184189. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 17-helyzetben szubsztituált pregnánszármazékok előállítására
1 Í84 189 1. példa a) 21,63 g 3(3,21-díacetoxi-t7a-hidroxi-5-pregnén- 20-ont feloldunk 150 ml vízmentes diklór-metán és 100 ml vízmentes formaldehid-dimetil-acetá! elegyében. Utána az oldatot vízzel hűtjük, és beleszórjuk 21,6 g foszfoí-pentoxid és 43 g kovaföld (Kieselgur) keverékét, és egy órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Ezt követően megszűrjük a reakcióelegyet, és a maradékot {di^, klór-metánnal mossuk, a szűrlethez pH 9 eléréséig adunk trietil-amint, és vákuumban bepároljuk. A maradékot metanol-diklór-metán-elegyből átkristályosítjuk, így 22,68 g 3/3,21 -diacetoxi-17a-(metoxi-metoxi)-5-pregnén- 20-ont kapunk, amelynek olvadáspontja 382—184 °C. b) Egy 2 literes Erîenmeyer-iombikban 1 liter steril táptalajt, amely 0,3% éiesztőextraktumot, 0,3% kukoricalekvárt és 0,2% elcukrosított keményítőt tartalmaz, és pH 7,0-re van beállítva, beoltunk Flavobacterium dehydrogenans ATCC 13 930 száraz tenyészetével, és 30 C-on két napon át rázatjuk percenként 175 fordulattal. Egy 500 ml-es Erlenmeyer-lombikban 85 ml ugyanilyen táptalajt beoltunk 10 ml Flavobacterium dehydrogenans oltótenyészettel, és 30 °C-on 7 órán át percenként 175 fordulattal rázatjuk. Utána hozzáadjuk a tenyészethez 0,5 g 3ß,2i-diacetoxi-i7a-(metoxi-metoxi)-5- pregnén-20-on 5 ml dímetil-formamiddal készült steril oldatát, és 30 °C-on további 65 órán át rázatjuk percenként 175 fordulattal. Sikeres fermentáció után a tenyészetet 2X100 ml 1,2-diklór-etánnal extraháljuk, az extrakíumot vákuumban bepároljuk, a maradékot alumínium-oxidon kromatografálva tisztítjuk, így 402 mg 21-hidroxi-l 7a-(rnetoxi-rneioxi)4-pregnén 3,20-diont kapunk, amelynek olvadáspontja 152- 153 °C. 2. példa a) 50 g 3)3,21-diacetoxi-17cs-hidroxi-5-pregnén-20-oní 50 mg vízmentes p-toluolszulfonsawal és 350 ml vízmentes diklór-meíánnal elegyítünk, 0 °C-ra hűtjük, és 10 g metil-vinil-éter hozzáadása után 4 órán át kevertetjük 0 °C-on. Utána trietil-amint adunk a reakcióelegyhez 9 pH eléréséig, majd vákuumban bepároljuk. így 58 g 3(3,21 -diacetoxi-17a-(l ’-metoxi-etoxi)-5-pregnén-2ö-ont kapunk 80-118 °C közötti olvadáspontú diasztereomer elegyként. (Metanolból átkristályosított minta 132-134 °C-on olvad.) b) 600 mg 3(3,21-diacetoxi-17a-(l’-metoxi-etoxi)-5- pregnén-20-on-diasztereomerelegy 5 ml dimetil-formamiddal készült oldatát az 1. b) példa körülményei között Flavobacterium dehydrogenans ATCC 13 930 tenyészettel reagáltatjuk, majd feldolgozzuk, így 394 mg 2i-hidroxi-17a-(l ’-metoxi-etoxi)-4-pregnén-3,20-diont kapunk diasztereomerelegyként, amelynek olvadáspontja 166-178 °C. 3. példa 10,0 g 21-acetoxi-17a-hidroxi4-pregnén-3,20-diont 13 mg vízmentes p-toluolszulfonsavval és 130 ml vízmentes diklór-metánnal elegyítünk, majd lehűtjük 0°C- ra, és 2,3 g metil-vinil-éter hozzáadása után 7 órát kevertetjük 0°C-on. A reakcióelegyet a 2. a) példában leírtak szerint feldolgozva 11,6 g 21-acetoxi-17a-(r-metoxieto:d)4-pregnén-3,20-diont kapunk, amelynek olvadáspontja 135-150 °C. 4. példa 10.0 g 21-acetoxi-17a-hidroxi4-pregnén-3,20-diont a 3. példában leírt körülmények között 2,50 g etil-viniléterrel reagáltatunk, feldolgozzuk, és így 12,5 g21-aceto x i -1 7 a - ( 1 ’ - e t o x i - e t o xi)-4-pregn én-3,20-dion-di aszte - reomerelegyet kapunk olajként. 5. példa 10.0 g 21-acetoxi-17a-hidroxi4-pregnén-3,20-diont a 3. példában leírt körülmények között 4,0 g izobuíil-viniléterrel reagáltatunk, feldolgozzuk, és így 13,5 g21-acetoxi-17a-(!’-izobutoxi-etoxi)-4-pregnén-3,20-dion-di3sztereoinerelcgyef kapunk olajként. 6. példa 1,95 g 21-acetoxi-17a-hidroxi4-pregnén-3,20-diont 5 mg vízmentes p-toluolszulfonsawal, 25 ml vízmentes diklór-metánnal és 3,5 ml dihidropiránnal elegyítünk, és 13 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyet a 3. példában leírtak szerint feldolgozzuk, így 2,0 g 21-acetoxi-17a-(2’-tetrahidropiraniloxi)-4-pregnén-3.20- dion-diasztereomerelegyet kapunk, amelynek olvadáspontja 185—200 °C. 7. példa 2.0 g 21-acetoxi-17a-hidroxi-16/3-metil4-pregnén-3.20- diont 5 mg vízmentes p-toluolszulfonsawal és 25 ml vízmentes diklór-metánnal elegyítjük, és 0 °C-ra hűlúik az elegyet. Utána keverés közben 0,5 g metilvinü-étert adunk hozzá, és 5 órán át kevertetjük 0 °C-on, majd további 12 órán át szobahőmérsékleten, végül a reakcióelegyet a 3. példában leírtak szerint feldolgozzuk, így 2,1 g 21 -a ce toxi-17a-(r-metoxi-etoxi)-16ß-metil4- pregnén-3,20-dion diasztereomerelegyet kapunk olajként. 8. példa 50 g 17a-hidroxi4-pregnén-3,20-diont a 3. példában leírt körülmények között 15 g metil-vinil-éterrel reagáltatunk, majd feldolgozzuk, így 51,2 g 17a-(r-metoxietoxi)-4-pregnén-3,20-díont kapunk, amelynek olvadáspontja 115-152 °C. 9. példa 20 g 3j3-acetoxi-17a-hidroxi-5-pregnén-20-ont az 1. példában leírt körülmények között reagáltatunk, így 15 g ! 7a-(metoxi-metoxi)4-pregnén-3,20-diont kapunk, amelynek olvadáspontja 116—119 °C. 10. példa 5 g !7a-hidroxi-19-nor4-pregnén-3,20-diont az 1. a) példában leírt körülmények között formaldehid-dimetilace tattal reagáltatunk, feldolgozzuk, és így 120 °C olvadáspontú 17oí-(metoxi-metoxi)-19-nor4-pregnén-3,20- diont kapunk. n 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
