184612. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új szomatosztatin-tipusú ciklopeptidek előállítására
1 184 612 2 15.6 művelet Z-A sn-Phe-Phe-(D- Trp )-Lys ( SEOC)- Thr-Tyr(But )Gaba-OBzl 975 mg Z-Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(SEOC)-Thr-hidrazid (15.5 művelet) 7 ml dimetilfomiamiddal készített oldatához — (15—20)°-on 0,47 ml 4,6 n dioxános sósavat és 0,11 ml terc-butilnitritet adunk. A reakciókeveréket 15 percig állni hagyjuk, majd - 25°-on hozzáadjuk 385 mg H-Tyr(But)-Gaba-OBzl ■ hidroklorid (15.5D művelet) 0,5 ml dimetilformamiddal és 0,44 ml N-metilinorfolinnal készített oldatát, és a keveréket 15 órán át 0°-on állni hagyjuk. A terméket vízzel kicsapjuk, és acetonitrillel és metanollal eldörzsölve tisztítjuk. A termék rossz oldhatósága miatt vékonyrétegkromatográfiásan nem ellenőrizhető. 15.7 művelet H-Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(SEOC)-Thr-Tyr(But)Gaba-OH 1,1 g Z-Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(SEOC)-Thr-Tyr(But)-Gaba-OBzl 30 ml dimetilformamiddal készített oldatát 100 mg 10%-os palládiumozott/szén katalizátor jelenlétében 3 órán át hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük, a szűrletet bepároljuk, és a terméket vízzel kicsapjuk. A terméket 5 ml dimetilformamidban feloldva és 15 ml metanollal kicsapva tisztítjuk. Vékonyrétegkromatogram: 157. rendszer: Rf = 0,55. 15.8 művelet ^AsrrFheEhr(D-Trp}-Lys(SEQC)-Thr-Tyr(But)*Gabü^ 700 mg H-Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys(SEOC)-Thr-Tyr(But)-Gaba-OH (15.7 művelet), N-hidroxi-benzotriazol és 1,11 g DCCI 540 ml dimetilformamiddal készített oldatát 50 -on 21 órán át ciklizáljuk. A reakciókeverék feldolgozását a 7.3 művelet szerint végezzük. A terméket kovasavgélen oszlopkromatográfiával tisztítjuk, a tiszta terméket kloroform-trifluoretanol-metanol (87:5:8) keverékével eluáljuk. Vékonyrétegkromatogram: 157B rendszer: Rf = 0,38. 16. példa A) Injekcióoldatot készítünk, amely 2,0 mg 1. példa szerinti L Asn-Phe-Phe-(D-Trp)-Lys-Thr-Phe-Gaba — oktapeptidet (a továbbiakban hatóanyagnak nevezzük) tartalmaz. 1,0 mg jégecetet, 0,8 mg nátriumacetátot, 8,0 mg nátriumkloridot és 2,0 mg hatóanyagot 0,7 ml desztillált vízben feloldunk, és az oldatot desztillált vízzel 1 ml-re feltöltjük. Az oldatot 20 percig 120°-on autoklávban tartjuk. A sterilizálás után a pH-érték 4,5. B) 0,5 mg hatóanyagot tartalmazó injekcióoldatot állítunk elő a következőképpen: 0,5 mg hatóanyagot 0,7 ml fiziológiás nátriumklorid-oldatban feloldunk, és az oldatot 0,1 n sósavval 4,C pH-értékre savanyítjuk. Az oldatot desztillált vízzel 1 ml-re feltöltjük, és sterilen szűrjük. Hasonló módon használjuk hatóanyagnak a 2—15. példák szerinti végtermékeket. 17. példa A) 0,1 mg 16. példa szerinti hatóanyagot tartalmazó, zselatintartalmú injekcióoldatot állítunk elő a következőképpen: a hatóanyag sterilen szűrt vizes oldatát konzerválószerként fenolt tartalmazó steril zselatinoldattal melegítés közben aszeptikus körülmények között keverjük. 1 ml oldat összetétele a következő hatóanyag 0,1 mg zselatin 150,0 mg fenol 4,7 mg desztillált víz 1,0 ml-ig. A keveréket fiolákban 1,0 ml-re aszeptikusán feltöltjük. B) 0,5 mg hatóanyagot tartalmazó hasonló injekcióoldatot állítunk elő azonos módon, mint fent, így a következő összetételű keveréket kapjuk: hatóanyag 0,5 mg zselatin 280,0 mg fenol 5,0 mg desztillált víz 1,0 ml-ig. A keveréket fiolákban 1,0 ml-re aszeptikusán feltöltjük. 18. példa 0,5 mg 16. példa szerinti hatóanyagot tartalmazó készítményt, mint steril szárazanyagot állítunk elő injekcióhoz a következőképpen: 0,5 mg hatóanyagot 20 mg mamiit 1 ml vizes oldatában feloldunk. Az oldatot sterilre szűrjük, és aszeptikus körülmények között 2 ml-es ampullákba töltjük, mélyhűtjük és liofilizáljuk. Felhasználás előtt a liofilizált terméket desztillált vízben feloldjuk. Az oldatot intramuszkulárisan vagy intravénásán adjuk be. 19. példa A 16. példa szerinti hatóanyagot polifoszfát-szuszpenzió alakjában tartalmazó injekciós készítményt állítunk elő, A) 1,0 mg hatóanyaggal: 1,0 mg hatóanyag és 9,0 mg nátriumklorid 0,5 ml desztillált vízzel készített oldatát keverjük 2 mg nátriumpolifoszfát (,,Calgon N”) 0,5 ml desztillált vízzel készített oldatával. Az így kapott szuszpenzió összetétele a következő: hatóanyag l,0mg nátriumpolifoszfát („Calgon N”) 2,0 mg nátriumklorid 9,0 mg desztillált víz 1,0 ml-re. A szuszpenzió pH-értéke 6,9, intramuszkuláris beadásra alkalmas. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 23
