184125. lajstromszámú szabadalom • Új genetikai eljárás antibiotikumot termelő micromonospóra törzsek előállítására
184 125 szuszpenziót. A hőkezelt protoplasztokat 1:1 arányban összekeverjük a Micromonospora inyoensis törzsből az 1. példa szerint készült protoplaszt szuszpenzióval, a kapott szuszpenziót az 1. példa szerint fuzionáltatjuk és utána regeneráljuk. A regenerálódó protoplasztokat a 8. napon 3 ml 1000 ug/ml sztreptomicin koncentrációjú, 0,5 % agart tartalmazó TRIS táptalajjal rétegezziik le. A 20. nap után megjelenő telepek a két faj közötti protoplaszt fúzió és rekombináció eredményeképpen nőnek ki. 11 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás a kiindulási törzsektől eltérő genetikai állományú antibiotikum-termelő Micromonospora törzsek előállítására, azzal jellemezve, hogy antibiotikumot termelő Micromonospora törzsek két mutánsának — melyek közül legalább az egyik genetikailag jelzett — tenyészeteiből giicines táptalajban történő tenyésztés után, előnyösen szalharózzal biztosított ozmotikus védelem mellett, lizozim enzimmel protoplaszt szuszpenziót készítünk, az így kapott két szuszpenziót polietilénglikol jelenlétében elegyítjük és szobahőmérsékleten inkubáljuk, majd az így kapott fúzionált protoplasztokat lágy agarban szuszpendálva, előnyösen szalharózt, prolint és szervetlen sókat tartalmazó agarlemezre rétegezziik, 20 30 napig inkubáljuk, majd a regenerálódott telepek közül kiválasztjuk azokat, melyek genetikai állománya eltér a szülőkétől. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a protoplasztokat a logaritmi-5 kus fázis elején lévő tenyészetből készítjük. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az egyik szülő protoplasztjait hővel inaktiváljuk. 4. Az 1., 2. vagy 3. igénypont szerinti eljárás fogana- 10 losítási módja, azzal jellemezve, hogy a sziszomicint termelő törzsként Micromonospora inyoensist használunk. 5. Az 1., 2. vagy 3. igénypont szerinti eljárás foganatosít ási módja, azzal jellemezve, hogy a gentamicint termelő törzsként Micromonospora purpurea var. nigres-15 censt használunk. 6. Az I., 2. vagy 3. igénypont szerinti eljárás foganalosítási módja, azzal jellemezve, hogy a gentamicint termelő törzsként Micromonospora purpureát (holotipus) használunk. 20 7. Az 1., 2. vagy 3. igénypont szerint eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a gentamicint termelő törzsként Micromonospora echinosporát használunk. 8. Az 1., 2. vagy 3. igénypont szerinti eljárás fogana- 25 tosítási módja, azzal jellemezve, hogy a fortimicint termelő törzsként Micromonospora olivoasterosporát használunk. 12 rajz. nélkül A kiadásért fold: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 86.0326 - Nyonidacoop, Budapest 7
