181539. lajstromszámú szabadalom • Reagens lipázmeghatározáshoz és eljárás ennek előállítására
7 181539 8 vagy 30 'C-on vízzel vagy levegővel szemben méijük fotometriásan. A percenkénti extinkciókülönbségből határozzuk meg a lipázaktivitást. A Coulter-részecskeméret számlálóval meghatározott cseppnagyság eloszlást rekonstitúció után frissen készített állapotban és száraz állapotban 35 °C-on 3 hetes hőterhelés után az 1. ábrán láthatjuk. 3. példa 8.41 g borjú szérumalbumint, 12,2 g nátrium-dezoxikolátot, 0,02 g nátrium-azidot és 0,034 g kolipázt feloldunk 100 ml desztillált vízben. Ebbe az oldatba keverés közben nyomás alatt befecskendezzük 3,5 g triolein 7 ml propanollal készült oldatát. Az így létrejött emulziót - 40 °C-on megfagyasztjuk, és liofilizáljuk. 17.4 g mannitot, 4 g szilárd polietilénglikolt, 7 g karbamidot, 7,47 g nátrium-dezoxikolátot, 0,82 g nátrium-kloridot, 0£ g nátrium-azidot, 2,71 g TRIS-t és 0,4 g TRIS-hidrokloridot megőrlünk, és bensőségesen összekeverünk egymással. Ehhez hozzáadjuk a felaprított szárazemulziót, és homogénné keverjük. 90 mg ilyen poralakú reagenst adunk 2 ml desztillált vízhez, és az oldódás után 100 pl mintával (szérum) elegyítjük. A reakciót 340 (365) nm-nél (higanygőzlámpa, Hg) fotometriásan kővetjük. 4. példa 8.41 galanint, 1,22 g nátrium-dezoxikolátot, 0,02 g nátrium-azidot és 0,034 g kolipázt feloldunk 100 ml desztillált vízben. Keverés közben 3,5 g triolein 7 ml propanollal készült oldatát fecskendezzük bele nyomás alatt ebbe az oldatba. Az így létrejövő emulziót -40 °C-on megfagyasztjuk, és liofilizáljuk. 17.4 g mannitot, 4 g szilárd polietilénglikolt, 7 g karbamidot, 7,47 g nátrium-dezoxi-kolátot, 0,82 g nátrium-kloridot, 0,2 g nátrium-azidot, 2,71 g TRIS-t és 0,4 g TRIS-hidrokloridot megőrlünk, és egymással bensőségesen összekeverünk. Ehhez hozzáadjuk a felapritott szárazemulziót, és homogénné keverjük. 90 mg ilyen poralakú reagenst adunk 2 ml desztillált vízhez, és az oldás után 100 pl mintával (szérum) elegyítjük. A reakciót 340 (365) nm-nél (Hg) fotometriásan követjük. 5. példa 4,205 g 4000 molekulasúlyú polietilénglikolt, 4,205 g borjú szérumalbumint, 1,22 g nátrium-dezoxikolátot, 0,02 g nátrium-azidot és 0,034 g kolipázt feloldunk 100 ml desztillált vízben. Ebbe az oldatba keverés közben nyomás alatt befecskendezzük 3,5 g triolein 7 ml propanollal készült oldatát. Az így keletkezett emulziót -40 °C-on megfagy asztjuk, és liofilizáljuk. 17,4 g mannitot, 4 g molekulasúlyú polietilénglikolt, 7 g karbamidot, 7,47 g nátrium-dezoxikolátot, 0,82 g nátriumkloridot, 0,2 g nátrium-azidot, 2,71 g TRIS-t és 0,4 g TRIS- hidrokloridot megőrlünk, és bensőségesen összekeverjük. Ehhez hozzáadjuk a felaprított szárazemulziót, és homogénre összekeverjük. 90 mg ilyen poralakú reagenst adunk 2 ml desztillált vízhez, és oldódás után 100 pl mintával (szérum) elegyítjük. A reakciót 340 (365) nm-nél (Hg) fotometriásan követjük. 