184324. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fermentlé szubsztrátum-koncentrációjának növelésére szteránvázas vegyületek mikrobiológiai átalakításánál
1 i 84 324 2 Két napig 25 °C-on végzett rázatás után a steril vízzel kétszeresére hígított tenyészetek 100—100 ml-éhez az 1 -es lombikba 12 óránként 4 alkalommal, 0,25-0,25 ml dimetilszulfoxidban, összesen 64 mg 17a,21-dihidroxi-4- -pregnén-3,20-dion-t, a 2-es lombikba egyszerre 1,0 g 03 jelzésű anyagot adagolunk, es a lombikokat - az első adagolástól számítva - tovább rázatjuk 3 napig. Az etilacetátos extraktumokban kvantitatív vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel (futtató rendszer: etanol-kloroform 4:96 elegye) az 1-es lombikban 23 mg, a 2-es lombikban 37 mg hidrokortizon képződést mértünk. 7. példa Streptomyces purpurascens KC-157 (MNG 176) csőszuszpenzióval oltott MKjelű táptalajon 32 °C-on nőtt, rázott inokulum tenyészettel oltunk ugyancsak MK jelű táptalajt tartalmazó fermentációs rázott lombikokat, melyek közül az 1-es lombikhoz 1 ml tetrahidrofurfurilalkoholban oldott 50 mg laüatozid-A vegyületet, a 2-es lombikhoz 1,8 g 05 jelzésű anyagot adunk. MK jelű táptalaj: 2 % mogyoróliszt 3 % kukoricakemcnyitő pH = 7,0 sterilezés előtt. 121 °C-on 60 percig sterilezzük. 5 napon át 32 °C-on végzett rázatás után a kloroformos extraktum dixantilkarbaniidos meghatározása az 1-es lombikban 12 mg, a 2-es lombikban 43,2 mg digoxin képződést mutatott. Os jelzésű anyag előállítása 0,1 kg lanatozid A-t 2 liter metanolban oldunk, majd a metanolos oldatot DIOSNA P-25 típusú keverő-granulátó készülékben, 40-45 °C-on végrehajtott szárítással egybekötve, 0.9 kg Aerosil-200 jelzésű kolloid szilícium-dioxid felületén egyenletesen eloszlatjuk. A metanolos oldat utolsó részletének felvitele után az anyagot 1-2 percig keverjük, majd 40-45 °C-on, az oldószer elpárologtatásáig szárítjuk. 8. példa Mindenben a 7. példa szerint járunk el. de az 1-es lombikot Streptomyces purpurascens KA-26 (MNG 179), a 2-es lombikot Streptomyces purpurascens KA-43 (MNG 178), a 3-as lombikot Streptomyces purpurascens KA-82 (MNG 177) csőszuszpenzióval oltjuk, és 1,8-1,8 g 05 jelzésű anyagot adagolunk A meghatározás az 1-es lombikban 40 mg. a 2-esben 41 mg, a 3-asban 45 mg digoxin képződést mutatott. 9 9. példa Mycobacterium sp. MPA-3 (MNG 193) csőszuszpenzióval oltott Ss jelű táptalajon 32 °C-on nőtt. rázott inokulum tenyészettel oltunk ugyancsak Ss jelű táptalajt tartalmazó ferment;':iós rázott lombikokat, melyek közül az 1-es lonbikhoz 1 g szitoszterint - a „tenzid” oldatban szuszper.dálva -, a 2-es lombikhoz 20 g 06 jelzésű anyagot adunk. 8 napon át 32 °C-on végzett rázatás után a lombikok széntetrakloridos extraktumának izonikotinsav-hidrazidos meghatározása az 1-es lombikban 230 mg, a 2-es lombikban 860 mg androszt-4-én-3,17-dion képződést mutatott. Os jelzésű anyag előállítása 0,1 kg szitoszterint 0,15 liter kloroformban oldunk, majd a kloroformos oldatot DIOSNA P-25 típusú keverő-granuláló készülékben 0,9 kg Aerosil-200 jelzésű kolloid szilíciumdioxid felületén — keverés közben - egyenletesen eloszlatjuk. A kloroformos oldat felvitele után az anyagot 1-2 percig keverjük, majd 35-40 °C-on történő szárítással oldószer tartalmát eltávolítjuk. 10. példa Mindenben a 9. példa szerint járunk el, de a fermentációs Ss jelű rázott táptalajhoz nem adunk „tenzid" oldatot. Az izonikotinsav-hidrazidos meghatározás az 1-es lombikban 150 mg, a 2-es lombikban 650 mg androszt-4- -én-3,17-dion képződést mutatott. 11. példa Mycobacterium sp. MPA-3 (MNG 193) csőszuszpenzióval oltott Ss jelű táptalajon 32 °C-on nőtt, rázott inokulum tenyészettel oltunk ugyancsak S5 jelű fermentációs rázott lombikot, melyhez 20 g 07 jelzésű anyagot is adunk. 8 napon át 32 °C-on végzett rázatás után a lombik széntetrakloridos extraktumának izonikotinsav•hidrazidos meghatározása 690 mg androszt-4-én-3,17- -dión képződést mutatott. ü7 jelzésű anyag előállítása 0,1 kg koleszterint 0,45 liter kloroformban oldunk, majd a kloroformos oldatot DIOSNA P-25 típusú keverő-granuláló készülékben 35-40 °C-on végrehajtott szárítással egybekötve 0.9 kg Aerosil-200 jelzésű kolloid eloszlású szilícium-dioxid felületen egyenletesen eloszlatjuk. A kloroformos oldat utolsó részletének felvitele után az anyagot 1 -2 percig keverjük,majd 35-40 °C-on, az oldószer elpárologtatásáig szárítjuk. 12. példa Mindenben all. példa szerint járunk el, de 07 jelzésű anyag helyett 6,6 g 0R jelzésű anyagot adagolunk. Az izonikotinsav-hidrazidos meghatározás 420 mg androszt-4-én-3,l 7-dion képződést mutatott. Os jelzésű anyag előállítása 0.43 kg szitoszterint 0,6 liter diklórmetánban oldunk, majd a diklórmctános oldatot DIOSNA P-25 keverő-granuláló készülékben 1 kg Aerosil-380 jelzésű kolloid szilícium-dioxid (gyártja: Degusa AG, Frankfurt, Német Szövetségi Köztársaság) felületén keverés közben porlasztóit formában, egyenletesen eloszlatjuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
