185320. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiailag aktív enkefalin-származékok előállítására
1 185 320 2 a fenti savakkal önmagában ismert módszerekkel állítjuk elő. Az I általános képletű vegyületekben szereplő egyes helyettesítők meghatározásából kitűnik, hogy e vegyületek olyan tetrapeptidek, amelyek C-terminális része egy primer alkohol vagy ennek éter-származéka, primer amid vagy rövidszénláncú alkil-észter. Az I általános képletű vegyületekben lévő aszimmetriacentrumok konfigurációja e vegyületek igen lényeges vonása. Kényelmi okokból az I általános képletű pentapcptidekben szereplő aminosav-egységeket a terminális aminocsoporttól kezdve megszámozzuk. Az egyes aminosav-egységek aszimmetriacentrumának konfigurációja az 1-helyzettől a 4-helyzet felé haladva: L, D, - és L. A 3-helyzetben glicin szerepel, és ezért ezen egység esetében nem beszélhetünk aszimmetriacentrumról. Az R-! jelentése a fentiek szerint lehet „1—3 szénatomot tartalmazó, primer alkilcsoport” is. Az „1-3 szénatomot tartalmazó, primer alkilcsoport” lehet metil-, etil- vagy n-propilcsoport. Az I általános képletű tetrapeptidekben szereplő egyes aminosav-egységek tekintetében a következő szempontok érvényesülnek: 1-helyzet Ez a peptid N-terminális része. Ezt az egységet az L-tirozinból származtatjuk le. Ezen egység aminocsoportja lehet helyettesítetlen, ekkor R jelentése hidrogénatom. Ezenkívül ezen aminosav-egység aminocsoportja lehet egyszeresen helyettesített, tehát lehet valamely N-inetil- vagy N-etil-származék. Alihoz, hogy parenterális adagolás mellett rendkívül erős fájdalomcsillapító hatású vegyületeket kapjunk, az 1-hclyzetben lévő tirozilcsoportnak előnyösen az aminocsoportján helyettesítetlennek kell lennie. Alihoz, hogy orális adagolás mellett rendkívül erős fájdalomcsillapító hatású vegyületeket kapjunk, az 1-helyzetben lévő tirozilcsoport aminocsoportjának előnyösen helyettesítettnek kell lennie. E helyettesítő előnyösen metiicsoport. 2-helyzet Az I általános képletű peptidek 2-helyzetében lévő aminosav a D-alanin (D-Ala). 3-helyzet A peptid ezen helyzetében glicin (Gly) áll. 4-helyzet A peptidlánc 4-helyzetében meta-helyzetben helyettesített L-fenil-alanin [Phe(X)] áll. E csoport aminocsoportjának helyettesítője (Rj) például metil-, etil-, n-propil- vagy ciklopropii-mctil-csoport lehet. R! jelentése előnyösen 1—3 szénatomot tartalmazó primer alkilcsoport vagy ciklopropil-metil-csoport. Legelőnyösebben Rt jelentése etil- vagy ciklopropil-metil-csoport. Továbbá az L-fenil-alanin a gyűrű meta-helyzetében is helyettesített. A helyettesítő bróm-, jód- vagy klóratom, vagy metiicsoport lehet. Előnyösen e helyettesítő brómvagy jódatom, és legelőnyösebben brómatom. A jelen leírásban az alábbi, jól ismert és a szakirodalomban széles körben alkalmazott további rövidítéseké:: használjuk: BOC - tercier-butoxi-karbonil-csoport Gly — glicin Phe — fenil-alanin IBCF — klórhangyasav-izobutil-észter NMM — N-metil-morfolin. Az I általános képletű vegyületeket a peptidszintézis szokásos módszereivel állítjuk elő. Egyes 1 általános képletű vegyületek előállítása során részleges racemizáció következhet be. Ha ilyen racemizáció be is következik, ez sohasem olyan mértékű, hogy az I általános képletű vegyületek fájdalomcsillapító hatása ezáltal szignifikánsan megváltozzék. Az I általános képletű vegyületeket előállíthatjuk szilárd fázisú, vagy klasszikus, oldatban lefolytatott peptidszintézis útján. Ha a szilárd fázisú módszert követjük, akkor a peptidláncot valamely gyantahordozón lépésenként építjük fel, általában valamely p-metilbenzhidril-amin típusú gyantán, vagy klór-metilezett polisztirol-gyantán. Végül a terméket 0 °C hőmérsékleten hidrogén-fluoriddal vagy ecetsavval hasítjuk le a gyantáról, és általában kromatográfiás úton tisztítjuk. Az oldatban lefolytatott szintézis során a peptidláncot úgy építjük fel, hogy a különböző aktivált és védett aminosavakat majdnem tetszés szerinti sorrendben kapcsoljuk össze, majd a termékről á védőcsoportokat valamely alkalmas reagenssel, például valamely savval, mint pélcáuí trifluor-ecetsawal (TFA), p-toluol-szulfonsavval (TS \), benzol-szulfonsawal (BSA), metán-szulfonsavval (MSA), nafíalin-szulfonsavval, sósavval telített ecetsavval vagy hangyasavval hasítjuk le, A védőcsoportok lehasítását általában valamely, a karbonium-ionokat megkötő szer, például anizol, tioanizol vagy trietil-szilán jelenlétében, előnyösen anizol jelenlétében végezzük. E reakciókat az átlagosan képzett peptid-kémikus számára jól ismert, szokásos körülmények között végezzük. így pélcául a trifluor-ecetsawal végzett hasítási reakciót kör ilbelül —10 °C és körülbelül +30 °C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre. Bármelyik módszert is követjük, az I általános képlete vegyületek előállítása abban áll, hogy aminosavakat, vagy peptidfragmenseket reagáltatunk egymással oly mó lon, hogy az egyik aminosav vagy peptidfragmens karboxilcsoportját a másik aminosav vagy peptidfragmens aminocsoportjával reagáltatjuk, s így amidkötést hozunk létre. A hatékony kapcsolás érdekében kívánatos. hogy egyrészt a reakcióban közvetlenül részt nem vevő valamennyi reakcióképes csoportot megfelelő védőcsoportok segítségével inaktiváljuk, másrészt pedig, hogy a kapcsolni kívánt karboxilcsoportot a kapcsoláshoz megfelelő módon aktiváljuk. Ennek érdekében gór dósán kell meghatározni mind az egymást követő reakciók sorrendjét és reakciókörülményeit, továbbá megfelelő védőcsoportokat kell alkalmaznunk althoz, hogy a kívánt peptidet elő tudjuk állítani. Az I általános képletű vegyületek előállítása ■ során felhasznált valamennyi aminosavat, amely a szükséges védőcsoportokat és aktiváló csoportokat tartalmazza, a peptidszintézisben szokásos, ismert módszerekkel állítjuk elő. Az I általános képletű vegyületek totálszintézisének 3 5 10 15 2( 25 30 35 40 45 50 55 60 65
