182067. lajstromszámú szabadalom • Eljárás LH-RH és LH-RH analógok előállítására
182 067 juk és a maradékot etil-acetáttal eldörzsöljük és leszivatássa}. a zűrjük, majd a szűrőn maradt terméket etil-acetáttal moaauk é$ megazár itjak. Ily módon 18,7 g terméket kapunk. A fenti módon kapott terméket acetáttá történő átalakítás céljából 50 ml viz éa 5 ml ecetsav elegyében oldjak, majd 230 ml acetát-alakban levő Dowex 1x2 gyantán krómatografáljuk. Viz-*: zel eluálunk, a kívánt terméket tartalmazó eluátum-frakciókat egyesítjük és fagyasztva szántjuk. Ily módon körülbelül 15,0 à JD-Ser/BuV°jLH-BH-/l-9/~nonapeptid-etilamidot kapunk, £^723 = —40° /o = 1, metanolban/• ---------- — - — -------------------—-~. A kapott termék további tisztítása a 3. példában leirt módon történik; a tiszta termék hozama körülbelül 9,5 - 11 6* 8. példa /D-Ser/BuV^LH -RH“/l-9/-nonapeptid-etilamid szintézise (Glu-Hls-/Dnp/-OH felhasználásával, a II. táblázatban megadott összehasonlítási kapcsolási módszerekkel ___példában leírtakkal azonos módon dolgozunk, azzal akülönbséggel, hogy 4,07 g HOObt helyett 3,4 g HOBt-t 4,5 g HCNB-t, illetve 2,9 g HONSu-t használunk. 9. példa _ lD-Ser/BuV^/LH-RH-/l-9/-nonapeptid-etilamid szintézise ÍGlu-Hfs-GH felhasználásával, a II. táblázat szerinti különböző kapcsolási módszerekkel 532 mg H-Trp-Ser-Tyr-D-Ser/BuV-Leu-Arg-Pro-NH-C2H5 . .-2HG1 és 150 mg -iGlu-His-OH . HP0 3 ml dimetil-aoetárnidaal készített oldatához, 0,065 ml N-etll-morfolin és 68’mg HOBt /illetőleg 81 mg HOOBt, 90 mg HQNB vagy 57 mg HONSu/ hozzáadása lés az elegy 0 °0 hőmérsékletre történő lehűtése után 110 mg diciklohexil-karbodiimidet adunk és az elegyet 0 °0 hőmérsékleten 1 óra.hosszat, majd szobahőmérsékleten éjjelen át keverjük. A reakcióelegy feldolgozása és a kapott nyers termék tisztítása a 3. példában leirt módon történik. így 104 - 207 mg tiszta terméket kapunk. Hllu-His-Tr p-S er-Tyr-D-Ly s/Boc/-Le u-A r g-Pro-Gly-NH2~diacetát 590 mg /0,5 mmól/ H-Trp-Ser~Tyr~D-Lys/Boc/-Leu-Arg-Pro-Gly-NHp.2 HOl-t, 220 mg /0,5 mmól/ t01u-His/Dnp/-0H.0,5 Hp0-t és 81,5 jng_ /0,5 mmól/ H00bt-t feloldunk 5 ml dimetil-acetamidban és 0.065 ml N-etil-morfolint és 110 mg DCC-t adunk hozzá. A reakcioelegyet 1 órán keresztül 0 °C hőmérsékleten, majd egy 'éjszakán kerjesjstül szobahőmérsékleten kevertetjük. A_ kivaló csapadékot leszűrjük, és' dimétll-ácetámiddal“ mossuk'. A szűr létet 0,5 ml 2-merkapto-etanóllal és annyi trietil-aminnal elegyítjük, hogy az oldat kifejezett lúgos reakciót adjon /pH=8-9/. A reakcióelegyet egy éjszakán keresztül állni hagyjuk, majd má|pap a peptidet ecetészterrel kicsapjuk és az 5» példában leir-| takkal analóg módon feldolgozzuk és a 3« példában leírtakkal a-spalóg módon tisztítjuk. Kitermelés 310 mg, forgatóképesség: fix]-41° /c = 1, dimet il-acetamidban/. 8
