182866. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új tetrapeptid-származékok előállítására
1 182 866 2 elegyként eltávolítjuk. A keveréket 15 órán keresztül melegítjük, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, és éterrel hígítjuk. A keletkező csapadékot egyesítjük, metilalkohol-éter elegyből átkristályosítjuk, és ily módon 55,3 g (56 %) kívánt terméket nyerünk, melynek olvadáspontja 112-115 °C.. A C17H21NOsS képlet alapján (Ms = 351,42) az analízis számított értékei: C 58,10. H 6,02. N 3,99 %. talált értékei: C 58,19, H 6,06, N 3,82 %. B. Benzil-N“ -terc-butiloxikarbonil-O-benzil-L-tirozil-D- alinát 200 ml vízmentes N,N-dimetilformamidhoz (DMF) hozzáadunk 35,1 g (0,1 mól) A részben leírt terméket. Az így nyert elegyet keverjük, 0 °C-ra lehűtjük, és 11,2 g (0,1 mól) diazabicíklooktánt (DABCO) adunk hozzá. A keveréket 10 percen keresztül 0 °C hőmérsékleten kevertetjük, ezután először 37,1 g (0,1 mól) N“-tercbutiloxikarbonil-O-benzil-Ltirozint, majd 13,5 g (0,1 mól) 1-hidroxi-benzotriazolt (HBT) és 20,6 g (0,1 mól) N,N!-diciklohexilkarbodiimidet (DCC) adunk hozzá. Az így nyert keveréket 0 °C hőmérsékleten 3 órán keresztül és ezután szobahőmérsékleten 24 órán keresztül kevertetjük, majd 0 °C-ra lehűtjük. Ekkor egy szuszpenzió keletkezik, melyet szűrünk, és a szűrletet vákuumban bekoncentráljuk. A maradékot ezután etilacetátban feloldjuk, majd először In nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, azután vízzel, 0,75n hideg citromsavoldattal és végül újból vízzel mossuk. A szerves fázist ezután vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük, és vákuumban bekoncentráljuk. A visszamaradó anyagot ezután forró etilalkoholban feloldjuk, melyből lehűlés után az oldott anyag kikristályosodik. Etilalkoholból történő egyszeri átkristályosítás után 41,5 g (80 %) tiszta kívánt terméket kapunk, melynek olvadáspontja 121-123 °C. A C30H36N206 képlet alapján (Ms = 520,63) az analízis számított értékei: C 69,21, H 6,97, N 5,38 %, talált értékei: C 68,99, H 6,75, N 5,17 %. C. N^-terc-butiloxikarbonil-O-benzil-L-tirozil-D-alanin 200 ml tetrahidrofurán (THF) és 20 ml víz keverékéhez 31,2 g (0,06 mól) B rész szerinti terméket adunk. Az így nyert oldatot 0 °C-ra lehűtjük, és lassan 13,2 ml (1,1 ekvivalens) 5n nátriumhidroxid-oldatot adunk hozzá. Az így nyert keveréket keverjük, és lassan szobahőmérsékletre hagyjuk felmelegedni, öt óra múlva a keveréket víz és éter között megoszlatjuk. Az elkülönített vizes fázist hűtjük, a pH-t citromsav hozzáadásával 2-re állítjuk be, és a keveréket etilacetáttal extraháljuk. Az etilacetátos extraktumot vízzel mossuk, vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük, és éterrel hígítjuk. A kivált csapadékot egyesítjük, és ily módon 17,7 g (67 %) kívánt terméket nyerünk, melynek olvadáspontja 160-162 °C. A C24H30N2O6 képlet alapján (Ms = 442,51) az analízis számított értékei: C 65.14, H 6.83. N 6,63 %. talált értékei: C 64,73, H 6,70, N 6,20 %'. D. Benzil-Na-terc-butiloxikarbonil-0-benzil-L-tirozil- D-alanil-glicinát 70 ml vízmentes DMF-hoz hozzáadunk 6,74 g (0,02 mól) benzilglicinát p-toluolszulfonsavas sót, az így nyert keveréket 0 °C-ra lehűtjük, és 2,24 g (0,020 mól) DABCO-t adunk hozzá. A keveréket