182224. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antidepresszív, cisz-4-fenil-1,2,3,4-tetrahidro-1-naftil-amin-származékok előállítására
19 182224 20 C H N Számított 62,79 5,61 3,18 Talált 62,97 5,49 3,11 Kl.E művelet helyett a következő eljárást alkalmazzuk: EJ Célvegyület (cisz-racemát) 4-(3-Trifluor-metil-feniI)-alfa-tetralont (3,0 g, 10 millimol) toluolban (50 ml) oldunk és jeges fürdőben hűtve dimetil-aminnal (3 ml, 45 millimol), majd titán-tetrakloriddal (cseppenkénti hozzáadás, 1,2 ml, 11 millimol) kezeljük. A reakciókeveréket ezután 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük és szűrjük. Vákuumban bepárolva nyers szilárd 3,4-dihidro-l-dimetil-amino-4-aril-naftalint kapunk. A nyers enamint jégecet (5 ml), nátrium-bór-hidrid (1,3 g, 34 millimol) és tetrahidrofurán (50 ml) keverékéhez adjuk és a keveréket 3 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a reakciókeveréket vákuumban bepárolva olajos szilárd anyagot Elemi analízis: kapunk, melyet vízzel (100 ml) kezelünk és éterrel (200 ml) extrahálunk. Az éteres kivonatot szárítjuk (magnézium-szulfát), szűrjük és vákuumban bepároljuk. A képződött olajat szilikagélen kromatografáljuk (0,5% 5 dietil-amin/hexán elegy eluenssel) és így elválasztjuk egymástól a cisz- és a transz-izomert. Először a ciszizomer eluálódik. Az eluált frakciókat vákuumban bepároljuk, többször metanolban oldjuk és vákuumban újra bepároljuk. A kapott olajat (0,99 g) metanolban 10 (15 ml) oldjuk és a metanolos oldatot maleinsavval (0,36 g, 3,1 millimol) kezeljük, a sav oldása céljából melegítjük, majd vákuumban bepároljuk. A félszilárd terméket kristályosítás céljából etil-acetátban oldjuk, majd étert adunk hozzá (0,80 g, 18% kitermelés). 15 23—24o példa A 22. példában leírtak szerint a következő vegyületeket (cisz-racemátok) állítjuk elő a megfelelően szubsztituált benzofenonokból: 20 3 általános képletű vegyület Példa száma X Y Olvadáspont (°C) Molekulaképlet Elemi analízis számított (%) talált (%) C H N C H N 23 H CF3 144—146 C1 <jH20NF 3. C4H4O4 63,44 5,56 3,22 63,57 5,64 3,25 24 H Cl 125—126 C14H20NC1.3/4H2O.HC1 64,39 6,75 4,17 64,25 6,82 4,02 24a Cl Cl 199—202 C18H19NC12.CH3S03H 54,81 5,57 3,36 54,77 5,27 3,53 24b—24c példa A 17. példában leírt módon a következő vegyületeket (cisz-racemátok) és savaddíciós sóikat állítjuk elő 2- -fluor-4-bróm-anizolból, illetve 2-fluor-5-bróm-anizolból : Példa Vegyület 24b Cisz-(IS) (lR)-N-metil-4-(3-fluor-4-metoxi-fenil)-l,2,3,4-tetrahidro-l-naftil-amin 24c Cisz-(IS) (lR)-N-metil-4-(3-metoxi-4-fluor-fenil)-l,2,3,4-tetrahidro-l-naftil-amin 25. példa Szerotonin (5HT), dopamin (DA) és noradrenalin (NA) szinaptikus felvételének gátlása in vitro cisz-(lS)-N-metil-3-(3,4-diklór-feniI)l,2,3,4-tetrahidro-l-naftiI-amín-hidrokloriddal 180—220 g-os Sprague—Daw ley CD patkányokat (Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, Massachusetts) használunk e kísérlethez. Nyers szinaptikus frakciót állítunk elő patkányagy csíkolt testéből (corpus striatum) (5HT- és DA-felvételhez) vagy hipotalamuszszövetből (NA-felvételhez) olyan módon, hogy a szöveteket homogenizáljuk (25 ml per g nedves szövet) jéghideg 0,32 molos szacharózoldatban, amely 1 mg/ml glükózt, 0,1 millimol EDTA-t (etilén-diamin-tetraecetsav) és trisz-puffert [trisz(hidroxi-metil)-amino-metán] (pH 7,4) tartalmaz. A homogenizátumot 1000 xg-vel 10 percig 0—4 °C-on centrifugáljuk, a csapadékot eldobjuk és a felülúszót 20 percig 0—4 "C-on 17 000 xgvel centrifugáljuk. A képződött csapadékot újraszuszpendáljuk annyi jéghideg 0,32 molos szacharózoldatban (pH 7,4), hogy a homogenizálandó szuszpenzió töménysége a corpus striatum esetében 10 ml/g eredeti nedves szövet és a hipotalamusz esetében 5 ml/g eredeti nedves szövet legyen. A következő inkubáló puffert készítjük el: 26 millimol triszpuffer (pH 7,4), amely 124 millimol nátrium-kloridot, 4,5 millimol kálium-kloridot, 1,2 millimol kálium-dihidrogén-foszfátot, 1,3 millimol magnézium-klorid—víz (l/6)-ot, 0,001 millimol aszkorbinsavat, 0,0125 millimol nialamid-hidrokloridot és 2,8 millimol kalcium-kloridot tartalmaz. A szövetszuszpenzió 0,1 ml-es aliquotjait 10 percig 37 °C-on egy olyan oldat 0,02 ml-ével inkubáljuk, amely a megnevezett tesztvegyület ismert mennyiségét és 1,0 ml inkubáló puffert tartalmaz; az inkubáló puffer az említett adalékanyagokon kívül még 1 mg/ml glükózt és 0,0001 millimol izotóppal jelzett monoamint (14C—5HT, l4C—DA vagy 3H—NA) is tartalmaz. Inkubálás után a keveréket 0,45 mikron pórusméretű Millipore szűrőkön átszűrjük és a szűrőket az inkubáló pufferrel átmossuk. A szűrőn maradt anyagokat 1,0 ml 2-metoxi-etanolban oldjuk és radioaktivitásukat folyadékszcintillációs számlálóberendezés segítségével határozzuk meg (a 0 “C-on mért felvételt az eredményből levonjuk). A szinapszisok általi felvételt 5HT, DA, illetve NA per mg fehérje alakjában adjuk meg (a fehérjemeghatározáshoz Folin-féle fenolreagenst használunk). Az IC50 értéket (IC=„inhibiting concentration”), vagyis a megnevezett vegyület azon 35 40 45 50 55 60 65 10
