (A, B, C) három olyan vakcinával végeztünk az 1. oltási séma szerint vakcinázásokat, amelyek a három állományt fertőző Bordetella bronchiseptica törzsből készültek és ml-enként Al-géllel adjuvált 50 milliárd elölt csírát tartalmaztak. Az 1. táblázatban szereplő minden adat 100 vágósertésben talált orrelváltozások súlyosságának keresztekben kifejezett átlagait (+ enyhe, ++ közepesen súlyos, + + + és + + + + súlyos és igen súlyos), illetve a tüdőben talált elváltozások kiterjedésének %-os átlagértékeit mutatja be, összehasonlítva a kontroll állatok adataival. 1. táblázat Vakcinatörzs eredete Orrleletek átlaga Tüdőleletek átlaga A B C A B C A 1,75 2,05 1,80 23 18 20 B 1,85 1,50 1,50 24 15 17 C 2,15 1,60 1,45 27 18 17 Kontroll 3,15 2,90 2,85 31 18 24 2. Kísérlet Három nagyüzemben (A, B, C) az 1. vakcinázási séma szerint két különböző vakcinával (I—n) végeztünk kísérletet 100—100 vágóállaton. A vakcinázás eredményét mutatja be a 2. táblázat. (Az elbírálás az 1. kísérletnél leírtak szerint történt.) Az I. vakcina 3, K antigének alapján kombinált Bordetella bronchiseptica törzset tartalmazott elölt formában, Al-géllel adjuválva, ml-enként 50 milliárd csíraszámmal. A II. vakcina az I.-nél leírt három Bordetella bronchiseptica törzset, valamint kettő Pasteurella multocida törzset tartalmazott elölt formában, Al-géllel adjuválva, milliliterenként 50 milliárd csíraszámmal. 2. táblázat Vakcina formája Orrleletek átlaga Tüdőleletek átlaga A B C A B C I. 1,05 1,15 0,90 22 14 19 II 1,25 1,00 0,95 18 11 16 Kontroll 3,15 2,90 2,85 31 18 24 3. Kísérlet 3 nagyüzemben (A, B, C) a találmányban leírt 3 Bordetella bronchiseptica U—219 (Bak), U—2191 (Baja) és U—9949 (Hódmezővásárhely) és 2 Pasteurella multocida P—219 (Bak) és P—6995 (Hódmezővásárhely) törzsből készített, Al-géllel adjuvált, 50 milliárd/ml csíraszámú vakcinával végeztünk kísérleteket. A 3 féle vakcinázási sémával elért védőhatás eredményeit tartalmazza a 3. táblázat. Az adatok 100 vágósertésen az 1. kísérletnél leírt szempontok szerint gyűjtött eredményeket foglalják magukba. 3. táblázat Vakcinázási séma Orrleletek átlaga Tüdőleletek átlaga A B C A B C í. 1,25 1,00 0,95 18 11 16 2. 0,90 0,70 0,75 12 8 11 3. 0,75 0,45 0,50 8 5 7 K( introll 3,15 2,90 2,85 31 18 24 Szabadalmi igénypont Eljárás a sertés torzító orrgyulladása, valamint Bordetellák és Pasteurellák okozta tüdőgyulladása elleni elölt vakcina előállítására, azzal jellemezve, hogy 1. a Bordetella bronchiseptica U—219 (Bak) (deponá’ási szám: OKI 00250), U—2191 (Baja) (deponálási szám: OKI 00248) és U—9949 (Hódmezővásárhely) (deponálási szám: OKI 00249) törzseket külön-külön 24 —72 órán keresztül 36,5—37,5 °C-on szilárd táptalajon szaporítjuk, majd 7,2—8 pH-jú folyékony tápközegbe oltjuk és 6—10 órán át 36,0—37,5 °C-on levegőztetve fermentáljuk, ezután a szuszpenziót adott esetben addig centrifugáljuk, míg a csíraszám 55—65, célszerűen 60 milliárd/ml lesz, ezt követően a csírákat 0,3—0,8%-os glutáraldehid- vagy 0,02—0,08%-os etilmercuri-tioszalicilát-oldattal elöljük, és 2. a Pasteurella multocida P—219 (Bak) (deponálási szám: OKI 00251) és P—6995 (Füzesabony) (deponálási szám: OKI 00252) törzseket külön-külön szilárd 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