néhány percig keverjük, majd először 8,84 g (0,020 mól) C részben leírt terméket és ezután; 2,7 g (0,020 mól) HBT-t és 4,12 g (0,020 mól) DCC-et adunk hozzá. A reakciókeveréket 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az így nyert szuszpenziót 0 °C-ra lehűtjük, szűrjük, és vákuumban bekoncentráljuk. A visszamaradó anyagot etilacetátban feloldjuk, és először In nátriumhidrogénkarbonátoldattal, majd vízzel, hideg 0,75n citromsav-oldattal és végül újból vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük, és vákuumban bekoncentráljuk. A maradéknak etilalkoholból történő kikristályosítása után 10,8 g (92 %) kívánt terméket nyerünk, melynek olvadáspontja 145—147 °C. A C33H39N307 képlet alapján (Ms = 589,69) az analízis számított értékei: C 67.22. H 6.67. N 7.13 %, talált értékei: C 67,32, H 6,83, N 6,91 %. E. Na-terc-butiloxikarbonil-0-benzil-Ltirozil-J>alanilglicin 150 ml tetrahidrofurán és víz 9:1 arányú keverékéhez 15,95 g (27 mmól) D részben leírt terméket adunk. Az elegyet keveréssel 0 °C-ra lehűtjük, és cseppenként 30 ml In nátriumhidroxid-oldatot adunk hozzá, két órán át keverjük, amíg a nátriumhidroxid hozzácsepegtetése történik, majd ezután kétszer éteres extrakciót végzünk. Az elkülönített vizes fázist 30 ml In sósavoldattal megsavanyítjuk úgy, hogy a pH 2,5 legyen. A kívánt terméket kristályosodás után szűréssel egyesítjük, majd átkristályosítjuk egyszer metilalkohol-víz elegyből és kétszer etilacetátból. így 11,43 g (az elméleti 85 %-a) terméket kapunk, melynek olvadáspontja 104— 107 °C. [a]2Ds = +31,4° (c = 0.5 MeOH). A C26H33N307 képlet alapján (Ms = 499,54) az analízis számított értékei: C 62.51. H 6.66. N 8.41 %. talált értékei: C 62,31, H 6,83, N 8,12 %. F. N“ -terc-butiloxikarbonil-(Na -metil)-L-fenil-alanin, d-(+)-a-metilbenzilamin só 75 ml tetrahidrofuránhoz 13,26 g (0,05 mól) Naterc-butiloxikarbonil-L-fenilalanint adunk. Az így nyert keveréket cseppenként 30 perc alatt hozzáadjuk 0,15 mól káliumhidridnek és 0,5 g 18-korona-6-éternek mechanikusan kevert szuszpenziójához 0 °C-on, nitrogén atmoszférában. A keveréket ezután egy további órán keresztül keverjük. 15 ml tetrahidrofuránban oldunk 6,23 ml (0,1 mól) metiljodidot, és ezt az oldatot cseppenként 15 perc alatt hozzáadjuk a keverékhez. A keveréket két órán át állni hagyjuk, ezután 10 ml ecetsavnak és 10 ml tetrahidrofuránnak keverékét cseppenként, majd 20 ml etilalkoholt adunk hozzá. A keveréket ezután 400 ml jégbe öntjük. Az így nyert vizes fázis pH értékét 2n nátriumhidroxid-oldattal 12-13-ra állítjuk be. A vizes keveréket éterrel kétszer extraháljuk, majd szilárd citromsav hozzáadásával megsavanyítjuk úgy. hogy a pH 3 legyen. A vizes keveréket ezután éterrel háromszor extraháljuk. Az éteres extraktumokat egyesítjük, vízzel extraháljuk, vízmentes magnéziumszulfát felett szárítjuk, és vákuumban szirup sűrűségűre bepároljuk. A szirupot 50 ml éterben feloldjuk, majd 6,44 ml (0,05 mól) d(+)-o:-metilbenzilamint adunk hozzá. Az így nyert oldatot 350 ml hexánnal felhígítjuk, és ezután az edény falát dörzsöljük,; hogy a kristályosodást megindítsuk. A terméket szűréssel egyesítjük, és így módon 15,83 g (az elméleti 79 %-a) kívánt termé5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
