183182. lajstromszámú szabadalom • Eljárás pregnán-vázú szteroid hormonok előálítására
1 183 182 2 1. lehetővé válik egy olyan, azonosított szerkezetű anyag, az eniminsó előállítása, amely azután biztosítja azt, hogy a „Reichstein-féle S-anyag” előállítása során az egyes átalakulások kvantitatív hozammal menjenek végbe ; 2. a legtöbb esetben a „Reichstein-féle S-anyag” szintézise során képződő közbenső termékeket nem szükséges elkülöníteni ; 3. a szintézis végrehajtható kisebb mennyiségű oldószerrel, energiával, munkával és idővel ; 4. lehetővé válik a 17-helyzetű hidroxilcsoport acetilezése mind szabad 3-helyzetű karbonilcsoport, mind 21-helyzetű acetilcsoport jelenlétében anélkül, hogy az oldallánc sztereokémiája megváltozna; és 5. a védett „Reichstein-féle S-anyag” 11-helyzetű hidroxilezése céljából végrehajtott mikrobiális kezelés egyetlen műveletben valósítható meg. A találmányt közelebbről a következő kiviteli példával kívánjuk megvilágítani. Példa Nitrogénáramban forralás közben 300 ml vízmentes metanolban feloldunk 10 g 17-alfa-hidroxi-progeszteront, majd a kapott oldathoz cseppenként hozzáadunk 4 ml desztillált pirrolidint. Ezután a reakcióelegyet lehűtjük, majd az oldószer 70 %-át vákuumban ledesztilláljuk és az így kivált enaminsót kiszűrjük. Szárítás nélkül a sót 15—20 °C-on hozzáadjuk 8 ml perklórsav 50 ml vízmentes metanollal készült oldatához, majd az így kapott oldatot szobahőmérsékletre melegedni hagyjuk és azután további 250 ml vízmentes metanollal hígítjuk. Az így kapott elegyet ezután néhány percen át hevítjük, míg az oldószer forráspontját elérjük. Ekkor a perklorátos csapadék teljesen feloldódik és az oldat elszíntelenedik. Ezután az oldatot 30-33 °C-ra lehűtjük, majd cseppenként hozzáadjuk 2 ml elemi bróm 50 ml vízmentes metanollal készült oldatát. A brómszármazék elkülönítése nélkül a védőcsoportot eltávolítjuk úgy, hogy a reakcióelegyhez 120 ml víznek és 10 g kálium-karbonát előzetesen 30 ml vízzel elkészített oldatának az elegyét adjuk. Az így kapott reakcióelegyet nitrogénatmoszférában 30 °C-on tartjuk közel 1 órán át, majd az alkohol legnagyobb részét vákuumban 30—35 °C-on eltávolítjuk és a mradékot 50-60-szoros mennyiségű hideg vízzel hígítjuk. Ekkor fehér csapadék formájában 21 -bróm-17-hidroxi-pregna-4-én-3,20-diont kapunk, amelyet kiszűrünk, hideg vízzel alaposan átöblítünk és 50 °C-os forró levegőáramot átáramoltatva rajta szárítunk. Az így kapott, 210- 215 °C olvadáspontú anyagot feloldjuk 500 ml, 5 g kálium-acetátot tartalmazó acetonban, majd az így kapott oldatot vissza folyó hűtő alkalmazásával 2-3 órán át forraljuk. Miután az aceton legnagyobb részét ledesztilláltuk, a maradékot 50-60-szoros mennyiségű vízzel hígítjuk, a hígítást szűrjük és a kiszűrt anyagot vízzel átmossuk. Az így kapott „Reichstein-féle S-anyag 5 21-acetát”-ját szárítjuk, majd hozzáadunk 4-5- szörös mennyiségű metanolt és forraljuk. A forralás után a kapott oldatot nagy mennyiségű vízzel hígítjuk, majd 0 °C-ra lehűtjük és a kivált csapadékot kiszűrjük. így 9 g mennyiségben 240 °C olvadás- 10 pontú 21-acetoxi-17-hidroxi-pregna-4-én-3,20-diont kapunk. Az előző bekezdés szerinti anyagból 10 g-ot feloldunk 20 ml metilén-klorid, 10 ml ecetsavanhidrid, továbbá p-toluol-szulfonsav vagy perklórsav 1 %-os 15 etil-acetátos oldata mint katalizátor elegyében. Az oldást forralással segítjük. 3-4 óra elteltével az acetilezés teljes és kétféle termék, a „Reichsteinféle S-anyag 3,17,21-triacetát”-ja és a „Reichsteinféle S-anyag 17,21-diacetát”-ja elegyét kapjuk oldat 20 formájában. Az oldatot 30 °C-ra lehűtjük, majd 100 ml metanolt adunk hozzá. Az ecetsavanhidrid etil-acetáttá történő átészterezését metanol és savas katalizátor jelenlétében szobahőmérsékleten 3—4 órás reakcióidővel hajtjuk végre. Az oldószert azután 25 ledesztilláljuk, míg sűrű kristályos maradékot kapunk, amelyet azután vízzel hígítunk. Ekkor a Reichstein-féle S-anyag kétféle acetát-származékának fehér kristályait kapjuk. Mindkét származék 17-helyzetű hidroxilcsoportja acetilcsoporttal van védve. 30 A kristályos tömeg szűrése és szárítása után 10 g mennyiségben olyan terméket kapunk, amely alkalmas a 11-helyzetben végrehajtandó mikrobiális hidroxilezésre. 35 Szabadalmi igénypont Eljárás pregnán vázú szteroid hormonok előállítására a szteroidváz 3-helyzetű karbonilcsoportjának 40 eniminsó formájában való megvédésével, brómozással, a 3-helyzetű védőcsoport hidrolizálásával, a 21- helyzetben való acetilezéssel és a 17 helyzetű hidroxilcsoport megvédésével, azzal jellemezve, hogy az eniminsót alacsony hőmérsékleten savas oldatban 45 csapjuk ki, az ekkor kapott sókeveréket hőkezeléssel olyan egyetlen jól meghatározott sóvá alakítjuk, amelynek infravörös spektrumában 1610 cm"1-nél konjugált kettőskötésre jellemző csúcs észlelhető, ezután egy reakcióedényben végrehajtjuk a brómo- 50 zást és a 3-helyzetű védőcsoport hidrolizálását, majd a 17-helyzetű hidroxilcsoportot védjük acetilezéssel ecetsavanhidridet és savas katalizátort használva szabad 3-helyzetű karbonilcsoport és 21-helyzetű acetilcsoport jelenlétében, és az ekkor kapott, a 55 11-helyzetben egyetlen mikrobiális kezeléssel hidroxilezhető terméket elkülönítjük. 3 db ábra 3
