185416. lajstromszámú szabadalom • Eljárás inzulin- vagy inzulin analógok előállítására
1 185 416 2 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás inzulin- vagy inzulin-analóg A-lánc S-szulfonát és inzulin- vagy inzulin-analóg B-lánc S-szulfonát oxidáló atmoszférában végzett egyesítésével inzulin- vagy inzulin-analóg előállítására, azzal jellemezve, hogy az A-lánc S-szulfonált származékát, a B-lánc S-szulfonált származékát vizes közegben — 8—12 pH-értéken,- 0,1-50 mg/ml összes proteinkoncentráció mellett, és az összes A- és B-lánc S-szulfonált származékában jelenlévő, egy —SSO3 csoportra számítva 0,4—2,5 -SH csoportot tartalmazó merkaptán jelenlétében reagáltatjuk, és az elegyet 0 °C és 25 °C közötti hőmérsékleten, levegő, mint oxigénforrás vagy oxigén jelenlétében tartjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy A-láncú S-szulfonátként és B-láncú S-szulfonátként a természetben előforduló inzulin A- és B-lánc aminosavszekvenciájának megfelelő kiindulási anyagokat alkalmazunk. 3. A 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az A-lánc S-szulfonát-származékát a B-lánc S-szulfonát-származékához viszonyítva 0,1:1-10:1 súlyarányban alkalmazzuk. 4. A 3. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az A-láncú S-szulfonát-származékot a B-láncú S- szulfonát-származékhoz viszonyítva 1:1—3:1 súlyarányban alkalmazzuk. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót 2-20 mg/ml proteinkoncentráció mellett végezzük. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakcióelegy pH-ját 9,5-11,0 közötti értéken tartjuk. 7. A 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jelle. hogy a reakcióelegy pH-ját 10,4-10,6 közötti p tartjuk. 8. Az 1—7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, 5 azzal jellemezve, hogy az összes A- és B-láncú S-szulfonát-származékban jelenlévő, egy -SSOj csoportra számítva 0,9—1,1 —SH csoportot tartalmazó merkaptánt alkalmazunk. 9. A 8. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, 10 hogy merkaptánként a ditio-treitolt vagy a ditio-eritritolt alkalmazzuk. 10. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakcióelegyet 2-10 °C hőmérsékleten tartjuk. 15 11. Az előző igénypontok bármelyike szerinti eljárás szarvasmarha, sertés vagy emberi inzulin előállítására, azzal jellemezve, hogy a fenti inzulinnak megfelelő A- és B-lánc S-szulfonált származékából indulunk ki. 12. A 11. igénypont szerinti eljárás szarvasmarha- 20 inzulin előállítására, azzal jellemezve, hogy a szarvasmarha-inzulin A-lánc S-szulfonát-származékot a B-lánc S-szulfonát-származékhoz viszonyítva 1,4:1,0-1,8:1,0 súlyarányban, 3—8 mg/ml proteinkoncentráció mellett alkalmazzuk. 25 13. A 11. igénypont szerinti eljárás sertésinzulin előállítására, azzal jellemezve, hogy a sertésinzulín A-lánc S-szulfonát-származékot a B-lánc S-szulfonát-származékhoz viszonyítva 1,0:1,0-1,4:1,0 súlyarányban, 8— 16 mg/ml proteinkoncentráció mellett alkalmazzuk. 30 14. A 11. igénypont szerinti eljárás emberi inzulin előállítására, azzal jellemezve, hogy az emberi inzulin az A-'ánc S-szulfonát-származékot a B-lánc S-szulfonátszármazékhoz viszonyítva 1,8:1,0-2,2:1,0 súlyarányban, 3—8 mg/ml proteinkoncentráció mellett alkalmaz- 35 zul • Ábra nélkü5 Kiadja az Országos Találmáryi Hivatal A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Megjelent: a Műszaki Könyvkiadó gondozásában COPYLUX Nyomdaipari és Sokszorosító Kisszövetkezet
