182997. lajstromszámú szabadalom • Eljárás módosított intakt erithrociták előállítására
a kutyà szervezetébe visszavezetjük. Az oxigén parciális nyomás csökkentésekor a kutya 110 Torr-nál (ez 13 800 m-es magasságnak felel meg) esik a földre. A kezelés eredményeként tehát a kutya által elviselt magasság felső határa +13%-al emelkedett. Ezt a felső magassági g értéket 2 napon át ugyanezzel az eredménnyel mértük. A kísérlet után történő 4 hónapos (patkány) és 1 hónapos (kutya) megfigyelés után mindkét állat élénk volt és jól érezte magát. Emberi eritrociták nagy oxigén-affinitású hemoglobin mutánsokkal Ismeretlen összetételű (Hb\iainz) nagy oxigén-affinitású 19 éves nőnemű betegtől vért vettünk. A friss eritrociták 25 °C-on és 7,4 pH-értéken PO20/2)=7,5 Torr jg értéket mutatnak. A szövetekhez történő oxigénszállítás tehát 50%-ra csökken. A szövetben levő oxigénhiány miatt a beteg 6 héten át vértranszfúziót kapott. Az eritrocitáknak a „módszerek” fejezetnél leírt módon inozithexafoszfáttal történő feltöltésének eredményeként a 20 Po2(1/2) érték 18,7 Torr-ra emelkedett. Ez azt jelenti, hogy a beteg vérének nagy oxigén-affinitása a találmányunk szerinti eljárással a friss eritrocitáknak megfelelő normál nagyság feletti értékre csökkenthető és ez a teljes vérkicserélődés +23%-ának megfelelő oxigéntranszport- 2!5 növekedésének felel meg. y 182 997 Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás megnövelt oxigén-féltelítettségi nyomással rendelkező, módosított, intakt eritrociták előállítására, azzal jellemezve, hogy jnozit-hexafoszfáttal tö'tött lipidvesikulumokat a fázisátmeneti hőmérsékletnél magasabb hőmérsékleten 7,2 és 8,6 közötti pH-értéken az eritrocitákkal egyesítünk, majd kívánt esetben az eritrocitákat tisztítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy 1. inozit-hexafoszfátot az oldat telítődéséig izotóniás pufferoldatban oldunk; 2. a kapott oldatban foszfatidil-kolin, foszfatidil-szerin és koleszterin 10—5 : 4— 1 : 10— 3 mólarányú lipidkeverékét szuszpendáljuk; 3. a kapott szuszpenziót a fázisátmeneti hőmérsékletnél magasabb hőmérsékleten, kis unilamelláris vesikulumok képződése közben ultrahanggal történő dezintegrálásnak vetjük alá; 4. a keveréket centrifugáljuk, a felül elhelyezkedő, inozit-hexafoszfátban feldúsított kis lipid-vesikulumokat és a szabad inozit-hexafoszfátot tartalmazó szuszpenziót elválasztjuk; 5. a vérplazmától előzetesen centrifugálással és mosással elválasztott emberi eritrocitákat a felül elhelyezkedő, inozit-hexafoszfátban feldúsított kis lipid-vesikulumokat és szabad inozit-hexafoszfátot tartalmazó szuszpenzióban szuszpendáljuk; 6. a kapott szuszpenziót 10— 37 °C-os hőmérsékleten inkubáljuk, és 7. az eritrocitákat izotóniás konyhasó-oldattal vagy izotóniás pufferrel mossuk és az inkubációs közegtől kvantitativen megszabadítjuk. 2 (9 dt ábra) Megjelent a Műszaki Könyvkiadó gondozásában A kiadásért felel: Himer Zoltán osztályvezető Zöldért Nyomda - Miskolc
