182973. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibakteriális hatású tienamicin antibiotikumokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 182 973 2 extinkció elmaradt) és az egyes frakciókban lévő N-formimidoil-tienamicin összes mennyiségét kiszámítjuk. A kezdeti és végső frakciót folyadékkromatográfiás tisztaságra megvizsgáljuk, és a kívánt anyagban dús részfrakciókat összegyűjtjük. Ennek a pH-ját mind pH-méterrel, mind pedig brómtímol-kék indikátor-oldattal meghatározzuk, és szükség esetén 7,2—7,4 értékre állítjuk be. Az egyesített frakciókat ezután UV-fénnyel megvizsgálva az összes formamidin-tartalmat meghatározzuk. 15—16 g-ot kapunk. Ez 75%-os kitermelésnek felel meg. A kívánt anyagot tartalmazó részfrakciókat fordított ozmózis berendezésen 10 °C alatti hőmérsékleten betöményítjük amennyire csak lehet, majd a betöményítést cirkulációs elpárologtatóban befejezzük 28 °C alatti hőmérsékleten 33 g liter töménységig. Körülbelül 500 ml össztérfogatú koncentrátumot kapunk. Di lépes: N-formimidoil-tienamicin kristályosítása A/ előző lépésben kapott koncentrátum pH-ját 7,3-ra állítjuk be. ha ettől eltérő lenne. Ennek UV-vizsgálattal ellenőrzött N-formimidoil-tienamicin-tartalma 85-909? közötti. A koncentrátumot közepes porozitású szinteruvegszürőn nagyméretű Erlenmeyer-lombikba szűrjük. A koncentrátumhoz a szűrőn át öt rész (körülbelül 2200 mi) 3A etanolt adunk és az oldatot szobahőmérsékleten 10 percig keverjük, majd 0°C-on további 12-14 óráig. A keletkezett kristályokat leszívatjuk, és 0.1 térfogatrész (körülbelül 250 ml) 0 °C-os, 805--os 3A etanollal, majd ezt követően 1/25 térfogatrész (körülbelül 100 ml) 3A etanollal szobahőmérsékleten mossuk. A kristályokat vákuumban szárítjuk 12-24 óráig. Az összes N-formimidoil-tienamicin-kitermelés körülbelül 409? (10- 12 g). A fentiek szerint előállított és elegyított 50 g N-formímidoil-tienamicin analitikai eredményei az alábbiak: C: elméleti 45,42'?; talált 45,829», H: elméleti 6,039? : talált 5,729?. N: elméleti 13,24'?: talált 13.1'?. S: elméleti 10.10'? : talált 10,139?. Égetési maradék:számított 0.52?, talált 0,47' ?. [u — 84.4 : T G. — 6,89?; UV: — 300 MM; E ? = 328. A találmány azon a felismerésen alapul, hogy a tienamicin-típusú antibiotikumok, mint a tienamicin es a íormimidoii-tienamicin baktériumellenes Itatása lényegesen megnövelhető és hatástartama meghosszabbítható, ha az antibiotikumot olyan vegyietekkel kombináljuk, amelyek gátolni képesek a renális dipeptidáz enzimnek a béta-laktám-gyűrűt hidrolizáló és ezáltal az antibiotikumot ínaktiváló hatását. Azt találtuk, hogy erre a célra, a dipeptidáz (E.C.3.4.13.1 1 ) anyagcseréjének szelektív gátlására. a (11) általános képlett! 3-monoszubs/tituált Z-2- acilamino-propenoátok alkalmasak; e képletben R1 hidrogénatomot, alkálifématomot. 