185238. lajstromszámú szabadalom • Eljárás guanidino-csoportot tartalmazó peptidek előállítására

oldathoz hozzáadunk 14,3 ml ciklohexilaminl (CHA). Azelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk és a keletkező kristályokat szűréssel elkülönítjük, majd acetonitrilből átkristályosiljuk. Kitermelés 48,0 g, az elméleti hozam 52,8%-a. Op. 140-141 °G.

Optikai forgatóképesség: [a]p + 5,7° (c = 0,5, metanol).

Vékonyréteg-kromatográfia (TLC): RÍ!

(CHClj-metanol-ecetsav = 9 : 1 : 0,5) = 0,25 Elemi analízis a C23H3007N4S • C6H13N képlet alapján: számított:

C 57,50% H 7,15% N 11,56% S 5,29% talált:

C 57,23% H 6,96% N 11,66% S 5,32%

(2) H-Arg(MDS)-OH szintézise

4,23 g (0,007 mól) Z-Arg(MDS)-OH-CHA-sót feloldunk 150 ml metanolban és a katalitikus redukciót hagyományos módon palládiumkorom katalizátor használata mellett végezzük. A katalizátort szűréssel elkülönítjük és a szürletet csökkentett nyomáson belöményítjük. A maradékhoz vizet adunk, a keletkező kristályokat szűréssel elválasztjuk és vízből átkristályosítjuk. Kitermelés 2,15 g. az elméleti hozam 80,5%-a.

Op. 120-122 °C (bomlik).

Optikai forgatóképesség: [a]%-7,8° (c = 0,7 metanol)

TLC: Rf2 (etilacetát-piridin-ecetsavvíz = 30 : 20 : 6 : 11) = 0,16; Rf4 (n-bulanol-etiiacetát-víz =1:1:1) = 0,52 Elemi analízis a CI5H2405N4S ■ XA H20 képlet alapján: számított:

C 47,23% H 6,61% N 14,69% S 8,41% talált:

C 47,68% H 6,58% N 14,69% S 8,47%

(3) Boc-Arg(MDS)-OH szintézise

1,12 g (0,003 mól) H-Arg(MDS)-OH-l feloldunk 1,65 ml vízben és az oldathoz hűtés közben hozzáadunk 0,63 ml (0,0045 mól) trietilamint. A kapott oldathoz erőteljes keverés közben hozzáadjuk 793 mg (0,0033 mól) terc-butil-S-4,6-dimelilpirimidin-2-il-liokarbonát 1,65 ml dioxánnal készített oldatát. Az elegyet 12 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük és utána a dioxánt ledesztilláljuk. A maradékot vízzel hígítjuk és a vizes réteget etilacetáttal mossuk. A vizes réteget ezután 6 n sósav oldattal hűtés közben megsavanyítjuk és a keletkező olajat etilacetáttal extraháljuk. Azelílacetátos réteget vízzel kétszer mossuk és szárítjuk, majd az etilacetátol csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A képződött kristályokat petroléterrel kezeljük, szűréssel elkülönítjük és etilacetálból álkristályosítjuk.

Kitermelés 1,35 g, az elméleti hozam 95.7%-a. Op. 175-176 °C (bomlik)

Optikai forgatóképesség: [a]„+ 3,5° (c = 0,5, metanol) TLC: Rf, = 0,34

Elemi analízis a C2oH3207N4S képlet alapján számított:

C 50,83% H 6,83% N 11,86% S 6,79%, talált:

C 50,96%; H 7,07%; N 11,56%, S 6,63%,

38 2

Kísérleti példa

100 gmól H-Arg(MDS)-OH-t kezelünk:

(1) 2 ml trilluorecetsav és 0,1 ml tioanizol elegyében 50 °C-on 1 óra hosszat;

(2) 2 ml trilluorecetsav és 0,1 mi tioanizol elegyében szobahőmérsékleten (21 °C) 5 óra hosszat;

(3) 2 ml triíluorecetsav és 0,1 ml anizol elegyében 50 °C-on 1 óra hosszal;

(4) 2 ml trifluoreeetsavban 50 °C-on 1 óra hoszszat.

Mindegyik esetben a trifluorecetsavat csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, a maradék vízben oldjuk és éterrel egyszer mossuk az oldatot. Az elegyel 100 ml-re állítjuk be és megelemezzük aminosavakra. Az argíninkitermelést ily módon meghatározzuk. Az eredményeket az 1. táblázatban adjuk meg.

I. táblázat

Hőmérséklet

(°C)

Idő

(óra)

Argkiterme'és (%)

TFA-tioanizol

50

1

93,2

(95: 5)

TFA-tioanizol

21

5

89,3

(95 : 5)

TFA-anizol (95 : 5)

50

1

79,4

TFA

50

1

78,0

TFA: trilluorecetsav; aminosav-analizátor: Hitachi Model 835

2. példa

Z-Arg(MDS)-Pro-NHEl szintézise

70 ml metanolban feloldunk 2,76 g (0,01 mól) Z-Pro-NHEl-t és az oldathoz ezt követően hozzáadunk 1.90 g (0,01 mól) p-toluolszulfonsavat. Ezután a katalitikus redukciót hagyományos módon végezzük palládiumkorom-katalizátor használata mellett. Ezt követően a katalizátort szűréssel elkülönítjük és a szürletet belöményítjük. A maradékot 50 ml dímetilformamidban oldjuk és az oldathoz jeges hűtés közben hozzáadunk 1,40 ml (0,01 mól) trietilamint. Ezután 6,06 g (0,01 mól) Z-Arg(MDS)OH-CHA-sóból készített Z-Arg(MDS)-OH-t és 1,54 g (0,01 mól) hidroxibenzotriazolt adunk az elegyhez és oldjuk. A kapott oldathoz hozzáadunk

2.06 g (0.01 mól) diciklohexilkarbodiimidet és az eiegyet 24 óra hosszat keverjük. A keletkező karbamidol kiszűrjük és a szürletet vákuumban betöményíljük. A maradékhoz elilacetátot adunk és az etilacetálos réteget vizes nátriumhidrogénkarbonál-oldattal és 0,2 n HCl-oldattal mossuk. Az etilacelátot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékot petroléterrel kezeljük, a keletkező porszeríi szilárd anyagot szűréssel elkülönítjük és szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, az eluálást kloroformmal végezzük.

Kitermelés 3,5 e, az elméleti hozam 56,6%-a.

Op. 65-67 °C. "

Optikai forgatóképesség: [ajjj1— 13,8° (c = 0,5, dimelilformamid).

TLC: Rf, = 0,47

85 2

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

4