184009. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4' - dezoxi- 4-dezacetil- leurozidin- és -vinkrisztin- származékok előállítására
184009 7 8 C14—H), 6,10 (s, 1, C17—H), 5,78—5,87 (ni, 2, C6,7—H), 4,10 (m, 1, C4—H), 3,83 (s, 3, C18—OCH3), 3,78 (s, 3, C3—C02CH3), 3,70 (s, 1, C2—H), 3,58 (s, 3, C18— C02CH3), 2,75 (s, 3, N—CH3), 0,76—1,06 (m, 6, ^21>21> H). A szűrletekből nyert 4-dezoxi-4-dezacetil-leurozidint (834 mg) és a kiszűrt szilárd anyagot egyesítjük. Az egyesített anyag 30—40% erősen poláros anyagot (melyet az előzőekben már leírtunk) tartalmaz. Ezt a kombinált anyagot 100 ml aeetonban oldjuk, melyben 7 ml ecetsav volt. Az oldatot szobahőmérsékleten 15 percig kevertetjük, majd —65 °C-ra lehűtjük, egy szárazjeges aceton fürdőben, nitrogénnyomás alatt. 1110 mg krómtrioxidot 13 ml jégeeetben és 2 ml vízben feloldunk, s ezt az oldatot cseppenként a 4'-dezoxi-4- dezacetil-léurozidin oldathoz adjuk. A reakciókeveréket —60 °C-tól —65 °C-ig terjedő hőmérséklet-határok között egy órán át kevertetjük, majd 35 ml 14 mólos vizes ammóniumhidroxid-oldat hozzáadásával leállítjuk a reakciót. Ezután a reakciókeveréket jégre öntjük, és az így nyert vizes szuszpenziót többször kloroformmal extraháljuk. A kloroformos extraktumokat egyesítjük, vízzel mossuk és szárítjuk. A kloroform vákuumban való eltávolítása után 794 mg maradék anyagot nyerünk, melynek vékonyrétegkromatogramján lényegében csak egy folt volt látható az eredeti, igen alacsony R-értéken levő szennyeződés mellett. Ezt a maradékot Woelm szilikagélen kromatografáljuk úgy, hogy a kezdeti eluálószer 20:1:1 etilétiléter/dietilamin/toluol 0,9% metanoltartalmú oldószerelegye volt, és ezt az eluálószert 150 ml-es részletekben alkalmazzuk. A metanoltartalom minden egyes egymást követő 150 ml eluátum részben növekedett 15%-os értékig. Azokat a frakciókat, melyek vékonyrétegkromatográfuával megvizsgálva 4'-dezoxi-4-dezacetil-l-formil-leurozidin tartalmat mutatnak, egyesítjük, és az oldószer elpárologtatása után 293 mg tiszta 4'-dezoxi-4-dezacetil-l-formil-Ieurozidint nyerünk. A szulfátsót az előbbiekben leírt módon állítjuk elő. A 4/-dezoxi-4-dezacetil-vinkrisztint úgy lehet elő- 5 állítani, mint ahogy azt az előzőekben leírtuk; a 4'dezoxi V LB „A”-t hidrolizáljuk, és az így nyert 4'dezoxi-4-dezacetil VLB-t oxidáljuk krómtrioxiddal ecetsavas közegben, —60 °C-on. 10 Az I általános képletű találmány szerinti vegyületek hatásos daganatgátló (anti-tumor) szerek. A 4-dezoxi-4-dezacetil-leurozidin is egy onkológiai (gyógy-szer. Ezen gyógyszerek egerekben létrehozott daganatokkal szemben mutatott aktivitásának adatait egy jegyző- 15 könybe gyűjtöttük, melyek a gyógyszernek intraperitoniális (hasüregbe adott) alkalmazására vonatkoznak, egy meghatározott adagolásban, 7—10 napon át a daganat inokulációja után, vagy pedig a gyógyszert az első, ötödik és kilencedik napon alkalmaztuk, szin- 20 tén az inokuláció után. Az I. táblázat számos kísérlet eredményét tartalmazza, melyeknél egerekben létrehozott daganatokat eredményesen kezeltünk egy találmány szerinti vegyü- 25 lettel. A táblázatban az 1. oszlop a vegyület nevét tartalmazza, a 2. oszlop a daganat fajtáját, a 3. oszlop az adagot (dózist), vagy az adag alsó és felső határát, továbbá azoknak a napoknak a számát tartalmazza, 30 amelyeken át a gyógyszert alkalmaztuk; a 4. oszlop az alkalmazás módját és az 5. oszlop a daganat növekedésének gátlását, vagy a túlélés idejének meghoszszabbítását mutatja százalékban, például B16. (Az ROS a Ridgeway-féle osteogenic sarcoma rövidítése, 35 GLS a Gardner-féle lymphosarcoma, a P1534 (J) és L1210 a leukémia rövidítésé; CA755 egy adenocarcinoma és B16 egy melanoma rövidítése.) I. Táblázat Vegyület Daganat mg/kg X nap Alk. mód Gátlás vagy a túlélési meghosszabbítása, % 4'-Dezoxi-4-dezacetil B16 ■ 0,15—0,6x3 IP 31—62** 31—62**- 1-formil-leurozidin-szulfát GLS 0,6X3 IP toxikus 0,25—0,40x3 IP 94—100 0,18X3 IP 95 4'-Dezoxi-4-dezacetil-leurozidin-szulfát 755 0,6X3 IP toxikus 0,4X3 IP 37 0,25X3 IP 32 B16 0,6X3 IP toxikus** 0,3X3 IP 103** 0,15x3 IP 77** GLS 0,9X3 IP toxikus 0,6X3 IP 63 0,4X3 IP toxikus ** késleltetve alkalmazott kezelés az 5., 9. és 13. napon 5
