185715. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anyarozs alkaloidok, főként ergokrisztin parazita úton való előállítására
185 715 meyer-lombikban a következő összetételű táptalajt oltottuk be: malátakivonat 2 g/g % . szaharóz 5 g/g % borostánykősav 1 g/g % kálciumnitrát 0.1 g/g % káliumdihidrogénfoszfát 0,025 g/g % magnéziumszulfát 0,025 g/g % káliumklorid 0,0125 g/g % . vasszulfát 0,0008 g/g% . cinkszulfát 0,0003 g/g % A táptalaj pH értékét 25 %-os ammóniumhidroxiddal 5,4-re állítottuk be. A tenyésztést 24-26 "C-on rázógépen (230 ford/perc) 144 óráig végeztük. A fermentlé spóraszáma: 6,5 x 105 spóra/mm3. A biomasszát elválasztottuk, majd 6 %-os glukóz oldatban homogenizálva mélyhűtöttük, -40 °C- on. A mélyhűtött oltóspórából dezintegrálással fertőző folyadékot készítettünk, amelynek spóraszámát 30 ezer spóra/mm3 koncentrációra állítottuk be. Az ily módon elkészített fertőzőfolyadékkal ,Sopronhorpácsi tetraploid’ rozsfajtát fertőztünk 30 m2-es parcellákon. A fertőzést kézi oltólapokkal végeztük. Az új, valamint az összehasonlításul vizsgált régi törzzsel elért eredményeket az alábbi táblázat mutatja: 10 15 20 Szabadalmi igénypont Eljárás anyarozs alkaloidok, főként ergokrisztin előállítására, Claviceps purpurea spóratenyészetével parazita körülmények között rozson, azzal jellemezve, hogy mikroorganizmus törzsként az Országos Közegészségügyi Intézetnél 00233 számon letétbe helyezett Claviceps purpurea törzsvariánst alkalmazzuk. 25 Törzs Ezerszkleróciumtömeg (g) Terméseredmény (kg/ha) Ergokrisztin (mg/g) Ergokrisztin hozam (g/ha) Új törzsvariáns OKI 00233 195 300 9,6 2880 Régi törzs OKI 00163 187 275 6,2 1075 2. példa Az OKI 00233 számú törzset az I. példában leírt táptalajon tenyésztettük, majd BIOSTAT fermentorban oltóanyagot állítottunk elő. A fermentléből centrifugával elválasztott biomasszát mélyhűtéssel, -40 *C-on tartósítottuk. A mélyhűtött oltóspóra készítményből előállított fertőzőfolyadékkal, 4 ismétléses blokkrendszerben 3600 m2-es parcellákat fertőztünk az üzemi fertőzéssel megegyező paraméterek között. Az új, valamint az összehasonlításul használt régi törzzsel elért eredményeket az alábbi táblázat tartalmazza: Törzs Ezerszkleróciumtömeg (g) Terméseredmény (kg/ha) Ergokrisztin _ (mg/g) Ergokrisztin hozam (g/ha) Új törzs OKI 00233 208 330 8,2 2706 Régi törzs OKI 00163 190 240 6,0 1440 Ábra nélkül
