181973. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3''-helyzetben acilezett makrolid antibiotikumok előállítására
19 181973 20 ridet, és 3 napig 100 °C-on reagáltatjuk. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot 20 ml kloroformban feloldjuk. Hozzáadunk 10 ml vizet, a pH-t 1 n sósavoldattal 2-re állítjuk, és az elválasztott kloroformos réteget vízzel és telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A maradékhoz 50 ml ammóniával telített metanolt adunk, éjszakán át állni hagyjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékot 50 ml metanolban oldjuk, éjszakán át visszafolyatás közben forraljuk, és vákuumban szárazra pároljuk. Az így kapott maradékot szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (6:1) eleggyel eluálva kromatografáljuk. A 0,58 RfA-értékű eluátumokat vákuumban bepárolva 225 mg terméket kapunk. RfA=0,58; RfB=0,17. A tömegspektrum adatai (m/e): 855 (M+), 796 (M+- 59), 768 (M+-87). A fenti 2'-acetil-leukomicin A5-öt az 53—7434 sz. közzétett japán szabadalmi leírásban leírt eljárással állítottuk elő. 6. példa 4"-Acetil-3"-izovaleril-leukomicin U: 2 g 2'-acetil-leukomicin A3-t feloldunk 20 ml vízmentes diklór-metánban, hozzáadunk 0,43 ml vízmentes piridint és 896 mg p-nitro-benzoil-kloridot, és 3 napig szobahőmérsékleten reagáltatjuk. A reakcióelegyhez 10 ml vizet adunk, a pH-t 1 n sósavoldattal 2-re állítjuk, a vizes réteget elválasztjuk, a diklór-metános réteget sorjában vízzel, telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és vízzel mossuk. Nátrium-szulfáttal való szárítás után az oldatot szárazra párolva 2'-aceti)-9-(p-nitro-benzoil)-Ieukomicin A3-t kapunk. Ezt feloldjuk 20 ml vízmentes piridinben, hozzáadunk 2,5 ml ecetsavanhidridet, és 3 napig 100 °C-on reagáltatjuk. A reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, hozzáadunk 20 ml kloroformot és 20 ml vizet, a vizes réteg pH-ját 2-re állítjuk, és a vizes réteget elválasztjuk. A kloroformos rétegei vízzel és telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, és vákuumban szárazra pároljuk. A mara dékot 50 ml ammóniával telített metanolban oldjuk, szó bahőmérsékleten 3 napig állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk. Az így kapott maradékot feloldjuk 50 ml metanolban, 20 órán át visszafolyatás közben for raljuk, és vákuumban bepároljuk. A maradékot szilika - géllel töltött oszlopon benzol : aceton (7 : 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk, és a 0,60 RfA-értékű frakciókat egyesítjük, és vákuumban szárazra párolva 190 mg terméket kapunk. RfA=0,60; RfB=0,16. Tömegspektrum adatok (m/e): 896 (M+), 810 (M+- 59), 768 (M+-101). 7. példa 9,4''-Diacetil-3 ''-butiril-leukomicin V: A 3. példa szerint kapott 5 g 9,18,2'-triacetil-3,18-0- -ciklo-leukomicin A5-öt feloldunk 30 ml vízmentes pir;dinben, hozzáadunk 15 ml ecetsavanhidridet, és 100 °C-on 39 órát reagáltatjuk. A reakcióelegyet 500 ml vízbe öntjük, amely ammónium-hidroxidot tartalmaz (pH 9,5), vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra párolva 5,05 g port kapunk, amely fő komponensként 9,18,2',4"-tetraacetil-3"-butiril-3,18-0- -ciklo-leukomicin V-t tartalmaz. RfB=0,73; Rfc=0,50. Tömegspektrum adatok (m/e): 939 (M+), 880 (M+- 59), 852 (M+-87). Ezt a port feloldjuk 150 ml etanolban, hozzáadunk 11,5 ml 5%-os vizes nátrium-karbonát oldatot, 45 órán át szobahőmérsékleten és 12 órán át 70 °C-on hagyjuk állni. Az etanolt csökkentett nyomáson eldesztilláljuk, és a maradékot feloldjuk 150 ml kloroformban, az oldatot kétszer mossuk 100 ml vízzel, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, és vákuumban bepárolva 4,73 g port kapunk. A port 50 ml metanolban oldjuk, 17 órán át visszafolyatás közben forraljuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (10 : 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk, és a 0,66 RfA-értékű frakciókat egyesítjük, és vákuumban bepárolva 2,12 g terméket kapunk. RfA= 0,66; RfB=0,28. Tömegspektrum adatok (m/e): 855 (M+), 796 (M+- 59), 768 (M+-87). A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDC13, 100 MHz): 1,44 (3"-CH3); 2,02 (9-OAc); 2,15 (4"-OAc); 9,90 (CHO) ppm. 8. példa 4"-Acetil-3"-butiril-leukomicin V: A 3. példa szerinti eljárásban kiindulási anyagként leukomicin A3 helyett 9-(klór-acetil)-leukomicin As-öl használva 18,2'-diacetil-9-(klór-acetil)-3,18-0-ciklo-leukomicin A5-öt kapunk. Kitermelés: 74%. RfA=0,78; RfB=0,50; Rfc=0,22. A magmágneses rezonanciaspektrum adatai (CDCI3, 100 MHz): 2,07 (3H, 2'-OAc) ; 2,12 (3H, 18-OAc); 4,31 (2H, 9-COCH2CI2) ppm. 5 g fenti anyagot feloldunk 15 ml ecetsavanhidridben, hozzáadunk 3,5 g kálium-karbonátot, 26 órán át 90 °C-on és 6 órán át 100 °C-on reagáltatjuk. A reakcióelegyet 200 ml vízbe öntjük, a pH-t vizes ammónium-hidroxid oldattal pH 9,5-re állítjuk, és kétszer extraháljuk 200 ml kloroformmal. Az extraktumot vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, és vákuumban szárazra pároljuk, így 5,07 g port kapunk. A port szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (16 : 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk. A 0,72 RfB-értékű eluátumokat egyesítjük, és vákuumban bepároljuk, így 2,47 g 18,2',4"-triacetil-3"-butiril-9-(klór-acetil)-3,18-0- -ciklo-leukomicin V-t kapunk (RfB=0,72; Rfc=0,47). Ezt feloldjuk 60 ml ammóniával telített metanolban, 17 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni, majd vákuumban szárazra pároljuk. A maradékot 60 ml metanolban feloldjuk, és 20 órán át visszafolyatás közben forraljuk. A reakcióelegyet vákuumban szárazra pároljuk, és szilikagéllel töltött oszlopon benzol : aceton (4: 1) eleggyel eluálva kromatografáljuk. A 0,45 RfA- értékű frakciókat egyesítjük, és vákuumban szárazra pároljuk. így 1,72 g terméket kapunk. RfA=0,45; RfB= 0,10. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
