183303. lajstromszámú szabadalom • Eljárás alfa-galaktozioáz enzim előállítására és raffinóz ezen enzim alkalmazásával végzett hidrolízisére
1 183 303 2 4. példa Elkészítjük a következő összetételű tápközeget: (NH4)2S04 5,0 g/i MgS04,7H2 0 0,05 g/1 Na2HP04 ,12H2 0 4,6 g/1 KH2P04 3,0 g/1 NaCl 0,1 g/1 CaCl2 0,05 g/1 élesztőkivonat 10,0 g/1 glukóz 5,0 g/1 melibióz 5,0 g/1 A felsorolt vegyületeket íonmentesített vízben oldjuk és a pH-t sósavval 5,3-re állítjuk be. Az 1. példában leírt módon ezzel a táptalajjal előállítjuk a Saccharomyces cerevisiae var. oleaceus törzs tenyészetét, amelyet orbitális rázatás mellett (180 ford, /perc) 29 °C-on tenyésztünk. A táptalaj beoltásától számított 48 óra elteltével a sejteket centrifugálással összegyűjtjük és foszfát pufferrel (0,1 mólos, pH 5,6) mossuk. 100 ml fermentléből 0,365 g száraz sejtet kapunk. 6 ml fermentlevet hozzáadunk 50 ml 35 Brix° töménységű melaszhoz, amely az összes szárazanyag-tartalomra számítva 1,6% (súly) raffinózt tartalmaz, és az elegy pH-ját H2S04-val 5,2-re állítjuk be. A kezelést rázatás mellett 40°C-on végezzük, 16 órán át. A galaktóz koncentrációját - amely a raffinóz hidrolízis-terméke - 5 ként a reakció közben képződik — a Boehringer Mannheim GmbH laktóz/galaktóz UV teszt-módszerével határozzuk meg. Az előbbi kísérleti körülmények között 153 mik romól galaktóz képződik; ez az eredetileg jelenlévő raffinóz 30%-ának hidrolízisével egyenértékű. 10 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás alfa-galaktozidáz enzim előállítására azzal jellemezve, hogy a Saccharomyces cerevisiae var. 15 oleaceus (NRRL Y 12056) törzs fermentációját folytatjuk le a 4—7 pH-tartományban, 20 °C és 40 °C közötti hőmérsékleten, és a képződött micéliumot elkülönítjük, majd kívánt esetben szárítjuk. 2. Eljárás raffinóz enzimes hidrolízisére azzal jelle-20 mezve, hogy a reakciót a Saccharomyces cerevisiae var. oleacus (NRRL Y 12056) élesztőtörzs fermentációja útján képződő sejtek alkalmazásával végezzük. (Ábra nélkül) Megjelent a Műszaki Könyvkiadó gondozásában A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető' Borsodi Nyomda - Miskolc 4
