183636. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új anorexigén hatású peptidek előállítására
1 183 636 2 esetben valamely (I) általános képletű peptid például egy nem-antigén, részben hidrdizált zselatinnal viszkózus folyadékká alakítható vagy pedig egy gyógyászatilag elfogadható szilárd hordozóanyagon, például adott esetben protaminnal kevert cink-hidroxidon adszorbeálható. A hatóanyag beadható egy gyógyászatiig elfogadható folyékony hordozóanyaggal készült szuszpenzió formájában is. Előállíthatok továbbá gélek vagy szuszpenziók nem-antigén védőkolloidokkal, így például nátrium - karboxi - me til- cellulózzal, polivinil -pirrolidonnal, nátrium-algináttal, zselatinnal, poligalakturonsavakkal (mint például a pektinnel) vagy bizonyos műkopoliszacharidcjkkal, vizes vagy nem vizes, gyógyászatiig elfogadható folyékony hordozóanyagokkal, konzerválószerekkel vagy felületaktív anyagokkal együtt. Az ilyen készítményekre példák megtalálhatók a szokásos gyógyszergyártási kézikönyvekben, például a „Remington’s Pharmaceutical Sciences” c. könyvben, amely a Mack Publishing Co. (Easton, Pennsylvania állam) amerikai kiadó gondozásában 1975-ben jelent meg. Lassú hatóanyagleadású, tartósan ható készítmények előállíthatok egy gyógyászatiig elfogadható bevonóanyaggal, például zselatinnal, pdivinüalkohollal vagy etil-cellulózzal végrehajtott mikrokapszulázás útján. Az e célra hasznosítható bevonóanyagok további példáit, illetve a mikrokapszulázási eljárásokat ismertető szakirodalmi publikációként a Herbig, J.A. által az „Encyclopedia of Chemical Technology” c. könyv (1967-ben a John Wiley and Sons New yorki kiadó gondozásában jelent meg) 2. kiadása 13. kötetének 436—456. oldalain írottakra utalunk. Az ilyen típusú készítményeket, valamint az (1) általános képletű peptideknek a testnedvekben rosszul oldódó sóit tartalmazó szuszpenziókat úgy készítjük el, hogy belőlük naponta testsúlykilogrammonként 5—100 /Jg hatóanyag szabaduljon fel. Az ilyen készítményeket előnyösen intramuszkuláris injektálás útján juttatjuk a szervezetbe. Egy további lehetőség olyan pelletek előállítása, amelyek az előbb említett hatóanyagmennyiségeket adják le, illetve szubkután vagy intramuszkulárisan implantálhatók. Ilyen pelletek előállításához néhány korábban említett szilárd készítmény, például bizonyos vízben rosszul oldódó sók vagy diszperziók vagy sók szilárd hordozóanyagokkal alkotott adszorbátumai, például etilén-glikol-metakrilát vagy hasonló térhálósítható monomer polimerizátuma alkotta semleges hidrogélben készült diszperziók (lásd a 3 551 556 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást) hasznosíthatók. Bizonyos vízben rosszul oldódó (I) általános képletű peptidek elkészíthetők szuszpenziókként vizes közegben vagy emulziós közegben. A vizes bázisú szuszpenziókat nedvesítőszerek, például polietilén-oxid és alkil-fenol ok, zsíralkohol ok vagy zsírsavak alkotta kondenzációs termékek, valamint szuszpendálószerek, így hidrofil kolloidok, például polivinil-pirrolidon segítségével állítjuk elő. Az emulzió alapú szuszpenziókat a pepiidnek egy nedvesítőszer és egy szuszpendálószer segítségével egy emulzióban való szuszpendálása útján állítjuk elő, az előbb említett nedvesítő- és szuszpendálószereket használva. A szuszpenziók járulékosan még tartalmazhatnak pufferolóanyagokat és/vagy édesítőszereket, aromaanyagokat, színezékeket, konzerválószereket