185324. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-karboxi-azaalkanoil-indolin- 2-karbonsav-származékok előállítására
1 185 324 2 három, 5-5 perc elteltével egyenként 0,33 jug/kg intravénás angiotenzin I dózissal indukált inger hatására létrejött nyomásváltozást meghatároztuk. Ugyancsak meghatároztuk a nyomásváltozást 5, 10, 15, 30 és 60 perccel a találmány szerinti vegyületek intravénás, vagy gyomorszondával orálisan történő adagolása után is. Ez utóbbi nyomásváltozásokat összehasonlítottuk a kezdeti értékekkel. A vérnyomásváltozás minden csökkenése az angiotenzint átalakító enzim gátlására utal. Ez a csökkenés 80%-ot is elérhet, 10 mg/kg intravénás, vagy 50 mg/kg orális adagolás eseten, és akár 60 percig is tarthat. Az angiotenzint átalakító enzim in vitro gátlása a Biochim. Biophys. Acta 293, 451 (1973) módszerével mutatható ki. Ezen vizsgálati eljárás szerint a találmány szerinti vegyületeket kívülről jéggel hűtött foszfátpufferben oldjuk, körülbelül 1 mmól koncentrációban. Ezekhez az oldatokhoz először különböző /rl-nyi mennyiségű, 1 mmólos foszfátpufferes hisztidil-leucinoldatot, majd 100 fii, 5 mmólos hippuril-hisztidil-leucinoldatot és 50 jul angiotenzint átalakító enzimet adunk hozzá. Ezt az enzimet felnőtt hímnyulak tüdejéből kálium- és magnézium-kloridot, valamint nádcukrot tartalmazó trisz-pufferrel frissen állítjuk elő. Az oldatokat 30 percen át 37 °C hőmérsékleten inkubáljuk és a további reakciót 0,75 ml 0,6 n vizes nátrium-hidroxidoldat hozzácsepegtetésével leállítjuk. Ezután szobahőmérsékleten 100 fii o-ftálaldehidet. majd 10 perc elteltével 100 fii 6 n sósavat adunk az elegyekhez. A mintákat spektrofotométerrel 360 nm hullámhossznál vízzel szemben méljük, és meghatározzuk optikai sűrűségüket. Az értékeket standard-görbével hasonlítjuk össze, amely a 30 perces inkubáció során keletkezett hisztidil-leucinmennyiségeket nanomólban kifejezve tartalmazza. Az ICso-érték meghatározására az eredményeket a hatóanyag-koncentráció függvényében ábrázoljuk. Az 1C50- érték az a koncentráció, melynek során a hatóanyag nélkül végzett kontroli-próba aktivitásának felét kapjuk. A találmány szerinti vegyületek a fenti vizsgálat során is igen aktívaknak bizonyultak, mivel ICS0-értékük 39 nM vagy az alatti érték volt. A találmány szerinti vegyületek ennek megfelelően értékes antihipertenzív szerek, különösen a magas vérnyomás csökkentésére (függetlenül annak etiológiájától). Alkalmazhatók ezenkívül szívbetegségek, például szívelégtelenség és/vagy más megbetegedések, például ödémák vagy ascites ellen, például májzsugor kezelésére. Alkalmazhatók azonban közbenső termékként is más értékes, elsősorban gyógyászati hatású termékek előállítása során is. Különösen jelentősek az olyan 11 általános képlctíí vegyületek és főként ezek indolin-2(S)-királis epimerjei, monoamidjai, a mono-(rövidszénláncú)-alkil-észterei, sói, főként gyógyászatban alkalmazható alkálifémvagy ammonium- vagy savaddíciós sói, mely képletben R jelentése hidrogénatom, legfeljebb 4 szénatomos alkU- vagy alkoxiesoport, hidroxilcsoport vagy halogénatom, m jelentése 1, 2, 3 vagy 4 egész szám, n jelentése 1, 2 vagy 3 egész szám, R' jelentése hidrogénatom vagy aminocsoport és R" hidrogénatom vagy adott esetben halogénatommal helyettesített fenilcsoport. A találmány tárgya eljárás I általános képletű vegyületek - ahol a képletben Ph jelentése szubsztituálatlan 1,2-feniléncsoport vagy egy rövidszénláncú alkil-, egy rövidszénláncú alkoxi-, egy hidroxilcsoporttal vagy egy halogénatommal helyettesített 1.2-feniléncsoport, R! jelentése hidrogénatom, rövidszénláncú alkil- vagy amino-(rüvidszén!áncú)-alkil-csoport és R2 jelentése rövidszénláncú alkilcsoport vagy adott esetben halogénatommal helyettesített fenil-(rövidszénláncú)-alkil-csoport - előállítására, azzal jellemezve, hogy a) egy III általános képletű Schiff-bázist — mely képletben P és q közül az egyik értéke 0, a másik 1, Rj, R2 és Ph jelentése a fentiekben megadottakkal egyezik -vagy valamely említett funkcionális származékát hidrogénezzük, vagy b) egy IV általános képletű vegyületet vagy funkcionálisan átalakított származékát egy V általános képletű vegyület funkcionálisan átalakított reakcióképes származékával — ahol Ph és R2 jelentése a fenti. X jelentése hidrogénatom és Y jelentése HOCO-CHR,-N-COOR0 általános képletű csoport -ahol Ro jelentése terc-butil- vagy benzilcsoport és R. jelentése a fenti -kondenzálunk és a fenti —COORn csoportot tartalmazó vegyületet hidrolizáljuk hidrogénatommá, vagy c) egy IV általános képletű vegyületet vagy funkcionálisan átalakított származékát egy V általános képletű vegyület funkcionálisan átalakított reakciókcpes származékával -ahol Ph és R2 jelentése a fenti és X jelentése -CO-CHR^Z általános képletű csoport, Rí jelentése a fenti. z jelentése aminocsoport és Y jelentése reakcióképes észterezett hidroxilcsoport -kondenzálunk, vagy d) egy VI általános képletű vegyületet, melyben Ph, Rí és Rj jelentése a fenti, a V és W csoportok közül legalább az egyik cianocsoport. a másik szabad, amidált vagy átészterezett karboxilcsoport, hidrolizálunk vagy aikoholízisnek vetünk alá. vagy e) egy VII általános képletű vegyületben vagy funkcionális származékában - ahol R,, R2 és Ph jelentése a fenti - az indolrészt indolinrésszé hidrogénezzük, és kívánt esetben egy előállított amidot szabad savvá vagy egy rövidszénláncú alkilészterré, vagy egy előállított szabad savat egy rövidszénláncú alkilészterré vagy egy előállított rövidszénláncú alkilésztert egy másik találmány szerinti rövidszénláncú alkilészterré alakítunk át. A III általános képletű vegyületek hidrogénezését, az önmagában ismert módon, vagy katalitikusán aktivált hidrogénnel, vagy nascens hidrogénnel, például hidrogénnel platina, palládium vagy nikkel katalizátor jelenlétében, vagy elektrolitikus úton aktivált hidrogénnel, vagy fém-sav vagy fém-alkohol keverékkel végezhetjük. Hidrogénezöszerként alkalmazhatunk ezeken kívül még egyszerű vagy komplex könnyűfém-lűdrideket, például boránokat. előnyösen alkálifém-hidrideket vagy cianobór-hidrideket. Az V általános képletű vegyüjetek funkcionálisan átalakított reakeióképes származékaiként előnyösen az észter-halogenidek, az egyszerű vagy vegyes anhidridek, például az említett savkloridok rövidszénláncú alkil-3 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
