182144. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipikoleszrterémiás hatású vegyületek előállítására fermentációs úton
182.144 majd. az aktiv komponenseket etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist megs zár it Jak, szárazra pároljuk és a maradékot 0,3 ml metanolban oldjuk. A metanolos oldatot a fentiekben ismertetett módon krómatográfáiJuk. A korábban említett eluálószert tartalmazó frakciókat összeöntjük, vizes oldattá koncentráljuk és kloroformmal extraháljuk. A kloroformos oldatot bepároljuk, majd a maradékot metanollal felvesszük és az igy kapott oldatot nitrogénatmoszférában pároljuk be. Szárítás után 3»5 mg terméket kapunk, amely a III képletü hidroxi-savnak bizonyul az azonosítás során. A másodszori kr ómat ogr af álásnál használt oldószert tartalmazó frakciókat is összeöntjük, majd az előzőekben ismertetett módon kloroformmal extraháljuk. Szárítás után 0,87 mg terméket kapunk, amely az I képletü laktónnak bizonyul az azonosítás során. 3. példa Az I és III képletü vegyületek előnyös előállítási módja az MF-4833 tenyésztése utján Liofillzált Aspegillus MF-4833-tenyészetet tartalmazó kémcsövet aszpetikus körülmények között kinyitunk, majd a kémcső tartalmát nem bordázott 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban /oltólombikban/ 40 ml G. tápközegben szuszpendáljuk. Az igy beoltott táptalajt tartalmazó lombikot ezután 48 órán át 28°C-on 220 fordulat/perc sebességű rázógépen /50,8 mm-es féllöket/ inkubáljuk. Ezt követően az oltólombikban kapott tenyészetből 2-2 ml-rel beoltunk két nem bordázott 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban 40-40 ml D. tápközeget. D. tápközeg összetételei laktóz 20 g oldható szeazgyártási maradék 15 g autolizált élesztő 5 S desztillált viz 1000 ml pH 7»0 értékre beállítva nátrium-hidroxiddal Ezt a két beoltott lombikot ezután 96 órán át 28°C-on 150 fordulat/perc sebességű rázógépen /50,8 mm-es féllöket/ inkubáljuk. majd az inkubálást követően pedig tartalmukat a 2. példa B részében ismertetett módon extrahálásnak vetjük alá. Ezekben a lombikokban az össztermelés 1450 - 2000 egység/ml. 4. példa Az I és a III képletü vegyület előállítása Liofillzált Aspergillus MF-4845 tenyészetet tartalmazó kémcsövet aszpetikus körülmények között kinyitunk, majd a kémcső tartalmát nem bordázott 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban /a továbbiakban 1. számú oltólombiknak fogjuk nevezni/ 40 ml C. tápközegben szuszpendáljuk. A beoltott lombikot ezután 24-48 6- rán át 28°C-on 220 fordulat/perc sebességű rázógépen /50,8 mmes féllöket/ inkubáljuk. Az ekkor kapott tenyészetből egy adagot /közel 0,5 ml/ használunk ezután ferde csőbe töltött E. táptalaj beoltására. 10