és antioxidánsokat. Miként korábban említettük, az (I) általános képletű peptidekből orális vagy parenterális beadásra alkalmas gyógyászati készítményeket úgy állítunk elő, hogy azok naponta testsúlykilogrammonként 5—100 Mg hatóanyag leadására legyenek képesek, előnyösen osztott dózisban. A dózisegységek, 0,3-15 mg hatóanyagot tartalmazhatnak. A parenterális beadás céljára előnyösnek tartjuk valamely vízoldható (I) általános képletű pepiidnek vagy egy vízben kevéssé jól oldódó (I) általános képletű peptid vízoldható sójának az alkalmazását steril vizes oldat formájában. A konzerválószerekre példaképpen megemlíthetjük a 4-hidroxi-benzoesav-metilésztert és -propilésztert, amelyeket más oldható komponensekkel, például izotóniás oldat készítéséhez szükséges mennyiségű nátrium-kloriddal vagy glükózzal együtt adhatunk az ilyen oldatokhoz. A vízben rosszul oldódó (I) általános képletű peptideket beadhatjuk intramuszkulátisan steril, folyékony nem vizes hordozóanyagokkal, például növényi vagy állati eredetű olajokkal alkotott oldatok vagy szuszpenziók formájában. Ezek a készítmények adott esetben az előzőekben említett járulékos oldatkomponenseket vagy szuszpendálószereket tartalmazhatják. A következőkben részletesebben ismertetjük az (I) általános képletű peptidek előállítására szolgáló találmány szerinti eljárást. A C vagy B helyén álló — amennyiben C a korábban meghatározott -NHR1 csoportot jelent - karbcocil-végcsoportú aminosavat az «-aminocsoporton védjük, előnyösen terc-butQxi-karbonilcsoporttal (R2 = Boc). Avédett savat ezután egy hidroxi-metil-gyantával vagy előnyösen - egy klór-metilezett gyantával kapcsoljuk egy katalizátor, előnyösen cézium-hidrogén-karbonát vagy trietil-amin segítségével. A kapcsolási reakciót követően az o(-aminccsoport védőcsoportját eltávolítjuk, például metilén-kloridban trifluor-ecetsawal végzett kezelés útján - miként korábban említettük — vagy pedig egy másik, korábban már ugyancsak említett módszerrel. A védőcsoport eltávolítását előnyösen 0 °C és szobahőmérséklet közötti hőmérsékleteken végezzük. Klór-metilezett gyantaként (1%-os térhálósítás) előnyösen a Bio Rád Laboratories (Richmond, Kalifornia állam) amerikai cég valamelyik kereskedelmi forgalomban levő termékét használjuk. A C vagy B helyén álló — amennyiben C —NHR1 csoportot hordoz — és a korábbiakban definiált rögzítőcsoporttal gyantahordozóhoz kapcsolt karboxil-végcsoportú aminosavat ezután automatikus peptidszintetizáló berendezés reakcióedényébe juttatjuk. A berendezés a következő mosóciklusra van beprogramozva: a) metilén-klorid, b) 33%-os metilén-kloridos trifluor-ecetsav-oldat (kétszer), c) metilén-klorid, d) etanol, e) kloroform, f) 10%-os kloroformos trietil-amin (kétszer), g) kloroform és h) metilén-klorid. A mosott gyantát ezután metilén-kloridban egy megfelelően védett, a B vagy az A csoportnak — ha C jelentése -NHR1 csoport - megfelelő aminosawal keverjük. Az a-aminocsoport védőcsoportjaként előnyösen a tercbutoxi-karbonilcsoportot (Boc) használjuk. A B helyén álló aminosavaknál a hisztidin irnidazol-nitrogénjét (N“11) előnyösen tozilcsoporttal (Tos) védjük. A 4-amino-fenilalanin esetén a fenil-aminocsoportot védőcsoportjaként előnyösen a benziloxi-karbonilcsoportot (Z) használjuk. A 3-metil-hisztidin, a j3-(l-pirazolil)-alanin és a jS-(2-ti-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
