182902. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérnyomáscsökkentő hatású dipeptid származékok előállítására
1 182 902 2 22. példa N-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-L-alanil-L-prolin A Rohm and Haas Co. amerikai egyesült államokbeli cég által előállított XAD-2 márkanevű polisztirol-gyantát megőröljük, majd frakcionáljuk, elválasztva a 200—400 mesh szemcseméretű frakciót. Ebből 440 ml-t kromatográfiás oszlopba töltünk, majd az oszlopot 95 térfogat % vízből és 5 térfogat % metanolból álló, ammónium-hidroxidra nézve 0,1 mólos oldattal ekvilibráljuk. Az oszlopra ezután felvisszüka21. példában ismertetett módon előállítható és tisztítható N-(l-karboxi-3-fenil-propil)I^alanil-L-prolinból 350 mg 10 ml említett oldószerrel készült oldatát. Az eluálást is ugyanezzel az oldószerrel végezzük. Az oszlopot elhagyva az első izomer az eluátumban 375-400 ml-nél jelenik meg. Sorrendben a második izomer 440—480 ml eluátum-térfogatnál jelenik meg. A közbenső frakciók a kétféle izomer keverékét tartalmazzák. Az első izomert tartalmazó frakció fagyasztásos szárításával 130 mg fehér színű csapadékot kapunk. Ezt azután 1 ml, 3-as pH-ra beállított vízből átkristályosítjuk, 94 mg mennyiségben 148—151 °C olvadáspontú (bomlik) fehér tűkristályokat kapva. Ez az aktívabb izomer és az elvégzett röntgenográfiai elemzés tanúsága szerint S,S,S-konfigurációjú. Vákuumban foszfor-pentoxid fölött végzett szárítás után fajlagos forgatóképessége Md =—67,0° (c = l, 0,1 mólos sósavoldat). A DMSO-ban felvett NMR spektrumban a metil-protonoknak megfelelő egyetlen dublett észlelhető 1,22 p.p.m.-nél. A második izomert tartalmazó frakciók líofilizálásakor 122 mg mennyiségben ugyancsak fehér csapadékot kapunk. Ha ebből 103 mg-ot 2,5 ml, 3-as pH-ra beállított vízből átkristályosítunk, akkor 64 mg mennyiségben 140—145° C olvadáspontú (bomlik) pelyhes fehér kristályokat kapunk. Ennek az izomernek a fajlagos forgatóképessége Md =-101,6° (c = 1, 0,1 mólos sósavoldat) szárítás után. NMR spektrumában a metil-dublett 1,17 p.p.m.-nél észlelhető. 23. példa N- [ 1 -(S)-etoxikarbonil-3-fenil-propil] -L-alanil-L-prolin 1,03 g 2-oxo-4-fenil-vajsav-etilészter és 0,19 g L-alanil- L-prolin etanol és víz 1:1 térfogatarányú elegyével készült oldatához szobahőmérsékleten 2 óra leforgása alatt cseppenként hozzáadjuk 0,19 g nátrium-ciano-bór-hidrid etanol és víz elegyével készült oldatát. Amikor a kondenzációs reakció teljes, akkor a terméket erősen savas ioncserélő gyantán adszorbeáltatjuk, majd a gyantát 2 térfogat % piridint tartalmazó vízzel eluáljuk. A termékben gazdag frakciók fagyasztva szárításakor 0,25 g mennyiségben a nyers cím szerinti vegyületet kapjuk. Tömegspektrumában 448 m/e egységnél a monoszililezett speciesznek megfelelő molekulaion észlelhető. A címben említett konfigurációjú izomert kromatografálással különíthetjük el. 24. példa N-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-L-alanil-L-4-hidroxiprolin A 21. példában ismertetett módon 2-oxo-4-fenil-vajsavat és L-alanil-L-4-hidroxi-prolint nátrium-ciano-bórhidrid jelenlétében kondenzálunk, a cím szerinti vegyületet kapva. A deuterometanolban felvett NMR spektrumban 1,53 p.p.m.-nél központos dublett (3H), 7,13- 8 nál szingulett (5 H), továbbá a 2,0-4,7 p.p.m. tartományban multiplettek sorozata észlelhető. A szililezett termék tömegspektrumában 580 m/e egységnél a triszililezett származéknak megfelelő molekulaion észlelhető. 25. példa N-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-L-szerinil-L-prolin A 21. példában ismertetett módon 2-oxo-4-fenil-vajsavat és L-szerinil-L-prolint nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében kondenzálunk, a cím szerinti vegyületet kapva. A szililezett termék tömegspektrumában 580 m/e egységnél a triszililezett származéknak megfelelő molekulaion észlelhető. A D20-ban felvett NMR spektrum a várt szerkezetnek megfelelő. 26. példa N-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-L-fenilalanil-L-prolin A 21. példában ismertetett módon 2-oxo-4-fenil-vajsavat és L-fenilalanil-L-prolint nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében kondenzálunk. A termék tömegspektrumában 406 m/e egységnél a molekulaion mínusz víz (424- -18 = 406) értékű ion észlelhető. A D20-ban felvett NMR spektrum a várt szerkezetnek megfelelő. 27. példa N-[ l-Karboxi-3-(3-indolil)-propil]-L-alanil-L-prolin A 21. példában ismertetett módon 4-(3-indolil)-2-oxovajsavat és L-alanil-L-prolint nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében kondenzálunk, a cím szerinti vegyületet kapva. Triszililezett származékának tömegspektrumában 603 m/e értéknél a molekulaion és 588 m/e értéknél M+—15 csúcs jelenik meg. 28. példa N- ( 1 -Karboxi-3-fenil-propil) -L-alanil-3,4-dehidroprolin 0 °C-on 2,3 g 3,4-dehidroprolin, 7,2 g terc-butoxikarbonil-L-alanin-N-hidroxi-szukcinimidoészter és 2,5 g nátrium-karbonát dioxán és víz elegyével készült keverékét egy éjszakán át keverjük, majd a pH-t sósavval 8-ra beállítjuk. Ezt követően a reakcióelegyet vákuumban betöményítjük, majd fagyasztva szárítjuk. A terc-butoxikarbonil védőcsoport eltávolítása céljából a terméket trifluorecetsavban oldjuk, majd az utóbbi eltávolítása után a maradékot H+-formájú Dowex 50 gyantán kromatografáljuk a 2. példában ismertetett módon, 2 térfogat % piridint tartalmazó vízzel eluálva. A dipeptidet ezután fagyasztásos szárítással elkülönítjük. Az így kapott köztiterméket ezt követően a 24. példában ismertetett módon 2-oxo-4-fenil-vajsawal kondenzáljuk, termékként diasztereoizomer-keveréket kapva. A szililezett termék tömegspektrumában 490 m/e egységnél a diszililezett speciesznek megfelelő molekulaion észlelhető. Az ily módon kapott 140 mg-nyi diasztereomer-keveréket a 22. példában ismertetett módon XAD-2 gyantán végzett kromatografálással komponenseire szeparáljuk. A nagyobb mennyiségű komponens (70 mg) hagyja el először az oszlopot. Ennek a fajlagos forgatóképessége [a]p = —143 (c= 1,3 metanol). Mindegyik komponens tömegspektrumában 490 m/e egységnél a ditrimetilszililezett speciesznek megfelelő molekulaion észlelhető. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
