186734. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek enzimatikus előállítására

1

186 734

2

Szintézis aminosav-észteri’kkei, mint amin-komponensekkel

Az 1., 2., 3. és 4. példákban leírtakhoz hasonló módon végeztük a kísérleteket az aminosav-észtcrekkel, Radiometer pH-stat készülékben 9,0-9,7 pH-nál és 23-35 °C-on. A terméket és kitermelést HPLC-mód-6. példa

szerrel határoztuk meg. A CPD-Y koncentrációja 4,5 és 1 1 mól volt.

A IV. táblázatban szereplő peptideket is az említett kiindulási anyagokból nyertük.

Látható, hogy bizonyos esetekben oligomerizáció történt. Tekintettel arra, hogy a kitermelések igen magasak, az aminosav-észterek különösen jói alkalmazhatók, ha az oligomerizáció korlátozható.

IV. táblázat

Karboxipeptidáz-Y-nal katalizált peptidszintézis aminosav-észterekkel mint amin-komponensckkcl

Szubsztrát

(konc.)

Bz-Ala-OMe (50 mmó!)

Bz-Ala-OMe (50 mmól)

Amin-komponens

(konc.)

Glicinetil-észtcr (0.5 mól)

Glicin propii észter (0,5 mól)

Glicin izopropil észter (0,5 mól)

Glicin butil észter (0,5 mól)

Lcucin metil észter (0,25 mól)

Leucin etil észter (0,25 mól)

Leucin-t-butil észter (0,25 mól)

Fenilalanin metil észter (0,25 mól)

Fenilalanin etil észter (0,15 mól)

Glutaminsav (y-t-Bu) metil észter (0,5 mól) Glutaminsav (y-t-Bn) t-butil észter (0,25 mól)

Metíonín metil észter (0,2 mól)

Termék

Gtermelés

%-ban

j Bz-Ala-Gly-OH }

1

Bz-Ala-GIy-Gly-OH

100

(Bz-Ala-Gly-OH j

85

Bz-Ala-Gly-OH

90

Bz-Ala-Gly-OH

80

Bz-Ala-Leu-OH

Bz-AIa-Leu-Leu-OH

85

Bz.-Ala-Leu-Leu-Lcu-OH

Bz-Ala-Lcu-Leu-Lcu-Leu-OH

( Bz-Ala-Leu-OH }

50

Bz-AIa-Leu-Leu-OH ?

1 Bz-Ala-Lcu-OH i

0

j Bz-Ala-Phe-OH \

Bz-Ala-Phe-Phe-OH l

80

1 Bz-Ala-Phe-Phe-Phe-OH J

j Bz-Ala-Phe-OH 1

70

j Bz-AIa-Phe-Phe-OH j

Bz-Ala-Glu

(y-t-Bu)-OH

35

Bz-Ala-Glu

(y-t-Bu)-OH

0

■ Bz-Ala-Met-OH Bz-Ala-Met- Met-OH Bz-Ala-Mct-Mct-Met-OH Bz-A!a-Met-Met-Met- Mct-OH

Bz-Ala-Met-Met-Met- Met-Mct-OH

86

Metíonín etil észter

Bz-Ala-Mct-OH

40

(0,2 mól)

Methionin izopropil észter

Bz-Ala-Met-OH

8

(0,2 mól)

Valin metil észter J

f Bz-Ala-Val-OH 1

85

(0,7 mól)

! Bz-Ala-Vai-Val-OH J

Szerin nieti! észter

Bz-Ala-Scr-ÖH

50

(0,5 mól)

Tirozin metil észter

Bz-Ala-Tyr-OH

25

(0,5 mól)

Arginin metil észter (0,5 mól)

Bz-Ala-Arg-OH

0

12