185247. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vinblantin-karboxamid-származékok előállítására
185247 2 dikloridban savanhidrid felesleggel kezelve, és a keveréket környezeti hőmérsékleten (körülbelül 25 °C) 27 óráig keverve VLB-3-(2-klór-etil)-karboxamidot kapunk (1. példa terméke). 5 4. példa 4-Dezacetil-VLB-3-(2-klór-etil)-karboxamidot a következőképpen állíthatunk elő: 10 Az 1. példa szerint eljárva VLB-3-(2-klór-etil)karboxamidot állítunk elő. A reakció során nyert termék 100 mg-jának 15 ml metanollal és 30 ml 2 n nátrium-hidroxid-oldattal készített elegyét 50 percen át visszafolyatás közben forraljuk. A me- 15 tanolt vákuumban lepároljuk, és a kapott lúgos oldatot négyszer metilén-kloriddal extraháljuk. A szerves fázisokat elválasztjuk, egyesítjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot azeotrop úton toluollal szárítjuk, és így a 2. példában megadot- 20 takkal azonos fizikai tulajdonságú 4-dezacetil- VLB-3-karboxamidot kapunk. Hasonló módon hidrolizálható a VLB-3"'-(2-klór-etil)-3-spiro-5"oxazolidin-2",4"-dion, a megfelelő 4-dezacetilamiddá. 25 5. példa 200 mg VLB-3-(2-klór-etiI)-karboxamidot 20 ml 30 etanolban oldunk. Az oldat pH-értékét 4,0±0,2-re állítjuk, 2%-os etanolos kénsav hozzácsepegtetésével. A pH-értékét 2 csepp alikvot 1 ml vízzel történő hígításával, majd pH-mérő műszerrel történő ellenőrzésével állapítjuk meg. Ezután a savas etanolos 35 oldatot szárazra pároljuk. A maradék a szulfát-só, melyet etanolból kristályosítunk ki. 6. példa 200 mg 4-dezacetil-VLB-3-(2-klór-etil)-karboxamidot 20 ml etanolban oldunk. A szabad bázist minimális mennyiségű etanolban oldjuk. A pH-t 2%-os etanolos kénsav-oldat hozzácsepegtetésével 4,0 ±0,2 értékre állítjuk. A pH-értéket 2 csepp alikvot 1 ml vízzel történő hígításával, majd pH-mérő műszerrel történő ellenőrzésével állapítjuk meg. A savas etanolos oldatot szárazra pároljuk. A maradék a szulfát-só, melyet etanolból kristályosítunk ki. A VLB-3-(2-kIór-etil)-karboxamid sejtosztódást (mitózist) gátló vegyület, amely gátolja a daganatsejtek növekedését. Ezt a hatást szokásos in vitro mitózis-gátlási próbában határozzuk meg kínai hörcsög petefészeksejt-tenyészeteken. A VLB-3-(2-klór-etil)karboxamid mitózís-indexe (15-25% gátlás) 2,0.10 2 mcg/ml (a vinblasztinéval azonos). A találmány szerinti bázisok és azok sói - melyek az itt leírt eljárásokkal állíthatók elő - in vivo is hatásosak átoltott egérdaganatokkal szemben. E hatás kimutatása céljából a vizsgálandó vegyületet intraperitoneálisan vagy orálisan, meghatározott dózisszinteken alkalmazzuk Gardner-limfoszarkomát (G.L.S.), B,e melanömát, 755 adenokarcinomát és C3H emlőrákot viselő egereknek. A következő 1. táblázat azokat az eredményeket mutatja, amelyeket egy találmány szerinti vegyülettel kezelt transzplantált egértumor kezelésekor kaptunk. E táblázatban az 1. oszlop a vegyület nevét, a 2. oszlop a beadott dózist, és a 3. oszlop a tumornövekedés gátlásának %-át (G) vagy az élettartam-meghosszabbodást (ÉM) mutatja. A következő dozírozási programot alkalmaztuk: kezelés az átoltást követően 7-10 napig minden nap; és kezelés minden 4. napon, az átoltás utáni 3. naptól kezdve (3 dózis). 1. táblázat Vegyület neve Tumor Adagolási program mg/kg x napok száma Alkalmazás módja Gátlás %-a (G) vagy élettartammeghosszabbodás (ÉM) VLB-3-(2-klór-etil)bI6 2x3 PO 43 ÉM karboxamid-szulfát 3x3 PO 42 (1)* ÉM 4x3 PO 77, toxikus ÉM 5x3 PO toxikus 0.5x3 IP 94 (4) ÉM 0,6x3 IP 64 (2) ÉM 0,7x3 IP 50 (1) ÉM 0,8x3 IP 80 (1) ÉM c3 h 0,8 x 3 IP 94 G 0,7x3 IP 86 G 0,65 x 3 IP 77 G 0,55 IP 64 VLB-3-(2-klór-etil)c3h 3x3 PO toxikus karboxamid-szulfát 2,5x3 PO 92 G 2x3 PO 58 G 1,5x3 PO 49 G 755 1-1,5 x 3 ÍP toxikus 0,75 x 3 IP 76 G 0.5x3 IP 26 G 4
