182144. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipikoleszrterémiás hatású vegyületek előállítására fermentációs úton
182.144 /4,6 mm . 25 cm/ 6 ml/perc sebességgel nyomott, 10 % izopropanolt tartalmazó hexánnal végzett nagynyomása folyadékkromatográfiás vizsgálat szerint a kapott csapadék az előállítani kívánt ’etilészter és a kiindulási I képletü vegyület 77 : 25 súlyaránya keveréke. Ezt a keveréket ezután komponenseire szeparáljuk 250 - 400 mesh szemcseméretü szilikagélen végrehajtott közepes nyomású krómatográfáiássál, eluálószerként 5 % etanolt tartalmazó metilén-kioridőt használva. Az észtert tartalmazó" frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk, 558^g /66 %/ mennyiségben 67°C olvadáspontu szürkésfehér csapadékot kapva. Ennek egy részét átkristályositva hexánból 66,5 - 68,500 olvadáspontu fehér tükristályokat kapunk. Elemzési eredmények a G26IÍ42°6 lc®P-1-e'b alaPÔaaî számított: 0% = 69,50, H% = 9/0; talált: 0% = 69,22, H% = 9,58. 15. példa A II.. és a IV képletü vegyület előállítása A. Fermentálás Liofilizált MF-4845-tenyészetet tartalmazó^kémcsövet aszeptikus körülmények között kinyitunk, majd a kémcső tartalmát nem bordázott 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban /oltólombikban/ 10 ml olyan tápközegben szuszpendáljuk, amelynek összetétele a követ kező: kukoricalekvár 5 S paradicsompüré 40 g zabliszt 10 g glükóz 10 g nyomelem-oldat 10 g desztillált viz 1000 ml pH 6,8 értékre beállítva nátrium-hidroxiddal A nyomelem-oldat összetétele: vas/II/-szulfát-heptahidrát 1000 mg mangán/II/-szulfát-tetrahidrát 1000 mg réz/II/-klorid-dihidrát 25 mg kalcium-klorid-dihidrát 100 mg bórsav 46 mg /IHIa./6Mo7024 . 4 H20 19 mg cink-szulfát-heptahidrát 200 mg desztillált ionmentes viz 1000 ml A beoltott lombikot ezután 24 órán át 28°C-on 220 fordulat/perc sebességű rázógépen /50,8 mrn-es féllöket/ inkubáljuk. Az igy kapott tenyészetből 10 ml-rel beoltunk nem bordázott 2 literes Erlenmeyer-lombikban 500 ml táptalajt7 majd ezután 24 órán át 28°C-on az említett sebességgel rázatast végzünk. Ezt követően rozsdamentes acélból készült 800 literes fermentorba betáplálunk 485 liter olyan vizes tápközeget, amelynek összetétele a következő: keményitőcukor 4,5 vegyes% peptonizált tej 2,5 vegyes% autolizált élesztő 0,25 vegyes% 2000-es molekulasulyu poliglikol 0,25 vegyes% 18
