182902. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vérnyomáscsökkentő hatású dipeptid származékok előállítására
1 182 902 2 megfelelő. A tömegspektrumban 414-nél csúcs észlelhető, ami a szililezett molekulaion mínusz 15 értéknek felel meg. Kromatografálással a cím szerinti izomer különíthető el. 66. példa N- [l-Karboxi-3-(4-fenoxi-fenil)-propil] -L-alanil- L-prolin 2-0xo4-(4-fenoxi-fenil)-vajsav (előállítható 4-fenoxifenilcsoportot tartalmazó Grignard-reagens etilén-oxiddal végzett reagáltatása, a kapott alkohol megfelelő bromiddá alakítása, a bromid-származék 1,3-ditián-2-karbonsav-etilészterrel való kondenzálása, az ekkor kapott ditián-származék oxidativ hasítása és végül bázikus hidrolizálása útján) és L-alanil-L-prolin vízzel készült keverékének a pH-ját híg bázissal 7-re beállítjuk, majd fölöslegben vett nátrium-ciano-bór-hidridet adunk hozzá. A reakció befejeződése után a cím szerinti vegyületet kromatografálással különítjük el. A diszililezett származék tömegspektrumában 584 (M+), 569 (M+—15), 468 és 370 (alapcsúcs) m/e értéknél találhatók csúcsok. 6 7. példa N- alfa-( 1 -Karboxi-3-fenil-propil) -L-ornitil-L-prolin A 42. példában ismertetett módon N-delta-tercbutoxi-karbonil-L-ornitil-L-prolint és 2-oxo-4-fenil-vajsavat nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében kondenzálunk, majd a védőcsoportot 4 n etil-acetátos hidrogénklorid-oldattal végzett kezelés útján eltávolítjuk. A nyers diasztereomer hidrokloridsót tartalmazó reakcióelegyet ezután erősen savas ioncserélő gyantára visszük, majd a gyantát 2%-os vizes piridin-oldattal eluáljuk. Az eluátumból elkülönített terméktömegspektrumában 355 m/e egységnél olyan molekulaionnak megfelelő csúcs észlelhető, amely a termék mínusz 36 értéknek felel meg. Az NMR-spektrum a várt szerkezetnek megfelelő. 68. példa N-alfa-[ 1-(S)-Etoxi-karbonil-3-fenil-propil]-L-lizil- L-prolin 50 ml vízmentes és 2 g poralakú 5 Â méretű molekulaszitát tartalmazó etanolban feloldunk 2,58 g 2-oxo- 4-fenil-vajsav-etilésztert és 859 mgN-epszilon-terc-butoxikarbonii-L-lizil-L-prolint. A reakció befejeződése után a molekulaszitát kiszűrjük, majd a szűrletet bepároljuk. A maradékot vízben oldjuk, majd a vizes oldatot dietiléterrel extraháljuk és az extraktumot erősen savas ioncserélő gyantára visszük. A gyanta 2 %-os vizes piridinoldattal végzett eluálásakor kapott eluátumból 639 mg mennyiségben nyers védett termék, azaz n-alfa-(l-etoxikarbonil-3- fenil - propil) -N- epszilon - terc-butoxi-karbonil- L-lizil-L-prolin különíthető el. A védőcsoportot ezután 4 n etil-acetátos hidrogén-klorid-oldattal eltávolítjuk, majd a képződött hidrokloridsót tartalmazó reakcióelegyet erősen savas ioncserélő gyantára visszük. A gyanta 2%-os vizes piridin-oldattal végzett eluálásakor kapott eluátumból 270 mg termék különíthető el. Tömegspektrumában 678 m/e egységnél a diszililezett speciesz mínusz 1 értéknek megfelelő molekulaionnak megfelelő csúcs észlelhető. Az NMR-spektrum a várt szerkezettel összhangban van. A cím szerinti izomer kromatografálással különíthető el. 16 69. példa N-alfa-( 