186108. lajstromszámú szabadalom • Eljárás stabil S-adenozil-metionin sók előállítására
186108 2 tői függ, hogy metilcsoport donorként hat, mint számos transzmetiláz enzim természetes szubsztrátuma, amelyek a lipid, proteid és glukoproteid metabolizmus alapreakcióit katalizálják. Az új sók fontossága tehát lényegében abban áll, hogy az S-adenozil-metionint abszolút stabillá teszik 45 °C-ig terjedő hőmérsékleteken, ezáltal lehetővé téve, hogy transzmetíláló aktivitását az emberi szervezetben 100%-ig kihasználják, olyan toxikus lebomlási termékek képződésének kockázata nélkül, amelyek negatívan befolyásolnák a SANT által aktivált biológiai folyamatokat. Toxicités Meghatároztuk az akut toxicitást egérben, és a következő értékeket kaptuk mindkét sóra: LD;0 orálisan alkalmazva>3 g/kg LD5o intravénásan> 1,1 g/kg Tűrési és krónikus toxicitási vizsgálatokat végeztünk Wistar és Sprague-Dowley tenyésztésű patkányokon 20 mg/kg-ot adagolva a termékből naponta, 12 hónapon át. A kezelés végén különböző szervek és rendszerek nem mutattak patalógiás elváltozást. Teratogén vizsgálatokat végeztünk nyulakon. A maximális terápiás adagnál tízszerte nagyobb sómennyiség adagolásánál sem tapasztaltunk teratigén hatást és az embrió vagy a magzat deformálódását. 200 mg/kg-ig terjedő intravénásán adott adagok sem okoznak pirogén tüneteket nyúlban. Vénásan adagolva 40 mg/kg nyúlban és patkányban nem okoz változást a carotis-vérnyomásban, a szív és a légzés ritmusában, vagy az EKG- ban. Intramuszkuláris injekció helyi tűrőképessége 30—60 napon át ismételt adagolásnál és a nyúl fülének külső szélén levő vénába adott intravénás injekciónál kitűnőnek bizonyult. Farmakológia Patkányokon végzett teljes kísérletsorozat azt mutatja, hogy az új sók mind lipid- és proteindús étrend által Handler szerint előidézett zsírmájban, mind akut alkoholmérgezés és egyéb toxikus anyagok által okozott zsírmájban jelentékeny védő és oldó hatást fejtenek ki, már 10 mg/kg SAM+ ada golásánál. Patkányokon kisérleti úton pl. Triton S-sel előidézett hiperlipémiánál az új sók feltűnő hipolipémiás hatást mutattak, amely az alkalmazott adaghoz, vagyis 10 mg/kg-hoz viszonyítva (újra SAM ' -ban kifejezve), sokkal erősebb, mint egyéb hipolipémiás aktivitású szernél. Koleszterinben és fruktózban dús étrenddel a teroszklerotikussá tett csirkében az új termék párén - terálisan adva 10 mg/kg-os adagokban csökkentette a vér koleszterinszintjét és előnyösen befolyásolta a kontrollcsoportban a mellkasi és hasi verőérrel és az agyalapi hajszálerekkel kapcsolatosan tapasztalt bántalmakat. A foszfolipid-metabolizmussal kapcsolatban kísérletileg azt találtuk, hogy a patkányok májszövetében megnőtt a foszfatidil-kolin mennyisége, változatlan májzsírosodás mellett. A foszfatidil-kolin mennyiség kifejezett növekedését megállapítottuk a vérben levő alfa-lipoproteinek rovására a béta/alfa lipoprotein-arány kísérleti változásával is. Mindezek a vizsgálatok tisztán mutatják az új sók gyógyító hatására a lipid-anyagcsere változásaiban. Egy további vizsgálatsorozat patkányokon kimutatta, hogy 1 mg/kg-os adagok a májban és az izomzatban felszaporítják a glikolén-tartalékot, ami kimutatható hisztokémiai módszerekkel és kvantitatív meghatározásokkal egyaránt. Alloxánnal előidézett kísérleti diabéteszben az inzulinmennyiség, amely a normál vércukorértékre való visszatéréshez szükséges, lényegesen csökkent 0,5 mg/kg SAM+-nak megfelelő adagok hatására. Ez a vizsgálatsorozat bizonyítja a találmány szerinti új vegyületeknek a cukor-metabolizmusra kifejtett, határozottan pozitív hatását. Végül, kísérletileg előidézett hipodiszproteinémiát kezeltünk 10 mg/kg-os SAM adagokkal. Azt találtuk, hogy az említett termék visszaállítja a proteinémia-összértéket a normálisra azáltal, hogy lényegesen növeli az albumin-szintet és ezzel kifejezett protein-anabolikus hatást mutat. Ez és egyéb hasonló vizsgálatok bizonyítják az új termékek gyógyító hatását a protein-metabolizmus zavarainál. Összefoglalva, az előbbiekben említett és sok más farmakológiai vizsgálat alapján, amelyek lehetővé tették, hogy az új sók az emberi szervezetre gyakorolt hatásait sokirányúan kipróbáljuk, az új termékek aktivitása klinikailag megalapozott a májgyógyászatban akut és krónikus májmérgezésnél, a neurológiában antidepresszánsként, és az oszteológiában reumatoid artritisz esetén. Az embergyógyászat számos egyéb területén az aktivitás vizsgálata folyamatban van. Az új sók adagolhatok orálisan, vagy intramuszkuláris vagy intravénás injekciók útján. Egyéb lehetséges adagolásmódok: kúpok, szemcseppek vagy aeroszól formájában helyileg alkalmazva. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás a (II) általános képletű S-adenozil-metionin (SAM) sók előállítására, ahol X egy 2,5- nél alacsonyabb pK-jú farmakológiailag elfogadható sót képző erős szervetlen sav — a hidrogén-jodid és hidrogén-bromid kivételével — ekvivalens mennyisége, n pedig 4, 5 vagy 6, azzal jellemezve, hogy valamely SAM só vizes oldatát gyengén savas ioncserélő gyantával töltött oszlopon átengedve megtisztítjuk, a SAM-t kívánt HX sav vizes oldatával, előnyösen 0,1 n oldatával eluáljuk, az eluátumhoz hozzáadjuk a kívánt sónak megfelelő, pontosan sztöchiometrikus mennyiségű savat, vagy adott esetben eltávolítjuk a savfölösleget, majd az oldatot koncentráljuk, és a sót liofilizáljuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
