182067. lajstromszámú szabadalom • Eljárás LH-RH és LH-RH analógok előállítására

182.067- ■ ; -jFí~RlI—£i s íníj éz ia a e 1 kapcsolatban különböző karboxil- kőalj -one na otchől való kiindulással és különböző kondenzációs módszerek a 1 r..a 1 ma zásával végzett Összehasonlító kísérleteink erecláményeib az alább következő I. táblázatban foglaltuk össze; e kísérletek során az egyes termékek jjD-*His2Jf_.XjH-'RH-t art almát nagynyomású folyadék-kromatográfiai módszerrel határoztuk meg.

Az I. táblázat adatai azt mutatják, hogy kizárólag a DCC-HOObt módszer és Nim-Dnp-védelem alkalmazása esetén lehet a racemizálódás mértékét 2 % D-hisztidin alá visszaszorítani.

Ugyanezt az eredményt kapjuk az LH-RH-analógok egyikéinek szintézise során is, amint ezt az alább következő II. táblázat adatai mutatják.

Az I. táblázat tartalma:

Racemizálódási kísérletek az LH-RII-sz intéz is során

A kísérletekben az alább következő 3-5* példában megadottakhoz hasonló szintézis-körülményeket; alkalmaztunk.

A nagynyomású £olyadék-krómatográfiát egy 0,á . 25 cm méretű, LiChrosorb Si 60 kereskedelmi elnevezésű, a Merck cég által gyártott, 60 K átlagos pórus-átmérőjű szilikagél adszor-4 bonssel töltött oszlopon végeztük; eluálószerként 310 tf. rész kloroform, 190 tf. rész metanol, Iá tf. rész viz,

3,1 tf. rész trietil-amin és 1 tf. rész hangyasav elegyét alkalmaztuk; az eluálási sebesség 1 ml/perc volt.

Rt /LH-RH/ = körülbelül lá,0 - Iá,5 perc

Rt //D-H1s2J LH-RH/ = körülbelül 17,5 - 18 perc

Kar b ox i1-kompone n s

I. táblázat Módszer

% jD-His^J LH-RH -----t-Glu-His-OH

DCC/HOBt

23

n

DCC/HONB

15

ti

DCC/IIONS u

15

ti

DCC/IIOObt

12

lGlu-His/Tos/-OH

DCC/IIONS u

9

ti

DCC/IIOObt

5

lGlu-His/Dnp/-OH

DCC/HOBt

25

II

DCC/HONB

7

Tf

DCC/IIONS u

6

II

DCC/IIOObt

1

1-2

A II. táblázat tartalma:

Racemizálódási kísérletek a £í)-Ser/BuVp7LH-RH-/l-9/-nonapeptid-etilamid szintézise során

_____A kísérletekben a 6. és 7* példában.megadottakhoz..has.on-10 szintézis-körülményeket alkalmaztunk.

A nagynyomású f olyadék-kr ómat ográf iát egy 0,á . 25 cm méretű, LiChrosorb Sí 60 kereskedelmi elnevezésű, a Merck cég által gyártott, 60 2 átlagos porus-átmérőjü szilikagél ad3zorbenssel töltött oszlopon végeztük; eluálószerként álO tf. rész acetonitril, 29 tf. rész metanol, 29 tf. rész viz, 20 tf. rész kloroform, 3,7 tf. rész trietil-amin és 1 tf. rész hangyasav ,elegyét alkalmaztuk. Eluálási sebesség: 2 ml/perc.

4