182153. lajstromszámú szabadalom • Eljárás helyettesített pirazolo [1,5-a]pirimidin-származékok előállítására
182.153 Psychoçharaacologia, 21, 1-7 /197V« A találmány szerint előállítható vegyületek vizsgálatéira e módszer módosított változatát használtuk:. Egyenként 6 Wistar patkányból álló, 200-240 g súlyú kísérleti állatcsoportokat 48 órán át azomjaztattunk es 24 órán át éheztettünk. Â vizsgálati vegyületeket orálisan vagy intraperitoneálisan, 2 %-os keményítő vivőanyagban szuszpendálva, amely 0,5 térfogati poli/etilén-alkohol/-t és egy csepp Polysorbate 80-at tartalmazott, egyszeri vagy többszöri dózisban adagoltuk. A kontroll állatok csak a vivőanyagot kapták. A 50. vagy 60. percben minden patkányt külön-külön plexi-dobozba helyeztünk. A dobosok hátsó részében elhelyezett csapból 10 % dextróz-oldat állt rendelkezésre, korlátlan mennyiségben. A csap és rozsdamentes acél-hálóból készült padozat között 0,3 mA-es egyenáramu sokkoló áramot hoztunk letre. Az állatok számára 20 másodpercen keresztül sokkolás nélkül lehetővé tettük, hogy igyanak, majd váltakozva 5 másodpercig sokkolással kapcsoltuk Össze az ivási lehetőséget, további 5 másodpercig szüneteltettük a sokkolást® Ezt a ciklusos sokkolást 5 teljes percen át folytattuk. Rögzítettük, hogy az 5 perc alatt az egyes állatokat hány sokkolás érte. A kapott eredményt összehasonlítottuk a kontroll csoportban észleltekkel. A vizsgált vegyületeket akkor tekintettük aktivnak, ha a vizsgált vegyületekkel kezelt csoportban a kapott sokkok száma szignifikánsan meghaladta a kontroll csoportban kapott sokkok számat. A találmány szerint előállítható vegyületek két jellegzetes, aktivnak mutatkozott képviselőjét a következő, II. táblázatban tüntetjük fel. II. táblázat Sem-kondiclonált passzív elkerül ési vizsgálat patkányokon A vegyület kémiai neve Eredmény 7-/3*-pirídil/-pirazolo 1,5-a pirimidin-3--karbonitril aktiv 2-etil-7-/3,-piridil/-pirazolo 1,5-a pirimi-din-3-karbonítril aktiv A szorongásoldó hatás vizsgálatára használt harmadik módszer szerint a vizsgálni kívánt vegyületeknek azt a képességét mérik, amellyel triciummal jelzett benzo-diazepineknek az agyspecifikus receptorokhoz történő kötődését gátolni tudják melegvérű állatokban. B.F. Squires és munkatársai, Nature, 266, No. 21, 732 /1977/ és H. Mohler és munkatársai^ Science, 198, 849 /1977/ módszerének egy módosított változatát használtuk. Éoyalhart Farms-rol 15Q-200 g súlyú, him, albino Wistar patkányokat szereztünk be. A 3H-metil-diazepámot /79*9 Ci/mmól/ es 3H-metil-flunitrazepamot /84,3 Ci/mmól/ a New England Nucleartól szereztünk be. A vizsgálni kívánt vegyületeket dimetil-formamidban, ecetsavban, etanolban va;y sósavban oldottuk. A patkányok teljes cortex-jét óvatosan 20 térfogat jéghideg, 0,32 mólos szacharózoldatban homogenizáltuk, kétszer, 1000 g gyorsulással centrifugáltuk 10 percen keresztül, majd a centrifugáidat 20 percen át 30000 g gyorsulással folytattuk, így nyers Pp-synaptosomalis frakciót kaptunk. A Pp-frakciót vagy 1/ ismét szuszpendáltuk az eredeti kétszeresének megfelelő tér-5
