184390. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-[(4-hidroxi-5-pirimidinil)-ureido]-(2,3-dihidro-2-imino-4-tiazolil)-acetamido-3-metil-cef-3-ém-4-karbonsav-származékok előállítására
î 184 390 Amint a táblázatból látható, az említett vegyületek a Gram-pozitív baktériumok elleni hatásosságuk megtartása mellett a típusos Gram-negatív kórokozó baktériumokkal szemben mutatott hatásosságukat a Cerufoxim és Cephazolin hatásosságával összehasonlítva, a találmány szerinti 5 vegyületek hatásossága lényegesen jobbnak bizonyult. A vizsgálandó vegyületeket laboratóriumi fehér egerekbe növekvő adagmennyiségekben perorálisan és szubkután beadva, meghatároztuk a vegyületek heveny toxicitását. LDso-nel jelöljük azt az adagmennyiséget, amelynek al- 10 kalmazása után az állatok 50%-a 8 napon belül elpusztul. Az összes vizsgált vegyület LD50 értéke perorális beadás után 4 g/kg-nál nagyobb, szubkután beadás után 2 g/kg mennyiség beadására egyetlen állat sem pusztult el, tehát ezek a vegyületek gyakorlatilag nem toxikusak. 15 A találmány szerinti vegyületek egy sorát egerek művi fertőzése után in vivo vizsgáltuk. Patogén baktériumokként Escherichia coli ATCC 11 775 törzset alkalmaztunk. 5 % mucint tartalmazó 0,2 ml baktériumszuszpenzióval intraperitoneálisan fertőztük az állatokat. Ez állatonként körül- 20 belül 1,4 x 106 Esherichia coli baktériumsejtnek felel meg. Az NMRI törzsbeli nőstény egereket 10 állatból álló csoportokra osztottuk, ezek közül két csoport kezeletlen maradt, a többi csoportba a találmány szerinti mindenkori cefalosporin különböző adagjait beadtuk, hogy meghatároz- 25 zuk a vegyület ED50 értékét (azon adagmennyiség, amely az állatok 50%-át életben tartja). A fertőzés után 1 órával egyszer kezeltük az állatokat. A megfigyelés időtartama mindkét esetben 7 nap volt. A találmány szerinti cefalosporinok jellegzetes képviselőivel 30 kapott eredményeket a következő táblázatban foglaltuk össze: Vegyület ED50 Gxg/kg) A 0,5 D <0 3 E 0,1 -0,3 G <0,2 Cefuroxin >100 Cefaperazone (T 1551) 3,1 A találmány tárgya olyan formakológiai készítmény előállítása is, amely mind emberekben, mind állatokban fellépő fertőző betegségek kezelésére használható. 45 Előnyös gyógyszerkészítményként megemlítjük a tablettákat, drazsékat, kapszulákat, granulátumot, végbélkúpokat, oldatokat, szuszpenziókat, emulziókat, kenőcsöket, géleket, krémeket, porokat és permeteket. Az 1 általános képletű hatóanyagot vagy hatóanyagok keverékét az emberi 50 gyógyászatban vagy az állatorvosi gyakorlatban előnyösen testsúlykilogrammonként és naponként 5—500, előnyösen 10—200 mg mennyiségben, adott esetben több részletre felosztottan adhatjuk be. Az egyes adag a találmány szerinti hatóanyagot vagy hatóanyagokat előnyösen testsúlykilog- 55 rammonként 1—250, előnyösen 10—60 mg mennyiségben tartalmazza. Előfordulhat azonban, hogy a kezelendő egyén sajátosságaitól és testsúlyától a betegség jellegétől és súlyosságától, a gyógyszerkészítmény minősegétől és alkalmazásától, valamint a beadások időpontjától, illetve 60 időközeitől függően ezen az adagmennyiségen változtatni kell. Némely esetben a fent említett mennyiségnél kevesebb hatóanyag is elegendő lehet, míg más