186487. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6'-béta-(hidroximetil)-penicillánsav-1', 1'-dioxid-(6béta-(szubsztituált)-penicillanoiloxi-metil)-észterek előállítására
9 186487 10 atom, vegyületnek és a pen.icillánsav-l,l-dioxidnak a béta-laktamáz enzimet gátló aktivitását az I. táblázatban foglaljuk össze. Különösen figyelemreméltó a 6- -béta-hidroxi-metil-penicillánsav-l ,1 -dioxid-kalcium-sónak a Pseudomonas aeruginosa és Enterobacter cloacae béta-laktamáz enzimet termelő törzseivel szemben mutatott aktivitása, ugyanis e törzsekkel szemben a korábban leírt, a béta-laktamáz enzimet gátló anyagnak, a penicillánsav-l,l-dioxidnak legjobb esetben is csak na- 5 gyón kis aktivitása volt. I. táblázat Sejtmentes béta-laktamáz enzimkészítményekkel szemben mutatott gátló hatás A) 6-béta-(hidroximetil)-penicillánsav-l ,1 -dioxid-kalcium -só B) Penicillánsav-l, 1 -dioxid-nátrium-só A béta-laktamáz enzimkészítmény forrása Antibiotikum (koncentráció) Inhibitor A, ill. B (koncentráció) A béta-laktamáz hidrolizáló hatásának %-os gátlása Staphylococcus aureus Ampicillin (33 fxmól) A 66 fxmól 98,3 01A400 16,5 jzmól 78,8 1,0 jjtmól 39,3 B 66 fimól 100 16,5 fi.mól 95 1,0 [i.mól 0 Escherichia coli 51A129 Ampicillin (33 jxmól) A 66 fxmól 100 16,5 [xmól 100 1,0 fxmól 95,7 0,67 fxmól 92,1 B 66 fxmól 100 16,5 fxmól 100 1,0 fxmól 97,0 Klebsiella pneumoniae Ampicillin (33 pmól) A 66 fxmól 100 53A129 16,5 [Jtmól 100 1,0 mfxól 81,2 B 66 fxmól 100 16,5 fxmól 100 Pseudomonas aeruginosa Penicillin G (33 fxmól) A 66 fxmól 98,8 52A104 16,5 fxmól 93,4 1,0 fxmól 21,7 B 66 ixmól 0 Ampicillin (33 fimól) B 66 jxmól 27,5 16,5 fxmól 5,0 Enterobacter cloacae Penicillin G A 66 fxmól 77,0 67B009 16,5 fxmól 52,0 1,0 fxmól 11,4 B 66 fxmól 0 16,5 fxmól 0 1,0 [Amól 0 66a p.mól 26 a=preinkubáció. A találmány szerinti vegyületek in vitro hatékonyságát úgy határozzuk meg, hogy mérjük valamely penicillin- 55 vázas antibiotikummal együtt adott (IV) általános képletű, ahol M jelentése hidrogénatom, vegyületnek különféle mikroorganizmusokkal szemben mérhető minimális gátló koncentrációját (minimum inhibitory concentration, MIC), mikrogramm/milliliter egységekben. E célra az International Collaborative Study on Antibiotic Sensitivity Testing (Nemzetközi Közös Tanulmány az Antibiotikumok Érzékenységének Meghatározására, Ericcson és Sherris, Acta. Pathologica et Microbiologia Scandinav., Supp., 217, A és B szekció, 64—68 [1971]) 65 által ajánlott módszert alkalmazzuk, amelyben agy-szív infúziós agart és inokulum replikázó eszközt használunk. Inokulumként éjszakán át növesztett tenyészetek 100-szoros hígítását használjuk (20 000—10 000 sejt, körülbelül 0,002 ml térfogatban, ezzel a mennyiséggel oltunk be egy Petri-csészében levő 20 ml térfogatú agy- 60 szív infúziós agart). A vizsgálandó anyagok kezdeti koncentrációja : 200 mikrogramm/milliliter, ezeket az oldatokat kétszeresre hígítjuk, és minden vizsgált vegyülettel 12 párhuzamos mérést végzünk. A Petri-csészéket 18 órán át 37 °C hőmérsékleten tartjuk, majd az eredményeket leolvassuk. A leolvasásnál a különálló telepe-6
