183101. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vegyi anyagok mutagén hatásának kvantitatív jellemzésére in vitro körülmények között végzett vizsgálattal
1 183 101 2 2. példa Az 1. példában ismertetett eljárással egyéb vegyületek dimérekvivalens dózisait, illetve azok reciprok értékeit is meghatároztuk. A kapott adató- 5 kát az 1. táblázatban közöljük. A vizsgált vegyületeket vízben vagy kívánt esetben az oldódás vagy elegyedés elősegítése érdekében legfeljebb 20%-os vizes alifás alkohol-oldatban vagy legfeljebb 38 %os vizes dimetil-szulfoxid-oldatban oldottuk vagy elegyítettük. 1. táblázat Vizsgált vegyület A dimérekvivalens dózis reciproka, liter/mól.perc Nitrozo-metilkarbamid 0,76 Etilénimin 6,7 4-Amino-Nj „-metil-pteroilglutaminsav (Methotrexate) 11 N-Acetil-etilénimin 33 2-Klór-etil-2-hidroxi-etilszulfid (monofunkciós kénmustár) 38 1,4-Di-(2-metilszulfoniloxetilamino)-l ,4-didezoxieritrit-dimetilszulfát (Lycurím) 111 Di-(2-klór-etil)-szulfid (bifunkciós kénmustár) 1000 Az 1. táblázatban felsorolt adatok kiváló egyezésben állnak azzal a tapasztalattal, hogy a vizsgált vegyszerek károsító hatása valóban a megadott sorrendben nő, és állatkísérletekben meghatároztt letális dózisuk aránya jól megfelel a fenti értékekből számítható hányadosoknak. Vizsgálataink szerint a kísérleti hibahatár 10%nál kisebb érték. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás vegyi anyagok mutagén hatásának kvantitatív jellemzésére in vitro körülmények között végzett vizsgálattal, azzal jellemezve, hogy egy lizogén gént nem tartalmazó, kettősláncú DNS-sel rendelkező fág statisztikus kiértékelés céljára elég nagy célszerűen 107 fág/ml, koncentrációjú, puíferoldattal (pH: kb. 7,0) készített szuszpenziójához ismert mennyiségű, vízben, legföljebb 20%-os vizes alifás alkohol-oldatban vagy legföljebb 38%-os vizes dimetilszulfoxid-oldatban oldódó vagy a felsorolt oldószerekkel elegyedő vizsgálandó vegyszert adunk, a szuszpenzióból a vegyszer beadagolása után azonnal mintát veszünk és önmagában ismert módon, a megfelelő gazdasejten végzett tenyésztéssel meghatározzuk a minta kiindulási fágkoncent-25 rációját, a vegyszert tartalmazó fágszuszpenziót előre meghatározott hőmérsékleten, célszerűen 37 °C-on tartjuk, a szuszpenzióból időről időre mintát veszünk és ismert módon, a megfelelő gazdasejten végzett tenyésztéssel meghatározzuk a túl-30 élő fágok koncentrációját, majd a kapott adatokból meghatározzuk a mutagén hatására jellemző számértéket. (Elsőbbsége: 1981. szeptember 4.) 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a vizsgálatot vízben 35 oldódó vagy vízzel elegyedő vizsgálandó vegyszerrel végezzük. (Elsőbbsége: 1979. május 17.) 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy tagként T7 fágot használunk fel. (Elsőbbsége: 1979. május 17.) Ábra nélkül 5
