185069. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 5,6,7,7a-tetrahidro-4H-tieno[3,2-c[piridin-2-on-származékok előállítására
1 2 185.069 I. táblázat Származékok LD5Q 1. sz. 113 mg 2. sz. 116 mg 3. sz. 125 mg 4.SZ. 110 mg 5.SZ. 286 mg 6. sz. 121 mg 7. sz. 254 mg 8. sz. 278 mg 9. sz. 118 mg A referencia-vegyület 55 mg B referencia-vegyület 45 mg A tesztek azt is mutatják, hogy a találmány szerint előállított vegyületek nem okoznak lokális vagy általános reakciót vagy a biológiai kontroll zavarát, vagy mikroszkopikus vagy makroszkopikus sérülést a kü- 20 lönböző vizsgált állatfajtákon a végzett kísérletek során. Az egymást követő generációk vizsgálata nem mutatott teratogén hatást. A vegyület 5-(2-klórbenzil)-,4,5,6,7-tetrahidro-tieno[3,2-c]piridin, B vegyület 5-(2-cianobenzil)-4,5,6,7- 25-tetrahidro-tieno[3,2-c]piridin (Id. a fenti francia bejelentéseket). Farmakológiaí vizsgálatok A teszt során a trombocita-aggregációt gátló és trombózisgátló hatást vizsgáltuk az A és B referenciavegyületekkel összevetve. ^0 1) Trombocita-aggregáció-gátlő hatás Wistar patkányok nyaki verőeréből vérmintát veszünk, melyet előzőleg a teszt-vegyülettel kezeltünk. A citráttal kezelt és centrifugált ver vizsgálata szerint a plazma 600 0000 ± 20 0000 vérlemezkét tartalmaz 35 1 mm3 -ben és ezt használjuk valamennyi aggregáció mérésnél. a) Trombocita-aggregáció mérése ADP-vel (adeno-zin-difoszfáttal) 0,4 ml plazmát kezelünk egy szilikonízált mágnesvassal ellátott szilikonizált csőben. A csövet egy aggregométerbe vezetjük, amely egy optikai sűrűség változásait jegyző készülékkel van összekötve. Amikor a fény transzmissziója állandó értéket ér el, akkor 0,5 ml 10 m adenozin-difoszfát tartalmazó oldatot vezetünk a csőbe. A trombocita-aggregáció ekkor a fény transzmiszszió növelését idézi elő, majd az ezt követő dezaggregáció következtében a fény transzmissziója csökken. Az így meghatározott optikai sűrűség maximális változása a trombocitáktól mentes plazma optikai sűrűséghez viszonyítva az aggregáció intenzitását jellemzi. A méréseket a vér mintavételétől számított 2 óra hosszat végezzük és ezt a mintát 3 órával a teszt-vegyülettel történt kezelés után vesszük. b) Trombocita-aggregáció mérése kollagénnel Az ADP-oldatot kollagén-oldattal helyettesítjük (szarvasmarhainből extrahálva). c) Eredemények 20 patkányból álló csoportokat használunk. Minden csoport egyszeri dózisban kapja a teszt-vegyületet orálisan adagolva. A vegyületet különböző dózisokban adagoljuk 5 mg/kg-tó! 100 mg/kg-ig terjedő tartományban. Az (I) általános képletű vegyületek jelentős hatását 12,5 mg/kg dózisnál észleljük, míg az A és B referencia-vegyületek esetében 100 mg/kg dózis alkalmazása szükséges hasonló hatás eléréséhez. A kapott eredményeket a II. és III. táblázatban foglaljuk össze. A táblázatok a trombocita-aggregáció százalékos gátlását mutatják a kontroll kísérlethez viszonyítva 3 órával a teszt-vegyülettel történő kezelése után. ilÜfelázat, ADP-teszt Gátlási százalék 5 mg/kg 12,5 mg/kg 25 mg/kg 50 mg/kg 100 mg/kg 1. sz. származék 51,0 83,6 83,7 84,0 84,1 2. sz. származék 47,8 82,6 82,9 83,7 83,7 3. sz. származék 48,1 82,4 83,0 83,5 83,6 4. sz. származék 48,0 81,9 82,1 82,8 82,9 5. sz. származék 48,4 82,0 82,4 83,2 83,5 6. sz. származék 48,7 83,0 83,4 83,9 83,9 7. sz. származék 47,6 82,7 82,9 83,1 83,2 8. sz. származék 48,0 82,8 83,1 83,3 83,4 9. sz. származék 48,4 83,1 83,4 83,7 84,0 A referencia-vegyület 0 0 0 34,6 63,2 B referencia-vegylilet 0 0 0 35,5 63,8 4
