184114. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenil-alkán-karbonsav-származékok előállítására
184 114 2. kísérleti módszer Körülbelül 180 g súlyú Sprague-Dawley patkányok gyomrát éjszakán át tartó éhezés után eltávolítjuk. A gyomorfenék egy szeletét 0,6 g kezdeti húzófeszültség mellett Tyrode-oldatot tartalmazó szervtenyésztő tápfolyadékba függesztünk fel. Görcsokozó anyagként arachidonsavat (1,0.10"s g/ml) használunk. 15 perccel az arachidonsav hozzáadása előtt a vizsgálandó vegyület különböző dózisait adjuk az egyes tápfolyadékokhoz. Az arachidonsav okozta összehúzódás értékét megmérj ük és felvesszük a dózis/hatás görbét. Mindenvizsgált vegyület EDS0 értékét a dózis/hatás görbe alapján interpolációval állapítjuk meg. A kapott értékeket a következő 2. táblázat mutatja: 2. táblázat 7 Előkezelés Kezelés A’ csoport sóoldat vizsgálandó anyag B' csoport 5% sörélesztő vizsgálandó anyag 5 A vizsgálandó vegyületet vagy a 0,5%-os metil-cellulózt orálisan adjuk a patkányoknak, 4 órával a sörélesztő vagy a sóoldat szubkután injekciója után. A végbélhőmérsékletet termisztor-szondával határozzuk meg, melyet 4,5—5 10 cm-re vezetünk be a végbélbe a vizsgálandó vegyület befecskendezése előtt 4 órával és a befecskendezést követő 1 és 2 óra múlva. A vizsgált vegyületnek a sörélesztővel indukált hipertermiára gyakorolt hatását a vizsgált vegyület befecskende- 15 zése után 1 és 2 óra múlva határozzuk meg valamennyi csoport átlagos végbél-hőmérséklete alapján, a következő képlet szerint: 8 A vizsgált vegyület elő£D , ml) állítási példájának száma so 8 P 20 2-(2) példa 1,6.10"6 4-(2) példa 1.7.10'6 5-(2) példa 1,3.10"6 7-(2) példa 1,16.10'6 10-(2) példa 2.5.10"6 19 példa 2,4.10'6 3. kísérleti módszer 30 24—32 g súlyú, ddy-töizsből származó hím patkányokat használunk. Minden dózis-csoport 10 állatból áll. Vonaglási szindrómát idézünk elő 0,6%-os ecetsav 20 ml/ kg mennyiségű intraperitoneális injekciójával. Az ecetsav 35 beadása után minden állat vonaglási tüneteit 3—13 percig figyeljük. A vizsgálandó vegyületet orálisan adjuk be az ecetsav befecskendezése előtt 60 perccel. A kezelt állatok 10 perc alatt észlelt vonaglásainak gyakoriságát összehasonlítjuk a kontroll állatokéval. Az utóbbiakat csak vivő- 40 anyaggal kezeljük. Az 5-(2) példában előállított vizsgálandó vegyületeket 0,5 %-os me til- cellulózban szuszpendáljuk. Az EDS0 értékeket a Litchfield-Wilcoxon próba szerint határozzuk meg számítógépes program segítségével. 45 A vizsgált vegyület — orálisan adva — dózisfüggő gátlást fejt ki az ecetsavval előidézett vonaglási szindrómára. A vizsgált vegyület EDS0 értéke 19,6 mg/kg. 50 4. kísérleti módszer SD-törzsből származó, 6 hetes, 164-235 g súlyú hím patkányokat 10-10 állatból álló 4 csoportra (A, B, A’ és B’ csoport) osztunk és az alábbiak szerint kezelünk: 55 Előkezelés Kezelés A csoport sóoldat 0,5% metü-cellulóz B csoport 5% sörélesztő 0,5% MC 60 Lázcsillapító hatás (%) -B' csoport végbél- A’ csoport végbélhőmérséklete hőmérséklete = ------------------------------------------------------------------------------------------ xlOO B csoport végbél- _ A csoport végbélhőmérséklete hőmérséklete Az összes kísérletet 22,0—22,5°C környezeti hőmérsékleten végezzük el. A vizsgált anyagot, az 5-(2) példában előállított vegyületet 0,5%-os metil-cellulózban oldjuk 10 mg/kg és 100’ mg/kg dózisnál, szintén 0,5%-os metil-cellulózban szuszpendáljuk 320 mg/kg dózisnál, és a sörélesztőt konyhasóoldatban szuszpendáljuk. Statisztika: az EDS0 értéket a Litchfield-Wilcoxon eljárással számítjuk ki számítógépes program segítségével. A kontroll és a kezelt csoportok_közötti különbség statisztikus elemzését a Student-féle „t -próbával hajtjuk végre számítógépes program alkalmazásával. A konyhasóoldattal kezelt patkányoknál a vizsgálandó vegyület 10 mg/kg dózisban emeli, de 320 mg/kg dózisban csökkenti a végbélben mért hőmérsékletet az injekció után 1 óra múlva, bár mindkét változás kisfokú, de szignifikáns. Az injekció után 2 óra múlva a vizsgálandó anyag 100 mg/ kg és 320 mg/kg dózisokban szignifikánsan csökkenti a végbélhőmérsékletet. A sörélesztővel kezelt patkányoknál a vizsgált anyag az injekció után 1 és 2 óra múlva minden dózisszinten lázcsillapító hatást gyakorol a sörélesztővel indukált hipertermiára. Az injekció után 1 és 2 óra múlva meghatározott EDJ0 érték 37,8 mg/kg, illetve 12,8 mg/kg. Amint azt a fenti kísérleti eredmények mutatják, a találmány szerinti 1 általános képletű vegyületek gyulladásgátló, fájdalom- és lázcsillapító gyógyszerként használhatók. A hatóanyagot szokásosan 10-500 mg dózisban, napi 1-4 alkalommal adagoljuk készítmények, mint tabletta, granulum, por, kapszula, szirup, injekció, végbélkúp és hasonlók alakjában. A fenti dózis azonban emelhető vagy csökkenthető, függően a beteg korától, súlyától vagy állapotától, vagy az alkalmazás módjától. A fenti készítmények szokásos módon, szokványos hordozó- és adalék5
