182665. lajstromszámú szabadalom • Ellenőrzőoldat fotometrikus koagulációvizsgáló készülékek működésének ellenőrzésére
182635 A találmány tárgya ellenőrzőoldat fotometrikus koagulációvizsgáló készülékek működésének ellenőrzésére. A találmány szerinti ellenőrzőoldat feladata, hogy a költséges ellenőrzőoldatok ellenőrzésének módját a vizsgálandó mintától függetlenül el lehessen végezni és az ellenőrzőoldat pontosságát valamint megbízhatóságát növelni lehessen. Egy ilyen ellenőrzőoldat szokásosan jodátot, redukálószert, oxidációs inhibitort pH-pufferanyagot, konzerválóanyagot és indikátort tartalmaz. A koagulációs sebességet növelő reakció sebességét egy pH-pufferanyag hidrogénion koncentrációjának adagolásával, míg a kioltási amplitúdót az indikátorreakció útján határozzuk meg. Mint említettük, a találmány, amelynek tárgya ellenőrzőoldat fotometrikus koagulációvizsgáló készülékek működésének ellenőrzésére, például a koagulációs idő meghatározására szolgál. Ilyen vizsgálatokat a gyógyászatban, ipari és kutatólaboratóriumokban kolloid oldatokkal kapcsolatban végeznek, például vér vagy szerves lakkok vizsgálata céljából. A koagulációs vizsgálatok részére alkalmazott ismert fotometrikus készülékeknél ellenőrző etalonként olyan kolloid ellenőrzőoldatot alkalmaznak, amely a vizsgálandó anyag fajtájának megfelelő. A legtöbb ilyen ellenőrző oldat a koagulációs tényező labilis volta miatt csak korlátozott ideig tárolható. Egyes ellenőrző oldatok például ellenőrző vérplazma, igen költséges kondícionálási eljárást igényel, ennek következtében igen drága. Olyan ellenőrző oldatok létrehozása, amelyek definiált optimális koagulációs idő paraméterrel rendelkeznek, igen nehézkes. A biológiai ellenőrző oldatoknál gyakori jelenség, hogy azok infekcióra hajlamos elemeket tartalmaznak. Találmányunkkal célkitűzésünk, hogy a fotometriás készülékek működésének vizsgálatát koagulációs analízisek céljából a vizsgálandó minta paramétereitől független ellenőrzőoldattól függetlenné tegyük, továbbá hogy az ellenőrzőoldat raktározási képességét és összetételének konzerválását javítsuk, definiált fokozatos koagulációs időket biztosítsunk, amelyek a minőségi ellenőrzés pontosságát és megbízhatóságát jelentősen növeli, a költséges kondícionálási problémákra eddig történt ráfordítások megtakarítását tegyük lehetővé, készenléti, azaz gyorsan felhasználható ellenőrzőoldatot hozzunk létre. Találmányunk útján az a célkitűzésünk, hogy olyan ellenőrzőoldatot hozzunk létre, amely a vizsgálandó minta paramétereitől független, és amely megbízható, kis ráfordítást igénylő koagulációs vizsgálatokat eredményez a fotometriás készülékek működésének ellenőrzésére. Emellett a koagulációs időt tág határok között változtathatóan és beállíthatóan kívánjuk biztosítani, valamint a kioltási amplitúdót és a koagulációs görbe emelkedésének beállíthatóságát is biztosítani kívánjuk. Célkitűzésünk az, hogy a találmány szerinti ellenőrzőoldat igen konstans paraméterekkel, és hogy azt gyorsan valamint egyszerű eszközökkel lehessen alkalmazni. A találmány szerinti ellenőrzőoldat alkotóelemei egy dióda, egy redukálószer, egy oxidációs inhibitor, egy pH-pufferanyag, egv konzerválószer és egy indikátor. 3 A találmány egyik kiviteli alakja szerint redukciós anyagként vagy szulfitot vagy tioszulfátot, oxidációs inhibitorként kelet-képző di- illetve polikarbonsavat, pH-pufferanyagként citrátpuffert, konzerválóanyagként pedig egy kationos detergálóanyagot, indikátorként pedig vagy naftalin-I-sulfonsavat-(-5-azo-l')naftalin-(4'-azo-4")-N-fenil-l"-naftilaminsav-8''-szulfonsavat vagy pedig 4-amino-4'-metoxi-difenilamint alkalmazunk. Citrát pufferanyagként cítromsavoldat és nátrium citrát oldat keveréke alkalmazható. Oxidációs inhibitorként etiléndiamintetraecetsavdinátriumsó és konzerválóanyagként cetiltrimetilammóniumbromidot alkalmazhatunk. Kiviteli példa: Kiviteli példaként véralvadás vizsgálatára szolgáló fotometriás készülék működésének ellenőrzését ismertetjük a találmány szerinti eljárás alapján. E célra ezidáig kizárólag vérplazmát alkalmaztak, amelyeket aktivátorokkal, például tromboplasztinnal és Ca ionokkal, előre meghatározott ideig, azaz a vér alvadásáig, alkalmaztak. A találmány szerinti eljárás alapján vérplazma helyett autokatalitikusan reagálni képes ellenőrző oldatot helyezünk el a mérőkövettában és a reakciós terméktől függő indikációs reakciót fotometrikusan értékeljük. Az ellenőrző oldat hidrogén ion koncentrációjának megválasztásával a reakció sebességét és ezzel a szimulált alvadási sebességet előre meghatározhatjuk. Ugyanígy az indikátor koncentráció megválasztásával i kioltási amplitúdót és az alvadási görbe meredekségét előre meghatározhatjuk. A találmány szerinti eljárás megvalósítására szolgáló ellenőrző oldatot példaként a következőképpen állítjuk össze: 1. Jodát 200 pl káliumjodátoldat 75 m mol l-1 2. Redukálóanyag 50 jR nátriumszulfitoldat 15 m mlo l-1 együtt az 3. Oxidációs inhibitorral etiléndiamintetraecetsavdinátriumsó 2 m mol 1_1 4. Citrátpuffer 86 u.1 cítromsavoldat 100 m mol l“1 14 tjd nátriumcitrátoldat 100 m mol l-1 5. Konzerválóanyag 1 p.1 cetiltrimetilammóniumbromid 20 m mol l”1 6. Indikátor 100 jjlI naftalin-l-szulfonsav-(5-azo-l')-naftalin-(4'azo-4")-fenil-l''-naftalamin-8''-szulfon-sav=0,5 g l-1. A redukálóanyagot, az oxidáló inhibitort, a citrát pufferanyagot, a konzerváló anyagot és az indikátort a n érő küvettába helyezzük az azonos hőmérséklet beá lásig pihentetjük. A reakció indításához káliumjodát o datot adagolunk. Körülbelül 15 sec. pszeudo alvadási időt mérünk. A citrát pufferanyag fentiektől eltérő arányának esetén 3.0 ... 4,6, pH tartománynak megfelelően 8 sec—250 sec pszeudo alvadási idők is realizálhatók. 4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