esetben a fenti hatóanyag-mennyiséget túl kell lépni. A mindenkori legkedvezőbb adagolást és a hatóanyag alkalmazásmódját 65 minden szakember legjobb tudása alapján könnyen meghatározhatja. Ha a találmány szerinti új vegyületeket takarmányadalékként alkalmazzuk, úgy ezt a takarmánnyal, illetve takarmánykészítménnyel vagy az ivóvízzel együtt a szokásos koncentrációban kell beadni. Ezzel a Gram-negatív és Gram-pozitív baktériumok által okozott fertőzés megelőzhető, kezelhető és/vagy meggyógyítható, és ugyanakkor az állatok fejlődése elősegíthető, és a takarmány jobban értékesíthető. A következő példák a találmányt—korlátozása nélkül — közelebbről szemléltetik. A hőmérsékleti adatokat Celsiusfokban adjuk meg. 1. példa 7(3-{D,L-a-[(2-Ciklopropil-amino-4-hidroxi-5-pirimidinil)-ureido]-(2,3-dihidro-2-imino-4-tiazolil)-acetamido\-3-[(l-metil-tetrazol-5-il)-tiometil]-cef-3-em-4-karbonsavnárriumsó 302 mg (2 mmól) 5-amino-2-ciklopropil-4-hidroxi-pirimidint kevés vízmentes tetrahidrofuránban feloldunk, és 0,27 ml trietil-amint adunk hozzá. Ezt az oldatot 200 mg foszgén 15 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához 0 °-on hozzácsepegtetjük. A reakciókeveréket 5 percig szobahőmérsékleten keveijük, majd vákuumban térfogatának felére bepároljuk. A 2 924 296 számú német szövetségi köztársaságbeli ny ilvánosságrahozatali irat 35. oldalán közölt módszer szerint előállított 1,2 g (2 mmól) 7/3-[D,L-or-amino-(2,3-dihidro-2-imino-4-tiazolil(-acetamido)-3-[(l-metil-tetrazoI-5-il)-tiometil]-cef-3-em-4-karbonsav-trifluoracetátot 30 mól tetrahidrofurán és 20 ml víz jéggel hűtött elegyéhez hozzáadjuk, és a pH-t híg nátrium-hidroxid oldattal óvatosan 8,5—9,0-ra állítjuk be. Jéggel való hűtés közben hozzácsepegtetjük az előző szakaszban kapott keveréket, és közbe n a pH értékét híg nátrium-hidroxid oldattal 8,0-n tartjuk. A hozzáadás befejezése után a reakciókeveréket egy óra hosszat 5 °C-on és egy óra hosszat szobahőmérsékleten tovább keverjük, majd kevés vízzel hígítjuk, és a tetrahidrofuránt vízsugárszivattyú vákuumában ledesztilláljuk. A maradékként kapott vizes fázist etil-acetáttal kétszer extraháljuk. A vizes fázist Amberlite XAD—2 ioncserélő gyantán kromatografáljuk, és előbb vízzel, majd 75:25 arányú víz-metanol eleggyel eluáljuk. A terméket tartalmazó frakciókat fagyasztva szárítjuk. Kitermelés 700 mg (53%). A szabad savként kapott terméket vízben szuszpendáljuk, és nátrium-hidrogén-karbonát hozzáadásával feloldjuk. A kapott oldatot fagyasztva, szárítva, fehér por alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk. Infravörös spektruma: 1765, 1660, 1610 cm'1. Magmágneses rezonancia spektruma (DMSO + CDjOD) ppm:l,23 (m, 4H), 1,90 (m, 1H), 3,50 (q, 2H), 3,90 (s, 3H), 4,20 (q, 2H), részben oldószer által fedve/, 4,95 (dd, 1H), 5,3 (d, 1H), 5,65 (dd, 1H), 6,55 (d, 1H), 8,55 (s, 1H). 2. példa 7ß-\D,L-a[(4-Hidroxi-2-propil-amino-5-pirimidinil)ureido]-(2,3-dihidro-2-imino-4-tiazolil(-acetamido}-3-[(l-metil-tetrazol-5-il)-tiometil]-cef-3-em-4-karbonsavr/átriumsó Ezt a terméket az 1. példával analóg módon állítjuk elő. Kiindulási anyagként 170 mg (1 mmól) 5-amino-4-hidroxi-2-propilamino-pirimidint használunk; ezt 0,13 ml tri-2 7
