182144. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipikoleszrterémiás hatású vegyületek előállítására fermentációs úton
181144 2000-63 molekulasúly u poliglikol 2,5 ml desztillált viz 1000 ml pH 7,0 értékre beállítva nátriiun-hidroxiddal Ezt a beoltott lomblkot ezután 120 órán át 28°G-c?n 220 fordulat/perc sebességű rázógépen /50,8 mm-es féllöket/ inkubáljuk, majd az lnkubalás befejezését követően a lombik tartal*mát a 2. példa B. részében ismertetett extrahálás 1 műveletnek vetjük alá. Ebben a lombikban az össztermelés 21500 egység/ml. —— 6. példa A. Az ME—4-853 törzs nagyüzemi tenyésztése az I és a III képletü vegyület előállítása céljából A fermentálás mindegyik művelete során a következő összegtételű tápközeget használjuk: kukoricalekvár 5 g paradicsompüré 40 g zabliszt 10 g glükóz 10 g nyomélem-oldat 10 ml desztillált viz 1000 ml pH 6,8 értékre nátrlum-hidroxiddal beállítva A nyomelem-oldat összetétele a következő: vas/II/-szulfát-heptahidrát 1 g mangán/II/-szulfát-tetrahidrát 1 g réz/II/-klorid-dihidrát 25 mg kalcium-klorid 100 mg Mikroorganizmussal való beoltásukat megelőzően mindegyik táptalajt ellenőrizzük a sterilitás szempontjából. Nem bordázott 250 ml-es Erlenmeyer-lombikba bemérünk 4-0 ml tápközeget és hozzáadjuk a tápközeghez liofilizált ME-4833- -tenyeszetet tartalmazó kémcső tartalmát. A lombikot ezután 280C-on 24- órán át 220 fordulat/perc sebességű rázógépen rázatjuk, majd tartalmából 1-1 ml-rel beoltunk uj lombikokban 40- 40 ml tápközeget és ezeket a lombikokat további 24 órán át 28 C-on és az említett sebességgel rázatjuk. Ezután 2 literes lombikban 400 ml táp közeghez hozzáadunk a második inkub álásnál kapott tenyészetből 10 ml-t és ezt követően ezt a lombikot is 24 órán át 28°C-on rázatjuk. Rozsdamentes acélból készült 800 literes fermentorba be-« táplálunk 501 litert olyan vizes tápközegből, amelynek összetétele a következő: laktóz 2 vegyes% oldható szeszgyártási maradék 1,5 vegyes% . autolizált élesztő 0,5 vegyes% 2000-es molekulasulyu poliglikol 0,25 vegyes%, és amelynek a pH-ja 7»0 értékre be van állítva. A tápközeget ezután 15 percen at 121°C-on sterilizáljuk,' majd hozzáadunk a fentebb említett harmadik fermentálásnál kapott tenyészetből bórsav 56 mg 19 mg 200 mg 1000 ml