183292. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a szív izomzatát védő, antiarrhythmiás és thrombocita aggregációt gátló hatású pirrol-származékok, valamint ilyeneket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 182 292 2 A sinusos systoles complexeket és a kóros jelenségeket folyamatosan számláltuk elektromos berendezéssel. A leírt módszerrel a vizsgálandó vegyidet hatásának mértékét és tartamát lehetett meghatározni. Eredmények Az eredmények a II. táblázatban láthatók; a vizsgált vegyületek hatását a ventricularis tachycardiára vagy a sinusos ritmus visszaállásával, vagy a következő arány javulásával jellemeztük: abnormális complexek száma sinusos complexek száma II. táblázat Vizsgált vegyület Dózis (mg/kg) Állatok száma A ventricularis tachycardiára gyakorolt hatás CM 7611 50 3 A sinusos ritmus visszaállása, vagy az arány 70-90%-os javulása, 3-4 óráig CM 7753 50 4 A sinusos ritmus visszaállása, vagy az arány 90%-os javulása, 1,5-5 óráig CM 7640 50 1 Sinusos ritmus visszaállása, vagy az arány 90%-os javulása, 9C percig Vérlemezkeaggregációt gátló hatás Az aggregációgátló hatást in vitro és in vivo tanulmányoztuk a Born-féle „turbidiuretikus” módszerrel. Az in vitro vizsgálatokat vérlemezkében dús plazmán végeztük, amelyet emberi vénás vérből állítottunk elő. A vizsgálandó vegyületek különböző töménységű oldatát mindig frissen készítettük el. ACM 7753, 7611, 7640, 7921, 7954, 40018 és 40020 jelű vegyületekből 2X 1CT2 mólos acetonos oldatokat készítettünk, a CM 40169 és 40178 jelű vegyületekből pedig 2 X 1CT3 mólos vizes oldatokat állítottunk elő. Az acetonos oldatokból 2 /il-t, a vizes oldatokból 40/Lil-t inkubáltunk 10 percig 37 °C-on, 338, illetve 350 ^ vérlemezkében dús plazmával. Ezután 10 pl-nyi 40 Mg/ml-es kollagénoldatot adtunk hozzá; kontrollként 2 /al acetont és 40 /d desztillált vizet alkalmaztunk. Az in vivo vizsgálatokat páviánokon végeztük a CM 7753 számú vegyülettel, 50 mg/kg orálisan beadott napi dózissal 5 napig. Vérmintát vettünk a vérlemezkeaggregáció meghatározására a vegyület beadása előtt, 2 órával beadás után (az első napon az 50 mg/kg dózis beadása után), majd az 5. napi utolsó beadás után 2 órával. A kiértékelést az aggregáció maximális amplitúdójának grafikus meghatározásával végeztük. Az eredményeket ennek a paraméternek a százalékos csökkenésével fejeztük ki, 100%-os aggregációnak véve a kontroll kísérletet. Eredmények a) In vitro vizsgálatok A vizsgált vegyületek közül kettő bizonyult különösen hatásosnak a kollagén által indukált vérlemezkeaggregáció megakadályozására. Ezek a CM 7640 és 7611 jelű vegyületek voltak (az IC50 érték körülbelül 30 juM-os koncentrációnál volt). A CM 7753 és 7954 jelű vegyületek 50%-ra csökkentették az aggregációt körülbelül 10/uM koncentrációjú oldatban. ACM 41018, 40020, 40169, 40178 és 7921 jelű vegyületek csak kisebb mértékben gátolták az aggregációt (20—30%-os gátlás 100 juM-os koncentrációban). bj In vivo vizsgálatok Azt tapasztaltuk, hogy a CM 7753 jelű vegyület különösen hatékonyan gátolja a vérlemezkeaggregációt, amelyet kollagénnel indukáltunk. A 4 kísérleti páviánnál 100%-os inhibíciót figyeltünk meg 5 napi, 50 mg/kg dózissal végzett kezelés után. Az ADP-vel szemben kisebb mértékű antiaggregációs hatást észleltünk. Az eredmények azt mutatják, hogy a találmány szerinti vegyületeknek erős hatásuk van a kísérleti arrhythmiára és figyelemreméltó vérlemezkeaggregációt gátló hatásuk van. Ezért az (I) általános képletű vegyületeket a humán terápiában mint a szív izomzatát védő anyagokat (myocardiumprotectorokat) lehet használni az ischaemiás eredetű ventricularis ritmuszavarok korrigálására, valamint a vérlemezkeaggregáció rendellenességeinek kezelésére. A vegyületeket galenusi készítmények formájában, orálisan (tabletták, kapszulák stb.), továbbá parenterálisan beadható alakban (injekciók) is alkalmazhatjuk. A vérlemezkeaggregáció meggátlásához, illetve a sinusos ritmus helyreállításához szükséges adag embereknél intravénás adagolás esetén 50—150 mg/nap, orális adagolás esetén 400—800 mg/nap. Példaként az alábbi galenusi készítményt ismertetjük: Tabletták CM 7753 jelű vegyület 0,200 g Mikrokristályos cellulóz 0,140 g Laktóz 0,140 g Magnézium-sztearát 0,020 g Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az (I) általános képletű pirrolszármazékok, valamint ásványi vagy szerves savakkal képzett savaddíciós sóik előállítására — ahol Rí jelentése hidrogénatom, 1—6 szénatomos alkilcsoport, fenilcsoport vagy piridilcsoport, R2 jelentése hidrogénatom vagy 1—4 szénatomos alkilcsoport, R3 és R4 jelentése, mely lehet azonos vagy különböző, 1—6 szénatomos alkilcsoport, 5—7 szénatomos cikloalkilcsoport, vagy R3 és R4 a szomszédos nitrogénatommal együtt 2,6-dimetilpiperidino-, morfolinovagy 1,4-diazabiciklo[4.3.0]nonilcsoport, n értéke 2 vagy 3 — azzal jellemezve, hogy a) valamely (II) általános képletű vegyületet — ahol Rí jelentése a tárgyi körben megadott, A jelentése 2—5 szénatomos alkoxikarbonilcsoport, P jelentése —(CH2)n—NR3R4 képletű csoport — ammóniával kezelünk, majd egy (III) általános képletű diketonnal — ahol R2 jelentése a tárgyi körben megadott — vagy 2,5-dimetoxi-tetrahidrofuránnal reagáltatunk, vagy b) olyan, az (I) általános képletű vegyületek szűkebb körébe tartozó pirrolszármazékok előállítására, amelyek képletében Rí jelentése hidrogénatom, R2, R3, R4 és n jelentése a tárgyi körben megadott, egy (II) általános 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