2 6 szénatomos alkilcsoportot vagy I 4 szénatomos alkilcsoportokat tartalmazó dialkilamino-alkilcsoportot, R‘ adott esetben halogcnatommal. metoxi- vagy fen il - csoporttal helyettesített 3 10 szénatomos, egyenes vagy elágazó szénláncú alkilcsoportot, adott esetben I —) szénatomos alkilcsoporttal vagy halogénatommal egyszeresen vagy kétszeresen helyettesített 3 5 szénatomos cikloalkilcsoportot vagy (3- 6 szénatomos )-cik!oalkil-( 1 4 szénatomos (-alkilcsoportot képvisel. R3 jelentése 1—10 szénatomos alkilcsoport, amely adott esetben a láncvégi szénatomon halogénatommal, 1—4 szénatomos alkoxi-, 1 —4 szénatomos alkiltio-csoporttal, di-( 1 —4 szénatomos)-alkiTamino-csoporUal, karboxil-, fenil-, tetrahidrofuril-, guanidino-, ciano-, amidino-, D-, L- vagy DL-2-amino-2-karboxi-etiltio-, 2-oxo-2-amino-etiltio-, karboximetil-metilaminovagy 1-foszfono-etilamino-csoporttal vagy kvaterner nitrogénatomot tartalmazó csoporttal (kvaterner aminocsoporttal) lehet helyettesítve, melyben a kvaterner nitrogénatomon 1 —4 szénatomos alkilcsoportok vannak. Az R2 helyén álló, adott esetben a fent megadott módon helyettesített alkilcsoport egyenes vagy elágazó szénláncú lehet; az R2 alkilcsoportban a karbonilcsoporttal szomszédos szénatom célszerűen primer vagy szekunder szerkezetű. A fenti meghatározásnak megfelelő R2 szubsztituensek szerkezeti felépítésük szempontjából a csatolt rajz szerinti ( 11 A), (1IB), illetőleg (I1C) általános képletekkel jellemezhetők. A (IIA) általános képlet esetében R2 jelentése olyan R"1 csoport, amely 3-10 sz.énatomos egyenes láncú, elágazó vagy gyűrűs alkilcsoport; ez a csoport az R: fenti meghatározásának megfelelően szubsztituálva is lehet. A (IIB) általános képlet esetében R2 jelentése olyan R'R1’ csoport, amelyben R* 3-6 sz.énatomos cikloalkilcsoportot képvisel. R'’ pedig egy vagy két 1 —4 sz.énatomos alkil-, vagy klór-szubsztituenst képvisel az R^ cikloalkilcsoporton; ez az R^R'1 csoport emellett szubsz.títualva is lehel, amint ezt R2 jelentésénél definiáltuk. A (1IC) általános képlet esetében R‘ jelentése R R'. ahol R jelentése I 3 szénatomszámú alkiléncsoport és Rs jelentése 3 (> szénatomszámú cikloalkilcsoport, amely az R" definíciója értelmében lehet szubsztittiált is. Ezen alcsoportokhoz az alábbi specifikus vegyületek tartoznak : ( 11 A) képlet ti v egy lilétek : Z-2-izovaleramido-2-penténsav-. Z-2-izovaleramido-2-hiitensavas-metilészter. Z-2-izovaleramido-2-buténsav; Z-2-ben/amido-2-bu(cnsav. Z-2- ( 3.5.5-trimetil-he\ananiido)2-but énsav, Z-2-ciklohutánkarbo\amido-2-buténsav. Z-2-ciklopropáti-karhoxamido- 2-bnténsav. Z-2-ciklopropán-karho\anudo-2-pentéhsav. Z-2-(3-metilvaleramido)-2-buténsav. Z-2-cikloheptán-karbo\amido-2-buténsav, Z-2-nonánamido-2-buténsav. Z-2- ciklohexán-karbo.\amido-2-buténsav. Z-2-(4-metilvaleramido)-2-buténsav. Z-2-t-butilacetamido-2-buténsav, Z-2-oktánamido-2-buténsav. Z-2-butiramido-2-buténsav, Z-2-valeramido-2-buténsav, Z-2-valeramido-2-penténsa\. Z-2-ciklopentán-karboxamido-2-buténsav. Z-2-(b-metilheptánanudo)-2-buténsav. Z-2-hexanamido-2-buténsav, Z-2-(3.7-dimetil-oktánamído)-2-biiténsav. Z-2-(3,7-dímetil-6-oktanamido)-2-buténsav, Z-2-( 5-klórvaleramido)- 2-buténsav, Z-2-(3-klórbenz.oilamido)-2-buténsav, Z-2-(2- klórbenzamido)-2-buténsav. Z-2-nonánamido-2-buténsav, Z-2-(6-brómhexanamido)-2-buténsav, Z-2-(3,3-dimetilpropénamido)-2-buténsav. Z-2-benzamido-2-fahéjsav, Z-2-benzamido-2-penténsav. Z-2-benzamido-5-metoxi-2- penténsav. Z-2-benzatnído-2-hexéndikarbonsav, Z-2-izovaleramido-2-okténsav, Z-2-izovaleramido-2-fahéjsav, Z-2-izovaleramido-2-hexéndi sav, Z-2-ciklopropán-kar-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
