185323. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tetrapeptid-karbonsav-hidrazidok előállítására
1 185 323 2 csillapítónak tekinthető 2,5 mg/testsúly kg morfin hatása. Ezen túlmenően szubkután adagolás esetén az 1 általános képletű fájdalomcsillapító hatása 700-szor nagyobb mint a morfiné. A találmány szerinti 1 általános képletű vegyület ezen túlmenően a gyomor és béltraktus mozgását gátló hatással is rendelkezik és így alkalmas a gyomor és béltraktus megbetegedései, így a hasmenés kezelésére is. Az I általános képletű vegyületek és farmakológiailag megfelelő savaddíciós sói emlős állatok, mint egér, patkány, nyúl, kutya, majom és emberek fájdalomcsillapítására, beleértve az előrehaladott rákos betegségeket, a gyomor- és béltraktus megbetegedéseinek, mint a hasmenés, valamint elmebetegségek, így a skizofrénia kezelésére is alkalmasak. A találmány szerinti eljárással előállított 1 általános képletű vegyület és gyógyászatban alkalmazható savaddíciós sóinak toxieitása igen kicsi. Még 100 mg/testsúly kg dózis esetében sem tapasztaltak elhalálozást, ez a dózis pedig a hatásos adag feletti. A találmány szerinti eljárással előállított vegyület szabad vagy megfelelő savaddíciós sója alakjában adagolható. A szabad 1 áltrdános képletű vegyület esetében a dózis 0,001 és 20 mg/kg közötti. Az 1 általános képletű vegyület savaddíciós sójának dózisa előnyösen ugyancsak 0,001-20 mg/kg a szabad I általános képletű vegyület tartalmára számítva. A találmány szerinti I általános képletű vegyületet és sóit főképp orálisan, rektáüsan, intravénásán és szubkután ad ago Illatjuk. Különösen előnyös sebészeti műtétek esetében a folyamatos infúzió vagy a cseppinfúzió. Előnyös adagolási fonnák a tabletták, porampullák, kúpok, alkalmazás orron át, becsepegtethető készítmények is használhatók. Mivel a találmány szerinti eljárással előállított anyagok stabil vegyületek, azok fiziológiás sóoldatban is tárolhatók, de liofilezett készítményként mannittal vagy szorbittal keverve azonnali feloldásra és használatra alkalmas formában is tárolhatók. Az I általános képletű vegyülethez hasonlóan a II és 111 általános képletű vegyületek is rendelkeznek fájdalomcsillapító hatással. A találmány szerinti eljárás részletes bemutatását szolgálják az alábbi példák. A végtermékek tisztítására használt Sephadex LH-20 a Pharmacia (Svédország) terméke, az egyes előállított anyagok tisztaságát vékonyréteg-kromatográfiásan ellenőrizzük, amelyhez kovasavgél [Kieselgel 60F-254 Merck AG (NSZK)] adszorbenst használunk. Az alkalmazott íüttatóelegyek az alábbiak: Rfkloroíorm-mctanol-ecetsav (9 :1 :0,5 arányú elegye), Rf2 ; etil-aceíát-piridin-ecetsav-víz (Ő0 :20:6:10 arányú elegye). 1. példa- H-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe-NHNHCOCH3 előállítása -(I) Z-EtPhe-NHNHCOCH3 előállítása 2,3 g Z-EtPhe-OH-t és 0,78 g NH2NHCOCH3-t 30 ml DMF-ban oldunk és az oldatot jéggel hűljük. Az oldathoz 1,40 g HONB-t és 1,7 g DCC-t adagolunk, majd éjjelen át keverjük. A kivált DCU kiszűrése után az oldószert ledesztilláljuk és a maradékot 1 :1 etilacetát-éter 4 oidószerelegyben oldjuk. Az oldatot ezután 1 n vizes ammónium-hidroxid-oldattal mossuk majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószer ledesztillálása után olajos terméket kapunk. Kitermelés 2,4 g (ol^j) Rf1 = 0,63. (II) BOC-Tyr-(D)-Met-Gly-EtPhe-NHNHCOCH3 előállítása 2,8 g Z-EtPhe-NHNHCOCH3-t 50 ml metanolban oldunk és palládium-korom-katalizátor jelenlétében redukáljuk. A katalizátort kiszűrjük az oldatból, majd az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot 30 ml DMF- ban oldjuk, majd az oldathoz 3,0 g BOC-Tyr-(D)-Met- GlyOH-t és 1,0 g HOBT-t adunk és jéggel lehűtjük. A hideg oldathoz 1,5 g DCC-t adunk és éjjelen át keverjük. A kivált DCU-t kiszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot etil-acetátban oldjuk és a szerves oldatot 10%-os citromsav oldattal majd 1 n vizes ammóniumhidroxid-oldattal mossuk. Ezután betöményítjük és szilíkagélen oszlopkrom8tografáljuk (3,6X8 cm). Az elválást 5 % metanol-kloroform eluenssel végezzük, a 220-240 ml-es frakciókat összegyűjtjük és betöményítjük. A maradékot éterrel kezeljük és szűréssel porként nyerjük ki. Kitermelés: 0,39 g, op.: 97-101 °C, (<*)q -9,7° (c = 0,79, DMF), Rf1 = 0,42. Elemi analízis a C^H^OsNgS összegképlet alapján: számított (%): C 58,26, H 6,90, N 11,99, S 4,58; mért (%):C 58,06, H 6,94, NI 1,53, S 4,54. (III) BOC-Tyr-(D)-Met(0)-Cly-EtPhe-NHNHCOCH3 előállítása 0,29 g BOC-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe-NHNHCOCH3-t oldunk 2 ml ecetsavban, majd az oldatot lehűtjük és ezután 0,08 ml 30%-os hidrogén-peroxidot adunk hozzá. Az oldatot 10 percig keverjük majd étert adunk hozzá és így a terméket por formájában szűréssel kinyerjük. Kitermelés: 0,27 g, op.: 111-113 °C, (a)£ -12,5° (c = 0,80, DMF), Rf1 = 0,20. Elemi analízis a C^H^OçNjS • H20 összegképlet alapján: számított (%): C 55,57, H 6.86, N 11,44, S 4,37; mért (%):C 55,30, H 6,60, NI 1,28, S 4,33. (IV) H-Tyr<D)-Met(0)-Gly-EtPhe-NHNHCOCH3 előállítása 0,20 g BOC-Tyr-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe-NHNHCOCH3- hoz 0,2 ml anizolt és 4 ml TFA-t adunk és a keveréket 10 percig rázzuk. Ezután az oldószert ledesztilláljuk és a maradékhoz étert adunk, így a terméket por formájában szűréssel kapjuk. A terméket Ambcrlit IRA 410 (ecetsavas típusú) ioncserélőn ioncserének vetjük alá, majd Sephadex LH-20 oszlopon (2,2X120 cm) tisztítjuk. Az eluálást 0,1 n ecetsawal végezzük és 285-340 ml-es frakciókat összegyűjtjük majd liofilézzük. Termelés: 0,14 g, (a)g +20.4° (c = 0,50, metanol), Rf* = = 0,22. Aminosav analízis (4% tioglikolsav) 6 n sósavas hidrolízis: Gly 0.99 (1), Met 1,00 (1), Tyr 1,04 (1). 2. példa- H-Tyi-(D)-Met(0)-Gly-EtPhe-NHNHC0CH2CH3 előállítása — (I) Z-EtPhe-NHNHCOCHjCHj előállítása 2,3 g Z-EtPheOH-ból és 0,81 g NH2NHCOCH2CH3-5 10 15 20 25 30 35 40 *5 50 55 60 65