6. példa 6,73 g polietilénglikolt (Polywachs 4000), 1,68 g polivinilpirrolidont, 1,22 g nátrium-dezoxikolátot, 0,02 g nátriumazidot és 0,034 g kolipázt feloldunk 100 ml desztillált vízben. Ebbe az oldatba keverés közben nyomás alatt befecskendezzük 3,5 g triolein 7 ml propanollal készült oldatát. Az így létrejött emulziót -40 "C-on megfagyasztjuk, és liofilizáljuk. 17,4 g mannitot, 4 g polietilénglikolt, 7 g karbamidot, 7,47 g nátrium-dezoxikolátot, 0,82 g nátrium-kloridot, 0,2 g nátrium-azidot, 2,71 g TRIS-t és 0,4 g TRIS-hidrokloridot megőrlünk, és bensőségesen összekeverünk. Ehhez hozzáadjuk a felaprított szárazemulziót, és homogénre keverjük. 90 mg ilyen poralakú reagenst adunk 2 ml desztillált vízhez, és oldódás után 100 pl mintával (szérum) elegyítjük. A reakciót 340 (365) nm-nél (Hg) fotometriásan követjük. 7. példa (összehasonlítási példa; túl kevés epesavsó) 4,69 g mannitot, 4,69 g polietilénglikolt (Polywachs 4000), 0,38 g nátrium-dezoxikolátot, 0,02 g nátrium-azidot és 0,034 g kolipázt 100 ml desztillált vízben oldunk. Ebbe az oldatba keverés közben nyomás alatt befecskendezzük 3,5 g triolein 7 ml propanollal készült oldatát. Az így keletkezett emulziót -40 °C-on megfagyasztjuk, és liofilizáljuk. 17,4 g mannitot, 4 g 4000 molekulasúlyú polietilénglikolt, 7 g karbamidot, 7,47 g nátrium-dezoxikolátot, 0,82 g nátrium-kloridot, 0,2 g nátrium-azidot, 2,71 g TRIS-t és 0,4 g TRIS-hidrokloridot megőrlünk, és bensőségesen összekeverünk egymással. Ehhez hozzáadjuk a felaprított szárazemulziót, és homogénre összekeverjük. 90 mg ilyen poralakú reagenst adunk 2 ml desztillált vízhez, és az oldás után 100 pl mintával (szérum) elegyítjük. A reakciót 340 (365) nm-nél (Hg) fotometriásan követjük. A cseppnagyság eloszlását hőterheléssel és anélkül (lásd 2. példa) a 2. ábrán láthatjuk. 8. példa (összehasonlítási példa) 3,76 g mannitot, 5,63 g 4000 molekulasúlyú polietilénglikolt, 0,19 nátrium-dezoxikolátot, 0,02 g nátrium-azidot és 0,034 g kolipázt oldunk 100 ml desztillált vízben. Ebbe az oldatba keverés közben nyomás alatt befecskendezzük 3,5 g triolein 7 ml propanollal készült oldatát. Az így keletkező emulziót -40 °C-on megfagyasztjuk, és liofilizáljuk. 17,4 g mannitot, 4 g 4000 molekulasúlyú polietilénglikolt, 7 g karbamidot, 7,47 g nátrium-dezoxikolátot, 0,82 g nátrium-kloridot, 0,2 g nátrium-azidot, 2,71 g TRIS-t és 0,4 g TRIS-hidrokloridot megőrlünk, és bensőségesen összekeverünk. Ehhez hozzáadjuk a felapritott szárazemulziót, és homogénre keverjük. 90 mg ilyen poralakú reagenst adunk 2 ml desztillált vízhez, és oldódás után 100 pl mintával (szérum) elegyítjük. A reakciót 340 (365) nm-nél (Hg) fotometriásan követjük. A cseppnagyság eloszlását hőterheléssel és anélkül (lásd 2. példa) a 3. ábrán láthatjuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
