184706. lajstromszámú szabadalom • Eljárás jelzett gibberelinek előállítására
1 2 MS: m/e 332 (M+, illetve M')r IR (CHCI3): Xmax 3610 (OH), 2820, 2725 és 1725 (aldehid) és 1770 cm'1 (7-lakton-CO). A [6-3H]-6-epigibberellin-Ai-7-aldehid szintén amorf anyag, fajlagos radioaktivitása 1,48 mCi/ /minői. fa)?/= -3,8° (c= 0,38 - etanol), MS: m/e 332 (M+, ill. M'). IR (CHCI3): 3605 (OH), 2725 és 1725 (aldehid), 1775 (7-lakton-CO) és 1665 cm'1 (=CH2). 332.4 mg (1 mmól) (6-3H]-gibberellin-Ai-7- -aldehidet (melynek fajlagos radioaktivitása 1,32 mCi/mmól) 3 ml ecetsavanhidriddel acetilezünk 3 ml piridinben. Két óra reakcióidő eltelte után az elegyet vákuumban bepároljuk, és a nyers [6-3H]-0(3)-acetil-gibberellin-A1-7-aldehidet 8 jnl abszolút piridinben oldjuk, és keverés közben hozzáadunk 200 mg (2 mmól) króm-trioxidot. A reakcióelegyet 2 órán át keverjük, azután bepároljuk, étert adunk a maradékhoz és 2 s%-os sósavval többször kirázzuk. Az éteres fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot 10 ml 0,2 n nátrium-metoxid-oldattal dezacetilezzük 15 percen keresztül. A reakciót szobahőmérsékleten hajtjuk végre. A reakcióelegyet jégecettel megsavanyítjuk, vákuumban bepároljuk, 2 s%-os sósavat adunk hozzá és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk, bepároljuk, a maradékot kromatografáljuk, 8:2 tf-arányú kloroform/etil-acetát elcggyel eluálva 61,7 mg átalakulatlan [6-3 H]-gjbberellin-Ai-7-aldehidet kapunk. Az eluálást növekvő etil-acetát-tartalmú kloroform/etil-acetát eleggyel folytatva 4:6 tf-arányú frakciókból 210 mg (74%) f6-3H]-gibberellin-A1-t kapunk. A termék fajlagos radioaktivitása 1,14 mCi/mmól, olvadáspontja etil-acetát és n-hexán elegyéből átkristályosítva 256—259 °C. [a]?/ = +35,8 0 (c= 0,52 — etanol), MS: m/e 348 (M+, ill. M'), IR (Nujol): Xmax 3390 (széles, OH), 1745 (7- -lakton-CO), 1710 (karboxil-CO) és 1660 cm'1 (=ch2). 332.4 mg (1 mmól) [6-3H]-6-epigibberellin-A1- -7-aldehidet (amelynek fajlagos radioaktivitása 1,48 mCi/mmól) 3 ml ecetsavanhidriddel acetilezünk 3 ml abszolút piridinben. Két óra állás után a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, és a kapott nyers [6- -3H]-0(3)-acetil-6-epigibberellin-Ai-7-aldehidet 8 ml abszolút piridiben oldjuk. Az oldathoz keverés közben hozzáadunk 300 mg (3 mmól) króm-trioxidot. 18 óra reakcióidő után a reakcióelegyet betöményítjük, etil-acetátot adunk hozzá, és többször kirázzuk 2s%-os sósavval. A szerves fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot 10 ml 0,2 n nátrium-metoxid-oldattal dezacetilezzük. 15 percig állni hagyjuk szobahőmérsékleten, majd jégecettel megsavanyítjuk a reakcióelegyet, azután vákuumban bepároljuk, a maradékhoz 2 ï%-os sósavat adunk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist nátirum-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. 7:3 tf-arányú kloroform/etil-acetát eleggyel eluálva 68,2 mg [6-3H]-6-epigibberellin-Ai-7-aldehidet kapunk vissza. Az eluálást növekvő etil-acetát tartalmú kloroform/etil-acetát gradienssel folytatva a 3:7 tf-arányú frakciókból 117,1 mg (42%) [6-3H]-6--epigibberellin-Ai-t kapunk. A termék fajlagos radioaktivitása 1,26 mCi/mmól. A termék amorf anyag. [«]?