185701. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anyarozs alkaloidok, főként béta-ergokriptin parazita úton való előállítására
1 185 /Ul 2 1. példa Az OKI-nál 00218 szám alatt deponált törzs 21 napos maláta agar tenyészetével 500 ml-es Erlenmeyer lombikban a következő összetételű táptalajt 5 oltottuk be: malátakivonat szaharóz borostyánkösav kálciumnitrát káliumdihidrogénfoszfát magnéziumszulfát káliumklorid vasszulfát cinkszulfát 2.0 g/g% 5.0 g/g% l,0g/g% 10 0,1 g/g% 0,025 g/g% 0,025 g/g% 0,0125 g/g% 0,0008 g/g% 15 0,0003 g/g% A táptalaj pH-értékét 25%-vs ammóniumhidroxid ' izes oldalával 5,4-re áílitctluk be. A tenyésztést /:4-26°C-on rázógépen (230 ford/perc) 144 óráig végeztük. A fermentlé spóraszáma: 4,5 • 105 spóramm3. A biomasszát elválasztottuk, majd 6%-os ílukóz oldatban homogenizálva —40 °C-on mélyhiuöttük. A mélyhűtött oltóspórából dezintegrálásMl fertőző folyadékot készítettünk, amelynek sport számát 30 ezer spóra/mm3 koncentrációra állítottuk be. Az ily módon elkészített fertőzőfolyadékkal Sopronhorpácsi tetraploid’ rozsfajtát fertőztünk 30 m2-es parcellákon. A fertőzést kézi oltólapokkal végeztük. Az új, valamint az összehasonlításul vizsgált régi törzzsel elért eredményeket az alábbi táblázat mutatja: Törzs Ezerszkleróciumtömeg (g) Terméseredmény (kg/ha) Bétaergokriptin (mg/g) Bétaergokriptin hozam (kg/ha) Új törzs OKI 00218 185 300 2,5 0,750 Régi törzs OKI 00217 120 130 0,5 0,065 2. példa Az OKI 00218 számú törzset az 1. példában leírt táptalajon és módon tenyésztettük, majd BIOSTAT fermentorban nagymennyiségű oltóanyagot állítottunk elő. A fermentléből centrifugával elválasztott biomasszát mélyhűtéssel, -40 °C-on tartósítjuk. A mélyhűtött oltóspóra készítményből elő35 állított fertőzőfolyadékkal, 4 ismétléses blokkrendszerben 180 m2-es parcellákat fertőztünk, az üzemi fertőzéssel megegyező műszaki paraméterek mellett. Az új, valamint az összehasonlításul használt régi törzzsel elért eredményeket az alábbi táblázat tartalmazza: Törzs Ezerszkleróciumtömeg (g) Terméseredmény (kg/ha) Bétaergokripíin (mg/g) Bétaergokriptin hozam, (kg/ha) Új törzs OKI 00218 192 320 2,54 0,813 Régi törzs OKI 00217 130 150 0,43 0,064 3