182790. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 17béta-hidroxi- 5-androsztén-származékok előállítására
182.79C olvad. 400 g Így előállított 3 ;'-/metoxi-metoxi/-5-kolesztént 120 g Teginnel, 10 liter desztillált vízzel éa 40 ml 1 n nátriumhidroxid-oldattal 95 C° hóméra ékleten DR-3-6-6 tipusu Dispax-reaktorban /Jahnke und Kunkel, NSzK/ 30 percen át emulgealunk. Az emulziót ezután 20 percen át.120 0° hőmérsékleten sterilezzük. d/ 50 literes fermentorba 40 liter sterilezett, 2,0 % kukoricalekvárt, 0,3 % diammóniumhidrogénfoszfátot éa 0,25 % Tagat''"'-02-t tartalmazó , 6,5 pH-értékü táptalajt mérünk, két liter fenti Mycobacterium inokulummal beoltjuk és 0,5 m’/óra levegőztetés és 250/perc fordulatszámú keverés mellett 24 órán át 30 C° hőmérsékleten inkubáljuk. Ezután a tenyészethez hozzáadjuk a c/ pontban előállított 3 Wmetoxi-metosfci/^-kolesz-' tén-emulziót es a fermentációt további 120 órán át folytatjuk. A fermentáció befejeztével a tenyészetet háromszor 5-5 liter etilénkloriddal extraháljuk, az etilénkloridős fázist szűrjük és vákuumban bepároljuk. A kapott 156 g maradékot szilikagéloszlopon kromatografáljuk, majd etilacetátból átkrlatályoaltjuk, és Így 86 g 3~-/metoxi-metoxi/-5-androsztén-17-ont kapunk. Op.: 129-132 0°. 2. példa a/ 2 literes Brlenme^er-lombikban 500 ml. az la példában megadott steril táptalajon éa ugyanolyan körülmények között Mycobacterium spec. NRRL-B-3805 törzset tenyésztünk. b/ 10 g szitoszterint az le példában megadottak szerint reagáltatunk, éa igy 11 g 24-etil-3 -metoxi-metoxi-5-kolesztént kapunk. Az acetonbol átkristályositott termék 70-71 C°-on olvad. 10 g igy előállított 24-etil-3'-metoxi-metoxi-5-kolesztént 4 g Tegin/"/-rel és 300 ml vízzel 95 C° lőmérsékleten Ultra-Turrax-keszülékben /Jahnke und Kunkel, KSzK/ 10 percen át emulgeálunk; az emulziót 20 percen át 120 G° hőmérsékleten emulgeáljuk. c/ 20, egyenként 85 ml steril, 2,0 % kukoricalekvárt, 0,3 % diammónium-hidrogénfoazfátot és 0,25 % Tagat/B/-02-t tartalmazó, 6,5 pH-értékü táptalajt a fenti Mycobacterium előten^észet 5-5 ml-ével beoltunk. A tenyészeteket 24 órán át 30 C° hőmérsékleten 220/perc frekvenciával rázatjuk. Ezután minden tenyészethez 14 ml 24-etil-3:*-metoxi-metoxi-5-koleaztén-szuszpenziót adunk, amely 0,5 g vegyületnek felel meg, és a rázatás közben végzett fermentációt 120 órán át, 30 C®—os hőmérsékleten folytatjuk. Az ld példában leírtak szerint feldolgozva a lombikok' tartalmát, 2,1 g 3ß-metoxi-metoxi-5-androszten-17-ont kapunk. Op.: 130-132 C°. B. Példák az andrősztén-17-on-származékok találmány szerinti átalakításának szemléltetésére 3« példa 11 g kálium-terc-bútilátót 100 ml tétrahidrofuránban oldunk, és az oldaton acetiléngázt átvezetve K-acetilid-szuszpenziót készítünk. Ehhez a szuszpenzióhoz 10 0° hőmérsékleten 20 g 33-/metoxi-metoxi/-5-androsztén-17-on /l. példa/ 1Ö0 ml tetrahídrofurános oldatát adjuk, és az elegyet egy órán át ke4
