181535. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új analógjainak előállítására
15 181535 16 2c. referenciapélda N,N'-bisz-(Benziloxi-karbonil)-6'-acetoxi-spektinomicin-3'-metilenoléter előállítása (M reakcióvázlat) 101,3 mg (0,136 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-3'-0-metil-4'-(R)-6'-diacetoxi-3'-(S)-dihidro-spektinoinicin 5,5 ml acetonitrillel készült oldatát 350 mg kálium-hidrogén-karbonáttal szobahőmérsékleten 6 napon át keverjük, majd a reakcióelegyet Celite márkanevű szűrőanyagon átszűijük és a kiszűrt hidrogén-karbonátot további mennyiségű acetonitrillel mossuk. A szűrlet bepárlásakor 80,5 mg mennyiségben a cím szerinti vegyűletet kapjuk. PMR (Da-aceton): 5 7,4 (s), 5,1 (s), 4,8 (s), 4,75 (s), 4,6—4 (m), 3,9 (s), 3,5 (s) és 2,0 (s). CMR(D6-aceton):8 171,1,158,0, 154,2,138,2,129,2, 128,5, 95.7, 95,5, 89,3, 75,3, 71,7, 67,4, 66,9, 66,5, 66,2, 61,08, 60.7, 57,8, 55,6, 30,8 és 20,75 p. p. m. Tömegspektrum a tri-TMS-származékra [m/e]: 888 (NT ) és . 873 (M—15). 3. referenciapélda N,N'-bisz-(Benziloxi-karbonil)-5'-demetil-spektinomicin előállítása (N reakcióvázlat) 20 ml acetonitrilben feloldunk 1,32 g (1,92 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-5-demetil-3'-0-acetil-4'-R-acetoxi-3’-(R)-diliidro-spektinoimcint, majd az így kapott oldathoz 1,0 g (7,24 millimól) vízmentes kálium-karbonátot adunk. Szobahőmérsékleten 20 órán át tartó keverés után a reakcióelegyet szűrjük, majd a kiszűrt csapadékot még 20 ml acetonitrillel mossuk. Az oldószer nyomait ezután vákuumban eltávolítjuk, majd a csapadékot 50 ml metanolban oldjuk és a kapott oldathoz 1,4 g (8,04 millimól) kálium-hidrogén-foszfátot adunk. Az így kapott keveréket szobahőmérsékleten 22 órán át keverjük, majd szűrjük és a szilárd maradékot metanollal alaposan átmossuk. Az oldószer vákuumban végzett eltávolítása után gyantás narancsszínű csapadékot kapunk. 40 g szilikagélen etil-acetáttal végzett gyors átszúrás eredményeképpen 950 mg mennyiségben fehér csapadék kapható. 2000 p-os szilikagél-lemezeken etil-acetáttal mint futtatószerrel végzett preparatív vékonyréteg-kromatográfiás tisztítás eredményeképpen a tiszta cím szerinti vegyüld különíthető el. IR-spektrum (CHC13): 3600, 3100, 1748, 1695, 1443, 1333, 1156,1111 és 700 cm4. PMR (CDCI3): ö 7,40 (s, 10, aromás), 5,13 (s, 4), 3,1—5,0 (m), 3,05 és 2,95 (s's, 6, NCH3). CMR (D„-aceton): 5 201,5,157,1,156,8,137,5, 128,5,128,2, 127,8, 97,7, 92,4, 74,4, 74,1, 66,6, 65,8, 65,0, 60,8, 56,7, 38,2 és 30,8. 3a. referenciapélda N,N-bisz-(Benziloxi-karbonil)-6'-hidroxi-spektinomicin előállítása (O reakcióvázlat) 25 mg (0,04 millimól) N,N-bisz-(benziloxi-karbonil)-6'-acetoxi-spektinomicin-3'-metilenoléter 0,65 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához 0,5 ml 4 n vizes sósavoldatot adunk, majd az így kapott reakcióelegyet 28 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet 25 ml kloroformmal hígítjuk, majd 4 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, ezután pedig 4 ml vízzel mossuk. A szerves fázist ezt kővetően elválasztjuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk, szűrjük és bepároljuk, 22 mg mennyiségben a cím szerinti vegyűletet kapva. PMR (CDC13): 5 7,25 (s), 5,1 (s), 4,75 (s), 4,5—3,5 (m) és 3,0 (s). CMR(CDC13):S 157,5,156,5,136,3,128,5,127,8,96,8,91,0, 7%0,74,3,74,0,72,1,67,6,67,5,65,8,65,2,64,4,61,7,57,1, 39,0 és 29,7 p. p. m. 3b. referenciapélda N,N-bisz-(Benziloxi-karboml}-6'-hidroxi-spektinomicm előállítása (P reakcióvázlat) 90 mg (0,143 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-6'-hidroxi-spektinomicin-3'-metilenoléter 2,2 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához 1,6 ml 4 n vizes sósavoldatot adunk, majd az így kapott reakcióelegyet szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük és ezután a 3a. referenciapéldában ismertetett módon feldolgozzuk. A kapott cím szerinti vegyüld vékonyréteg-kromatográfiásan ugyanúgy viselkedik, illetve ugyanolyanok a tulajdonságai, mint a 3a. referenciapélda szerinti terméké. A két termékd kombináljuk, majd szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, etil-acetát és kloroform 1:1 arányú elegyével eluálva-3c. referenciapélda N,N'-bisz-(Benziloxi-karbonil)-2'-0-acetil- 4',5'-didehidro-spektinomicin előállítása (Q reakcióvázlat) Desztillálófejjel ellátott lombikban 14,58 g (146 milliekvivalens) vízmentes kálium-hidrogén-karbonát és 384 ml acetonitril keverékét addig hevítjük, míg 40 ml oldószer ledesztillál. Ezután a visszamaradó szuszpenziót nitrogénatmoszférában szobahőmérsékletre hűtjük, majd a 2a. referenciapélda szerint előállított hemiketál-triacetátot hozzáadjuk. Az így kapott reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten 41 órán át keverjük. Ekkor az 5% metanolt tartalmazó kloroformmal mint futtatószerrel elvégzett vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat tanúsága szerint a kiindulási anyag már teljes mennyiségében átalakult. A kivált csapadékot ezután kiszűrjük, mossuk és a szűrletet mosófolyadékkal egyesítjük. A kapott elegyet bepárolva 14,51 g mennyiségben habot kapunk. Ezt azután kloroformban oldjuk, majd a kapott oldatot lehűtjük, amikor 7,55 g mennyiségben csapadék képződik. Ezt azután 20 ml kloroformból átkristályosítjuk, 3,42 g mennyiségben a 149—152 °C olvadáspontú cím szerinti vegyűletet kapva. Az egyesített anyalúg 800 g szilikagélei metanol és kloroform 1:4 arányú elegyével mint eluálószerrel végzett kromatografálásakor további 3,37 g termék különíthető el (az összhozam 55%). UV-spektrum (C2H5OH): 204,5 (20950), 206 (váll, 20 650) és 267 (11 550) nanométer. CD (CH3OH): (0)^= -22000, (0)^=+33 500. Fajlagos forgatóképesség [a]o = -43° (1%, aceton). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
