183201. lajstromszámú szabadalom • Mikrobiológia eljárás kolánsav-származékok előállítására
1 183 201 2 2. táblázat Vegyület A metilészterek olvadáspontja, °C Talált Irodalmi A szabad savak olvadáspontja, °C Talált Irodalmi A csúcs 150-152 152-154 — — B csúcs 154-156 156-157 219-220 221-222 C csúcs 168-169 169-172 185-186 186-188 3. táblázat Vegyület Területarány Konverzió, % Hozam, g 7a-Hidroxi-3,12-diketo-5(3-kolánsav (A csúcs) 28,54 28,54 24,3 3a,7a-Dihidroxi-12-keto-5j3-kolánsav (B csúcs) 63,06 63,06 53,6 7a,12a-Dihidroxi-3-keto-5/3-kolánsav (C csúcs) 1,54 1,54 1,30 Kólsav (D csúcs) 6,86 6,86 5,80 2. példa F 30 Az 1. példában közöltek szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tápközeghez 5,0 g/1 glükózt is adunk. 91,0 g szilárd terméket kapunk, amely átalakulatlan kólsav és kolánsav-származékok keveréke. Ezt a ^ szilárd anyagot 270 ml metanolban oldjuk, és az oldathoz 9 ml tömény vizes sósavoldatot adunk. A kapott oldatot 20 percig visszafolyatás közben forralva a szabad savakat a megfelelő metilészterekké alakítjuk. 1200 mm hosszú, 70 mm átmérőjű oszlopba 1500 g ^ szilikagél C-200-at töltünk, és a fentiek szerint előállított metilésztereket a szilikagélen adszorbcáltatjuk. A géloszlopot kloroformmal eluáljuk; ekkor 25,1 g 7a-hidroxi-3,12-diketo-5/3-kolánsav-metilésztert kapunk. Ezután az eluálást 99:1 térfogatarányú kloroform : etanol eleggyel ^ folytatjuk. Az első frakciókból 1,40 g 7a,12a-dihidroxi-3-keto-5|3-kolánsav-metilésztert, majd a további frakciókból 56,4 g 3a,7a-dihidroxi-12-keto-50-kolánsavmetilésztert különítünk el. A kapott metilészterek hidrolízisével 24,8 g 7ahidroxi-3,12-diketo-50-kolánsavat, 1,38 g 7a,12a-dihidroxi-3-keto-5|8-kolánsavat és 56,0 g 3a,7a-dihidroxi- 12 keto-5/3-kolánsavat állítunk elő. 3. példa Az 1. példában közöltek szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy változtatjuk a kólsav koncentrációját., és a reakcióelegyhez a felhasznált kólsav mennyiségére vonatkoztatva 10 súly % nátriumhidroxidot is adunk. A képződött termékek és az át nem alakult kólsav mennyiségét a 4. táblázatban soroljuk fel. 4. táblázat Vegyület 50 g/1 Hozam, g 200 g/1 szubsztrátum-koncentráció esetén 300 g/1 3a,7a-Dihidroxi-12-keto-5/3-kolánsav 27,1 108,3 47,4 7a-Hidroxi-3,12-diketo-5/3-kolánsav 12,3 49,0 21,4 7a,12a-Dihidroxi-3-keto-5j3-kolánsav 0,7 2,65 1,20 Kólsav csekély 20,1 230 17
