183978. lajstromszámú szabadalom • Eljárás növények szaporítóanyagának előállítására szövettenyészetben
1 183 978 2 oldatban 10 percig fertőtlenítettük. A fertőtlenítő oldatból a hajtásokat steril desztillált vízbe helyeztük 20 percre, majd aszeptikus körülmények között 2-4 leveles (körülbelül 3 cm hosszú) darabokra vágtuk, és az 1. példa szerinti táptalajba dugványoztuk. Ezután a dugványokra az 1. példa szerinti folyékony tápoldatot öntöttük. A növekedésszabályozó nélküli folyékony táptalaj adagolás hatására a hajtástenyészetek intenzív növekedése indult meg. A növekedés mértéke 2-5-szörösen felülmúlta a folyékony táptalaj-adagolás nélkül nevelt hajtástenyészetek növekedésének mértékét. Tenyészkörülményként 20—25 °C hőmérsékletét és 8000 lux erősségű állandó megvilágítást alkalmaztunk. A 100 ml táptalajt tartalmazó 200 ml-es lombikban nevelt hajtástenyészetek 4—5 hét után teljesen benőtték a lombik légterét, a 8—15 cm hosszú hajtások 2—3 mm vastagok, turgeszcenszek, viszonylag kevéssé elágazóak voltak. Az ilyen hajtástenyészetek 2—4 leveles darabokra vágva alkalmasak voltak meggyökereztetésre, illetőleg újabb hajtásfejlesztésre. Meggyökereztetésre legalkalmasabb az a módszer, hogy a hajtásdugványokat 24— 96 órára 1 mg/1 2,4-diklór-íenoxi-ecetsavat tartalmazó, minden más összetevőjében az 1. példa szerinti táptalajjal egyező táptalajba ültettük. Ezt követően a hajtásokat növekedésszabályozó nélküli táptalajba helyeztük át, ahol 2 hét alatt körülbelül 5—10 db, egyenként 2—5 cm hosszú gyökér fejlődött dugványonként. A gyökeres növényeket, ha kiültetés volt a cél, folyékony táptalajpótlás nélkül neveltük. Ha azonban tömeges hajtásszaporodást akartunk elérni, akkor folyékony táptalajpótlást is alkalmaztunk, így a gyökérfejlődésen túlmenően dús hajtásfejlődést is elértünk, ami tömeges növényelőállítást tett lehetővé. Az eljárás rendszeres ismétlésével egy év alatt 100 000 gyökeres növény előállításával számolhatunk. 3. példa A rőzsameténg (Catharanthus rosem) szubmerz szaporítása kinetin jelenlétében Az üvegházban növő Catharanthus roseus növényekről 10—15 cm-es oldalhajtásokat vágtunk le, ezeket 4 órán át folyó csapvízzel mostuk, utána 1 %-os nátrium-hipoklorit-oldatban 25 percen át fertőtlenítettük, majd steril desztillált vízben kétszer 15 percig öblítettük. A 2-4 levelesre vágott hajtásdugványokat az 1. példa szerinti szilárd táptalajba dugványoztuk, majd 25-28 °C- ön 10 000 lux erősségű mesterséges megvilágításban tartjuk, a világos és a sötét periódust 16/8 órás ritmusban változtatva. A csúcsdugványok tovább növekedtek, de rendszerint nem ágazódtak el, míg az oldalhajtásokból nyert dugványokon általában két oldalhajtás keletkezett. 3-4 hét múlva a keletkezett oldalhajtásokat és a meg-5 nőtt csúcshajtásokat feldaraboltuk, üveglombikokban levő 1. példa szerinti szilárd táptalajba ültetjük, és az üvegekbe 50 ml folyékony tápoldatot öntünk. A tápoldat összetétele az 1. példában megadott, agar-agar nélküli összetételnek felelt meg, ezenkívül az oldat 10 1 mg/1 koncentrációban kinetint tartalmazott. Az oldattal feltöltött lombikokban az oldalhajtások 2—3-szor vastagabbak lettek, mint a szilárd táptalajon, elárasztás nélkül tartott kontroli-tenyészet esetében. A kapott hajtások továbboltási lépéseinek számával 15 arányosan a hajtásfejlődés intenzívebb lesz, és a csúcshajtások gyökérképződése is javul. A módszer rendszeres ismétlésével egy év alatt egyetlenegy csúcshajtásból kiindulva mintegy 100 000 csúcshajtást nyerhetünk. 20 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás növények, főleg évelő, kétszikű, előnyösen fás- vagy fásodószárú növényfajok szaporítóanyagának 25 előállítására steril szövettenyészetben végzett mikroszaporítás útján, azzal jellemezve, hogy a) a növények steril hajtásdugványait alkalmas edényben levő hormonmentes táptalajba ültetjük, utána az edényt adott esetben növekedésszabályozó anyagokat 30 tartalmazó folyékony tápoldattal feltöltjük, és a hajtásokat ebben a szubmerz rendszerben növesztjük, majd b) a keletkező, elágazó, sok oldalrügyet és hajtást hordozó tenyészeteket feldaraboljuk, a csúcshajtásokat önmagában ismert módon meggyökereztetjük és adaptá-35 lás után kiültetjük, míg a hajtástenyészetek alapi és középső részéből készített dugványokat az a) alatt leírtak szerint tovább tenyésztjük, és az eljárás a) és b) részét a kívánt csúcshajtásszám eléréséig megismételjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási mód- 40 ja, azzal jellemezve, hogy a hormonmentes táptalajt agaragarral szilárdítjuk. 3. Az 1. vagy'2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a folyékony tápoldat növekedésszabályozó anyagként citokínineket, előnyö-45 sen 6-benzil-amino-purint tartalmaz. 4. Az 1—3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a szubmerz tenyészetet naponta legalább 16 órán át megvilágítjuk. 50 Ábra nélkül Leleló's kiadó: I Timer Zoltán osztályvezető' Megjelent a Műszaki Könyvkiadó gondozásában ZÖLDÉRT Nyomda - Miskolc