/ = —8,6 0 (c= 0,53 — etanol), MS: m/e 348 (M+, ill. M'). IR (Nujol): Xmax 3410 (széles, OH), 1720 (karboxil-CO) és 1755 cm'1 (7-lakton-CO). 8. példa 1,1 g (3,33 mmól) gibberellin-As-öt (XVII. számú vegyület) 10 ml vízmentes tetrahidrofurán és 10 ml vízmentes dioxán elegy ében oldunk. Az oldathoz —15 °C hőmérsékleten 343 mg (1,66 mmól) diciklohexil-karbodiimidet adunk. A reakcióelegyet 12 órán át 5 °C-on állni hagyjuk, azután kiszűrjük belőle a diciklohexil-karbamidot. Ezután 378 mg (10 mmól) nátrium-bór-hidridet adunk hozzá. Két óra reakcióidő után 2 ml jégecetet adunk a reakeióelegyhez, azután vákuumban bepároljuk. A maradékhoz étert adunk és 10-szer kirázzuk telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal. Az éteres fázist nátrium-szulfáton megszárítjuk és bepároljuk, a maradékot kromatografáljuk. 7:3 tf-arányú kloroform/etil-acetát eluálva 353 mg (67%) 6/?-(hidroxi-metil)-7-nor-gibberellin-A5 -öt kapunk. A megsavanyított vizes fázisokat éterrel extraháljuk, és az extraktumokat az előbbi módon feldolgozva kloroform és etil-acetát 9:1 tf-arányú, illetve 8:2 tf-arányú elegyével eluáljuk. 446 mg (82%) gibberellin-As-öt kapunk. 323,4 mg (1,5 mmól) piridinium-klór-kromát 5 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatához argon atmoszférában, keverés közben szobahőmérsékleten hozzácsepegtetjük 316,4 mg (1 mmól) 6/3- -(hidroxi-metil)-7-nor-gibberellin-As 5 ml vízmentes diklór-metánnal készített oldatát. Pufferként 100 mg nátrium-acetátot adunk az oldathoz. Két óra múlva a reakeióelegyhez 50 ml étert adunk. Az éteres fázist elválasztjuk, a visszamaradó részt éterrel többször extraháljuk, Az egyesített éteres extraktumokat vízzel többször mossuk, nátrium-szulfáton megszárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot kromatografáljuk. n-Hexán és kloroform 1:9 tf-arányú elegyével végzett eluálás után 222,3 mg (79%) gibberellin-A5-7-aldehidet kapunk, amely amorf anyag. MS: m/e 314 (M+, ill. M'). IR (CHCI3) Xmax 3605 (OH), 2725 és 1725 (aldehid) és 1775 cm'1 (7-lakton-CO). Az eluálást kloroform és etil-acetát 7:3 tf-arányú elegy ével folytatva 33,3 mg reagálatlan 6/3- -(hidroxi-metil)-7-nor-gibberellin-As -öt kapunk vissza. 314,3 mg (1 mmól) gibberellin-As-7-aldehid 15 ml vízmentes piridinnel készített oldatához 2 ml hexametil-diszilazánt és 2 ml trimetil-klór-szilánt adunk, a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 órán át. állni hagyjuk, azután vákuumban bepároljuk. Ezután telített nátrium-hidrogén-karbonát oldatot adunk hozzá és éterrel alaposan kirázzuk. Az egyesített éteres fázisokat vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot foszforpentoxid felett egy éjszakán át vákuumban szárítjuk. Ezután a szililezett gibberellin-As -7-aldehidet argonatmoszférában 8 ml oxigén184.706 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 8
