186733. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enzimet vagy mikroorganizmus sejtet magában foglaló mikroporózus polimer testek előállítására
1 2 186.733 ség nein csökkent. 7. példa Invertáz-rostok előállítása enzimek olyan oldatban való elnyeletése útján, amelyhez poli-(vinil-pirrolidon)-t adtunk 50 g Invertáz-oldatot 10 g poli-(vinil-pirrolidon) hozzáadása után erőteljesen keverünk 333 g 15%-os acetonos cellulóz-acetát oldattal együtt. A készítményt autoklávba visszük és 50 atmoszférás nitrogénnyomással egy 500 mikron átmérőjű nyíláson átnyomjuk és rost-szerű száraz port gyűjtünk össze, amelynek szemcsemérete 160—1600 mikronos tartományba esik. A rostokban lévő invertáz-enzim aktivitását 20%-os szukróz-oldaton mérjük, amelyet 0,1 mólos 4-es pH-jű foszfát-pufferrel készítettünk 25 °C- on. Az enzim aktivitása mg invertált szukróz/perc/g rost mértékben kifejezve 8—50 tartományban van a rostméret függvényében. 8. példa Hidroxi-pirimidin-hidroláz- és N-karbanoil-D-aminosav-hidroláz-rostok előállítása Agrobacterium radiobacter sejtek abszorbeálásával, amelyekhez poli(-etilén)-imint adtunk Agrobacterium radiobacter sejteket (száraz súly 4 g) feliszapolunk I00 ml vízben és keverés közben 2 g 3%-os poli-(etilén)-imin-oldattal kezeljük. A keverést 10 perc elteltével megszüntetjük és a leülepedett sejteket összegyűjtjük, majd 25 ml vízben feliszapoljuk. A szuszpenziót 20 g 20%-os acetonos cellulóz-acetát-oldattal alaposan összekeverjük. A készítményt acélcsőbe visszük, amely a tetején egy nitrogén-palackkal, az alján pedig a monofil-szálképző fejjel (I mm átmérő) van összekapcsolva. Adagolószivattyú segítségével a készítményt a szálképzőfejbe visszük és azon keresztül végtelen mono fii-szálat alakítunk ki. A szálat hagyjuk levegőn megszáradni, az aceton elpárologtatása útján. A kapott anyagot (száraz súly 8 g) 40 C-on inkubáljuk nitrogénréteg alatt 0,l mólos 8-as pH-jú foszfátpufferben, amely 4 g DL-fenil-hidantoint tartalmaz a két enzim aktivitásának a meghatározására. Mintegy 20 órás reakció után a hidantoin teljesen átalakul D(-)-feniI-glícinné, amely egy ami-10 15 20 25 30 35 40 nosav analizátorral határozható meg. Ugyanezt az anyagot még 10 alkalommal felhasználtuk hidrolizálásra és megállapítottuk, hogy a kezdeti aktivitás 30%a elveszett. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás enzimet vagy mikroorganizmus sejtet magában foglaló mikroporózus testek előállítására egy enzim vagy mikroorganizmus sejt és egy cellulóz-észter oldatából, azzal jellemezve, hogy egy cellulóz-észter polimer mátrixnak vízzel elegyedő szerves oldószerrel, előnyösen acetonnal, készített oldatát az enzim vagy mikroorganizmus sejt vizes oldatával — mely vizes oldathoz adott esetben egy poli(akril-amid), egy poliamin, előnyösen poli(etilén-amin), poli(vinil-pirrolidon) és/vagy glutáraldehid adalékanyagot adunk — elegyítjük, majd a kapott homogén oldatot ismert módon előnyösen koagulálással, extrudálással, permetezéssel formázzuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a polimer matrix oldat és az enzim vagy mikroorganizmus oldatának elegyítésével nyert homogén oldatot úgy formázzuk, hogy olyan közegben koaguláltatjuk, amely nem oldja a polimer mátrixot. 3. A 2. igénypont szerinti eljárást, azzal jellemezve, hogy a koagulálást úgy végezzük, hogy a keveréket belecsepegtetjük a polimer mátrixot nem oldó közegbe. 4. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a koagulálást úgy végezzük, hogy a keveréket közvetlenül belefolyatjuk a polimer mátrixot nem oldó közegbe. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a polimer matrix oldat és az enzim vagy mikroogranizmus sejt oldatának elegyítésével nyert homogén oldatot az oldószer eltávolítása után történő extrudálással formázzuk. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a polimer matrix oldat és az enzim vagy mikroorganizmus sejt oldatának elegyítésével nyert homogén oldatot nyomás alatt történő per-' metezéssel formázzuk. rajz nélkül Kiadja: Országos Találmányi Hivatal Felelős kiadó: Himer Zoltán o.v. KÓDEX 4