1 -Karboxi-3-fenil-propil) -N-epszilon-N- epszilon-dimetil-L-lizil-L-prolin N-alfa-terc-butoxi-karbonil-N-epszilon-benziloxi-karbonil-L-lizil-L-prolin-benzilésztert reduktív metilezésnek vetünk alá formaldehidben 2,8 at hidrogéngáz-nyomáson 10%-os szénhordozós palládiumkatalizátor jelenlétében. Ezután az alfa-terc-butoxi-karbonil védőcsoportot 4 n etil-acetátos hidrogén-klorid-oldattal végzett kezelés útján lehasítjuk, majd az így kapott N-epszilon-N-epszilondimetil-L-lizil-L-prolin-hidrokloridot a 42. példában ismertetett módon nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében 2-oxo-4-fenil-vajsawal kondenzáljuk, a cím szerinti vegyületet kapva. A tömegspektrumban 415-nél a termék mínusz 18 értéknek megfelelő molekulaiont reprezentáló csúcs észlelhető. Az NMR-spektrum a várt szerkezetnek megfelelő. 70. példa N-alfa-[l-(S)-Karboxi-3-fenil-propil]-L-lizil-L-prolin A 45. példa B. részében ismertetett módon diasztereomer-keverékként előállítható N-alfa-(l-karboxi-3- fenil-propil)-L-lizil-L-prolint metanolos oldatban LH-20 gyantán gélszűréses kromatografálással tisztításnak vetünk alá, majd a 22. példában ismertetett módon előkészített XAD-2-oszlopot 53 °C-on 4% acetonitrilt tartalmazó 0,1 mólos ammónium-hidroxid-oldattal ekvilibráljuk. Ugyanebben az oldószerben az előbb említett diasztereomer-keverékből 250 mg-ot feloldunk, majd a kapott oldatot az oszlopra felvisszük. Ha az oszlopot ugyanezzel az oldószerrel eluáljuk, akkor az első izomer az eluátum 320-360 ml-nyi térfogattartományában jelenik meg. A második izomer 450 és 540 ml között eluálódik. A köztes frakciók izomer-keveréket tartalmaznak. Ha az első izomert tartalmazó frakciókat fagyasztva szárítjuk, akkor 72 mg mennyiségben pelyhes fehér csapadékot kapunk. Ez az aktívabb izomer és S,S,S-konfigurációjú azon analógia alapján, amely szerint az N-alfa-(lkarboxi-3-fenil-propil)-L-alanil-L-prolin aktívabb izomeije röntgendiffrakciós vizsgálat alapján S,S,S-konfigációjúnak bizonyult. Szilikagélen etil-acetát, N-butanol, víz és ecetsav 1:1:1:1 térfogatarányú elegyével mint futtatószerrel végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során ez a csapadék egyetlen foltot ad 0,43-as Rf-értékkel. A 300 MHz-es NMR-spektrumban 3,4 p.p.m.-nél triplett észlelhető, amely annak a metin-protonnak felel meg, amely gamma-helyzetű a fenil-szubsztituenshez képest. Ha a második izomert tartalmazó frakciókat fagyasztva szárítjuk, akkor ugyancsak 72 mg mennyiségben fehér pelyhes csapadékot kapunk. Ez a csapadék vékonyrétegkromatografáláskor egyetlen foltot ad 0,39-es Rf-értékkeL A 300 MHz-es NMR-spektrumban 3,61 p.p.m.-nél észlelhető az a triplett, amely a fenilszubsztituenshez képest gamma-helyzetű metin-protonnak felel meg. 71. példa N-alfa-(l-Karboxi-3-fenil-propil)-N-epszilon-acetil-L-lizil-L-prolin A 42. példában ismertetett módon 2-oxo-4-fenilvajsavat és N-epszilon-acetil-L-lizil-L-prolint reagáltatunk nátrium-ciano-bór-hidrid jelenlétében, a cím szerinti vegyületet kapva. Az NMR-spektrum a várt szerkezet5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
