182255. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikofenolsav-származékok előállítására
9 182255 10 Szilikagél/C18 fordított fázisú gyanta előállítása 1. lépés : Hidrolízis 1000 g LP—1 szilikagélt (Quantum Corp.) adunk 1650 ml tömény kénsav és 1650 ml tömény salétromsav elegyéhez egy 5 literes gömblombikban és a teljes szuszpenzió kialakulásáig rázzuk. Az elegyet vízfürdőn melegítjük éjszakán át (16 óra hosszat) vízköpenyes kondenzátorral, amely a lombikhoz kapcsolódik. Az elegyet jeges fürdőben lehűtjük és gondosan szűrjük egy zsugorított üvegszűrőt használva. A szilikagélt ionmentesített vízzel mossuk a semleges pH eléréséig. Ezt követően a szilikagélt 4 liter acetonnal mossuk és 2 napig 100 C°-on vákuumban szárítjuk. 2. lépés : Első szililezés Az 1. lépésből származó száraz szilikagélt egy gömblombikba visszük és 3,5 liter toluolban szuszpendáljuk. A lombikot 2 óra hosszat vízfürdőn melegítjük annak érdekében, hogy a vizet azeotrop elegy alakjában el távolítsuk. Ezután 321 ml oktadeciltriklórszilánt (Aldrich Chemical Company) adunk hozzá és a reakcióelegyet éjszakán át (16 óra hosszat) visszafolyatás közben melegítjük körülbelül 60 C°-on lassú mechanikus keverés mellett. Gondosan kell ügyelni arra, hogy a keverő ne kerüljön a lombik fenekének a közelébe. Ezzel elejét vesszük annak, hogy a szilikagél-részecskék elaprózódjanak. Az elegyet lehűlni hagyjuk. A szilánozott szilikagélt összegyűjtjük, 3 liter toluollal és 3 liter acetonnal mossuk és levegőn szárítjuk éjszakán át (16—20 óra hoszszat). A megszárított szilikagélt 3,5 liter (1 : 1 arányú) acetonitril/víz-elegyben szuszpendáljuk egy 5 literes lombikban, utána 2 óra hosszat gondosan keverjük szobahőmérsékleten, majd szűrjük, 3 liter acetonnal mossuk és éjszakán át levegőn szárítjuk. 3. lépés : Második szililezés Az első sziliiezési folyamatot megismételjük, amelyhez 200 ml oktadeciltriklórszilánt használunk. A szuszpenziót 60 C°-on gondos keverés mellett 2 óra hosszat viszszafolyatás közben melegítjük. A végterméket szűréssel elkülönítjük, 3 liter toluollal és 6 liter metanollal mossuk és utána 50 C°-on éjszakán át (16—20 óra hosszat) vákuumban szárítjuk. 5. példa 6. példa Töltetbevitel Michel-Miller oszlopok számára Általános tájékoztatás A) Analitikai vagy preparatív oszlopokat lehet tölteni ilyen módon. B) Szilikagél-töltetek és szilikagél fordított fázisú töltetek (például Quantum LP—1, részecskeméret 10— 20 mikron; LiChroprep RP—8 és RP—18, részecskeméret 25 —40 mikron) ajánlhatók. Más szilikagélek (például Shandons ODS Hypersil, részecskeméret 5 mikron), valamint egyéb típusú gyanták is szerencsésen és sikeresen betölthetők ennél a folyamatnál. C) Általában a nyomás 14 atmoszféra alatt van és 5— 40 ml/perc áramlási sebesség szükséges ennél a töltetes technikánál, amely az oszloptérfogattól és a mérettől függ. A töltetnyomás túlhaladhatja a tényleges elkülönítésnél használt 2—3,5 atmoszféra nyomást, ez nem biztosítja az adszorbens további kompresszióját az elkülönítés folyamán. Fordított fázisú szilikagéllel ily módon töltött oszlopok néhány évig működhetnek a hatásosság vesztesége nélkül. D) A nyomás hirtelen csökkenése repedések és csatornák kialakulását okozhatja a töltet anyagában, amely nagy mértékben csökkenti az oszlop hatásosságát. Éppen ezért fontos az, hogy a nyomásesést lassan nulláig engedjük csökkenni valahányszor a szivattyút lezárjuk. E) Közelítő oszloptérfogatok (Ace Glass Cat. No., nem töltött): 5795—04, 12 ml; 5795—10, 110 ml; 5795—16, 300 ml; 5795—24, 635 ml; és 5796—34, 34 ml. F) Valamely üvegoszlop töltési ideje néhány perctől néhány óráig terjedhet az oszlop méretétől és a szakemberjártasságától függően. Példa 1. Az üvegoszlopot egy tartály-oszlophoz kötjük kapcsolás útján (a tartály-oszlop kétszeres lehet az üvegoszlopnak). Mindkét oszlopot függőleges helyzetbe visszük (tartály-oszlop fölül). 2. Megmérjük a töltet-anyagot (körülbelül 100 g egy 200 ml-es oszlophoz). 3. Körülbelül ötszörös térfogatnyi oldószert adunk a töltőanyaghoz, erre a célra 70—80% metanol—20— 30% víz elegyet használunk. 4. A rázást addig végezzük, ameddig az összes részecske nedvesedik, utána éjszakán át vagy hosszabb ideig állni hagyjuk avégett, hogy a részecskéket teljesen átnedvesítse az oldószer. A felülúszót leöntjük. 5. A gyantát elegendő mennyiségű oldószerrel iszapoljuk fel a tartály-oszlop megtöltése érdekében. Gyorsan a tartályba töltjük. Az oszlopot előre kell tölteni ugyanazzal az oldószerrel és a tartály-oszlopba bevisszük az oldószert a szuszpenzió bevitele előtt. Nagyobb szuszpenziótérfogatok használata is jó eredményeket ad, ez azonban a) nagyobb tartályt vagy b) többszöri tartályba töltést kíván a töltofolyamat során. 6. A tartályt alul lezárjuk egy teflon dugóval (4131 547 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, 3. számú dugó); a szivattyút hozzákapcsoljuk és megindítjuk azonnal az oldószer szivattyúzását maximális áramlási sebességgel (körülbelül 20 ml/perc), ha Ace Cat. No. 13 265—25 szivattyút vagy hasonlót használunk oldószer szállító rendszerként. 7. Ezt a műveletet addig folytatjuk, ameddig az oszlop teljesen megtelik az adszorbenssel. A nyomás nem lépheti túl az oszlop legnagyobb tűrését e művelet során (körülbelül 14 atmoszféra nagy oszlopoknál és 21 atmoszféra analitikai oszlopok esetén). A legtöbb esetben 14 atmoszféra alatti nyomás elegendő. 8. Abban az esetben, ha a nyomás átlépi a legfelső értékeket, csökkentjük az áramlási sebességet és a nyomást. 9. Miután az oszlopot megtöltöttük adszorbenssel, a szivattyút elzárjuk, a nyomásesést nullán hagyjuk és a 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
