184612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szomatosztatin-tipusú ciklopeptidek előállítására
1 184 612 2 A hajtógáz helyett sűrített levegőt is használhatunk, amit egy megfelelő tömítő- és kieresztőberendezéssel szükség szerint termelünk. A találmány szerint előállított új I általános képletű vegyületeket és terápiásán alkalmazható savaddíciós 5 sóikat mint gyógyászati hatóanyagokat főképpen a szomatosztatinhoz hasonló indikációk esetében használjuk, előnyösen gyógyszerkészítmények alakjában. Egy kb. 70 kg testsúlyú melegvérűnek beadható napi dózis kb. 0,1-120 mg. 10 A találmány szerinti eljárás kiviteli módját a példákkal szemléltetjük, anélkül, hogy a találmány oltalmi körét ezekre korlátoznánk. A hőmérsékleti értékeket C-ban adjuk meg. A rövidítések, amelyeket például az aminosavak, peptidek, védőcsoportok stb. megjelö- 15 lésére alkalmazunk, a szokásosak, így például a Synthese von Peptiden (kiadó: E. Wünsch) és Houben—Weyl: Methoden der organischen Chemie, Band XV. (1974. G. Thieme, Stuttgart) c. művekben összeállított rövid elnevezések. Ezek közül a következőket említjük meg: 20 BOC = terc-butoxikarbonil-csoport, Bpoc = 2-(p-bifenilil)-2-propiloxikarbonil-csoport, But = terc-butil-csoport (mint éterképző csoport) DCCI = NjN'-diciklohexil-karbodiimid, 25 Gaba = 4-aminovajsav-csoport, — NH-(CH3)—CO—, OBzl = benziloxi-csoport (mint észterképző csoport), ONP = o-nitrofenoxi-csoport (mint észterképző csoport), ONSu = szukcinimido-N-oxi-csoport, 30 OTmse = 2-(trimetilszili!.)-etoxi (mint észterképző csoport), SEOC = 2-(trimetilszilil)-etoxikarbonil-csoport, Z = benziloxikarbonil (Cbz) A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatoknál — ha más 35 megjelölés nincs — az adszorbens kovasavgél, és az egyes futtatórendszerek a következők: 45. rendszer: 52. rendszer: 101. rendszer: 10ÍB. rendszer: 112A. rendszer: 157. rendszer: 157A. rendszer: 157B. rendszer: 157C. rendszer: szek-butanol - 3%-os vizes ammónia (7:3), n-'outanol-ecetsav-víz (71,5-7,5:21) n-butanol-piridin-ec.etsav-víz (38:24:8:30) n-butanol-piridin-25 %-os vizes ammónia (40 :24 :6 :30) n-butanol-piridin-hangyasav-víz (42:24:4:20) kloroform-metanol-ecetsav-víz (70:42:0,5:10) kloroform-metanol-ecetsav-víz (90:10:0,5 :1) kloroform-metanol-ecetsav-víz (85:13:0,5:1,5) kloroform-metanol-ecetsav-víz (75:26:0,5:5) 1. példa — Asn-Phe-Phe-(D-trp)-Lys-Thr-Phe-Gaba — 60 195 mg L Asn-Phe Phe-(D-Trp)-Lys(Boc)-Thr(But)-Phe-Gaba — 65 védett oktapeptidet 5°-on nitrogénatmoszférában 89 térfogat % trifluorecetsav, 10 térfogat % víz és 1 térfogat % tioglikolsav keverékének 1,5 ml-ében feloldunk, az oldatot azonnal 25°-ra melegítjük, 90 percig szobahőmérsékleten tartjuk, majd nitrogénatmoszférában 15 ml éterrel kicsapjuk. A végtermék így kapott nyers triíluoracetátját vákuumban szárítjuk, 5 ml 1 n ecetsavban feloldjuk, és 15 ml acetátformájú AG® 1-X8 (Bio- Rad) ioncserélőn megszűrjük. Az eluátumot vákuumban bepároljuk, és a maradékot n-butanol-ecetsav-víz (2400:600:3000) rendszerben 200 lépcsőben ellenáramú megoszlásnak vetjük alá. A 168—183 frakcióban lévő fázisokat (K = 5,9) összegyűjtjük, vákuumban bepá-'oljuk, és terc-butanol-víz (1:1) keverékéből liofíiizáijuk. A cím szerinti vegyületet monoacetdt alakjában kapjuk, amely vékonyrétegkromatográfiásan három rendszerben egységes. Vékonyrétegkromatogram (Merck-féle cellulóz): 101. rendszer: Rf = 0,9 111B. rendszer: Rf = 0,9 112A. rendszer: Rf = 0,8 Az előállított vegyület — 5,4 súly % víztartalom mellett - 7,1% ecetsavat tartalmaz (gázkromatográfiásán vizsgálva). Az elméleti érték 1 mólekvivalensre számítva 6,42%. A kapott termék vízben való oldhatósága körülbelül 5 %. A cím szerinti vegyület sztearátját a következőképpen állítjuk elő: A fentiek szerint előállított acetát 200 mg mennyiségét 80 ml terc-butanolban és 2 ml vízben oldjuk, az oldathoz 50,9 mg (0,934 egyenérték) sztearinsavat adunk és a tiszta oldatot liofilizáljuk. A maradékot még egyszer oldjuk vizes terc-butanolban, majd ismét liofilizáljuk. A vékonyrétegkromatográfiás adatok megegyeznek az acetátéval. A sztearinsav-tartalom 22,4% (gázkromatográfiásán vizsgálva). Az elméleti érték 23,46%. A sztearát oldhatósága vízben 0,1%-nál kisebb, dimetilszulfoxidban körülbelül 5 %. A cím szerinti vegyület hidrokloridját a következőképpen állítjuk elő: A fentiek szerint előállított acetát 100 mg-ját 2 ml vízben oldjuk, az oldathoz hozzáadunk 1,5 ml 0,1 n hidrogénklorid oldatot, majd liofilizáljuk; a maradékot vízben oldjuk és ismét liofilizáljuk. A vékonyrétegkromatográfiás adatok megegyeznek az acetátéval. A Cl-tartalom 3,33% (titrimetríásan mérve). Az elméleti érték monohidrokloridra 3,68 % Cl. A kapott termék vízben való oldhatósága kb. 3%. A pepiid kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő: 1.1. művelet H-Phe-OTmse-hidroklorid 2,50 g Z-Phe-OTmse 25 ml metanollal készített oldatához 0,25 g 10%-os palládiuniozott szén katalizátort 7
