185238. lajstromszámú szabadalom • Eljárás guanidino-csoportot tartalmazó peptidek előállítására
1 185 238 2 Elemi analízis a C^H^O^N^S • H20 képlet alapján: számítolt: C 56,16% H 6,41% N 16,38% S 2,34% talált: C 56,15% H 6,71% N 16,11% S 2,18% 7. példa pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-NHEt szintézise 300 mg (Arg(MDS)-Pro-NHEt-et használunk és az 5. példában megadott módon szintetizáljuk a cím szerinti vegyületel. Kitermelés 122 mg. Optikai forgatóképesség [u]fj ~ 55,2° (c = 0,5, 5%-os ecetsav). TLC: Rf4 = 0,48 (Avicel) Aminosav-analízis (acidolízis): His, 1,02(1); Arg + elilamin, 1,83 (1 + 1); Trp, 1,01(1); Ser, 0,81(1); Glu, 1,04(1); Pro, 1,00(1); Leu, 1,03(1); Tyr, 1,03(1); Gly, 1,07(1); Átlagos kihozatal, 00,0'’,,. 8. példa Boe-Arg(M DS)-Pro-Lys(Boc)-Pro-OI 1 szintézise 50 ml metanolban feloldunk 590 mg (0,001 mól) olajos Z-Pro-Lys(Boc)-Pro-OMe-t, amelyet HPro-OMe vegyületnek Z-Lys(Boc)-ONB és Z-Pro- ONB vegyiiletekkel való sorozatos kondenzáció útján állítunk elő, és a katalitikus redukciót hagyományos módon vitelezzük ki palládiumkoromkatalizálor felhasználásával. A katalizátort szűréssel elkülönítjük és a szűrletet csökkentett nyomáson betöményítjük. A maradékot 10 ml dimelilformamidban oldjuk, az oldathoz hozzáadunk 473 mg (0,001 mól) Boc-ArgtjvlDS)-OH-l és 153 mg (0,001 mól) hidroxibenzotriazolt. Az elegyet szobahőmérsékleten reagáltatjuk 12 óra hosszat. A keletkező karbamidot szűréssel leválasztjuk és a szürletet vákuumban betöményítjük. A maradékot etilacetátban oldjuk, az etilacelálos réteget vizes nálriumhidrogénkarbonát-oldattal és 0,2 n HCl-oldatlal mossuk, szárítjuk és az etilacetátol csökkentett nyomáson ledcszlilláljuk. Az olajos maradékot, amely Boc- Arg(MDS)-Pro-Lys(Boc)-Pro-OMe, petróleumbenzinnel alaposan mossuk és 10 ml metanolban oldjuk, majd 2 ml 1 n nálriumhidroxid-oldatol adunk hűtés közben az oldathoz. Az elszappanosítási reakciót szobahőmérsékleten 2 óra alatt játszatjuk le. Ezután hűtés közben 2 ml 1 n HC’l-oldatot adunk cseppenként a reakcióelegyhez és utána az egészet vízzel hígítjuk. A keletkező olajos anyagot etilacetátlal extraháljuk. Az etilacelálos réteget vízzel mossuk és szárítjuk. Az etilacetátot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékot petroléterrel kezeljük és szűréssel kinyerjük. A keletkező port elilacetál-éter elegyből ismét kicsapjuk. Kitermelés 530 mg (58,3%-a az elméleti hozamnak). Op. 85-90 °C. Optikai forgatóképesség: [a]o - 35,6° (c = 0,5, dimelilformamid); TLC: Rf, = 0,33 Elemi analízis a C42H68Oi2N8S képlet alapján: számítolt: C 54,94% H 7,58% N 12,21% S 3,49% talált: C 55,02% H 7,65% N 12,08% S 3,63% 9. példa Boc-Arg(MDS)-Pro-Lys(Boc)-Pro-Gln-Gln- Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2 szintézise 4,5 ml trifluorecetsav és 0,5 ml víz elegyében feloldunk 485 mg Boc-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu- Met-NH2-t[J. Bergmann, M. Bienert, H. Niedvich, B. Mehlis és P. Oehme, Experientia, 30, 401 (1974)] és az oldatot 10 °C-on rázzuk 20 percig. Ezután 0,5 ml 1 n HCI-oldatot adunk az oldathoz és az elegyet csökkentett nyomáson desztilláljuk. Ezután étert adunk a maradékhoz, a csapadékot szűréssel összegyűjtjük és nátriumhidroxid felett szárítjuk. A keletkező száraz port 15 ml dimetilformamidban oldjuk és hűtés közben 0,07 ml (0,0005 mól) trietilamint adunk az oldathoz. A kapott elegyben feloldunk 448 mg (0,0005 mól) Boc-Arg(MDS)-Pro- Lys(Boc)-Pro-OH-t és 179 mg (0,001 mól) HONB-t. Az oldathoz ezután hozzáadunk 155 mg (0.0075 mól) diciklohexilkarbodiimidet és az eíegyel 24 óra hosszat keverjük. A melléktermékként keletkezett karbamidot szűréssel eltávolítjuk és a szürletet belöményitjük. A maradékhoz vizel adunk és a keletkező csapadékot szűréssel összegyűjtjük, majd etanolból kétszer kicsapjuk. Kitermelés 500 mg, amely az elméleti hozam 56,8%,-a. Op. 245-247 °C (bomlik). Optikai forgatóképesség: [ujj]’-34,0° (c = 0,5, dimetilformamid); TLC: Rf, = 0,83 Elemi analízis a C83H, 26O20N18S2 képlet alapján: számíltott: C 56,64%, H 7,22'% N 14,32% S 3,63% talált: C 56,50% H 7,15%, N 14,28% S 3,73% 10. példa H-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu- Met-NH2 (P anyag) szintézise I ml tioanizo! és 10 ml trifluorecetsav elegyében feloldunk 100 mg Boc-Arg(MDS)-Pro-Lys(Boc)Pro-Gln-G!n-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2-t és az oldatot 50 °C-on 2 óra hosszat rázzuk. A trifluorecetsavat csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradékhoz étert adunk és a keletkező csapadékot szűréssel elkülönítjük, nátriumhidroxid felett vákuumban szárítjuk és kis mennyiségű vízben oldjuk. Az oldalhoz hozzáadunk 3 ml Amberlite 1RA-410- et (acetát-forma) és az elegyet egy ideig rázzuk. A gyantát ezután szűréssel elkülönítjük és a szürletet liofilizáljuk. A porszerü liofilizátumot kis meny-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
