181458. lajstromszámú szabadalom • Eljárás parazita ellenes C-076 vk 13-halogén- és 13-dezoxi-származékainak előállítására
17 181458 18 A többi 18 vékonyrétegkromatográfiás lemezről mindkét sávot lekaparjuk, majd a korábban említett két lemezen maradt sávokat is lekapaijuk és az egészet összekeverjük. Ezután a keveréket 125—125 ml etil-acetáttal ötször extraháljuk, majd az eluátumot vákuumban bepároljuk. A kapott üveges anyagot 5 ml benzolból liofilizáljuk, 233 mg mennyiségű fehér port kapva. IR-spektrum (tiszta film): 365(1—3200 (m, OH), 1710 (s, C = O) cm A. UV-spektrum (1,5 X 10 '5 M, CH3OH): X max: 237 nm (e = 25 000) 244 nm (e = 27000) 252 nm (váll, e = 23 000). Nagynyomású folyadékkromatográfiás elemzés eredményei: Vegyüld A keverékben a %-os menynyiség Retenciós idő (pere) ismeretlen 4 6,7 5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23--dihidro-C-076-Blb-aglükon 10 8,0 5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23--dihidro-C-076-B 1 a-aglükon 89 8,8 9. példa ( 13R>13-Klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Bla-aglükon és ( 13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(O-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-B 1 b-aglükon előállítása 200 mg, 89% 5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Bla-aglükont és 10% 4-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükont tartalmazó kiindulási anyag 14,6 ml metilén-kloriddal készült oldatához 440 p (327 mg) diizopropil-etil-amint és 315,5mg 4-(dimetilamino)-piridint adunk, majd az így kapott elegyet 0 °C-ra lehűtjük és 422,5 mg 2-nitro-benzol-szulfonil-kloridot adunk hozzá. Az így kapott reakcióelegyet 0 °C-on 1 órán át keverjük, majd szobahőmérsékletre melegítjük és ezen a hőmérsékleten 3 órán át keveijük. Ezt követően a reakcióelegyhez 16,9 ml tört jeget és 22,5 ml dietil-étert adunk, majd a fázisokat elválasztjuk egymástól és a vizes fázist 22,5 ml dietil-éterrel mossuk. Az egyesített szerves fázisokat 28,2— 28,2 ml vízzel kétszer mossuk, vízmentes nátrium-szulfát fölött szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Az olajos maradékot 15 ml benzollal azeotróp desztillálásnak vetjük alá, 360 mg mennyiségben sárga üveges maradékot kapva. Az utóbbit feloldjuk 18 ml metilén-kloridban, majd a kapott oldatot egyenletesen felvisszük nyolc 20 x 20 cm méretű, 1000 p vastag, preparatív vékonyrétegkromatográfiás lemezre. A futtatást kloroform és 30—60 °C forráspontú petroléter 2:1 térfogatarányú elegyével végezzük. A 0,15—0,28 Rf-értékü terméksávot lekapaijuk, majd 100—100 ml etilacetáttal ötször extraháljuk. Az eluátumot szárazra pároljuk, majd a maradékot benzolból liofilizáljuk, 144 mg menynyiségben fehér port kapva. IR-spektrum (tiszta film): 3600—3300 (w, OH), 1710 (s, C = O) cm A. UV-spektrum (2,7 x 10 ~5 M, CH3OH): X max: 244 nm (e = 28 000) 293 nm (e = 11000) Nagynyomású folyadékkromatográfiás elemzés eredményei: Vegyüld A keverékben a %-os menynyiség Retenciós idő (pere) ismeretlen 1 7,4 ismeretlen 1 11,5 ( 13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-C-076- -B1 b-aglükon ( 13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-C-076-12 14,4 -B1 a-aglükon 84 16,6 ismeretlen 1 22,4 10. példa ( 13R)-13-Klór-13-dezoxi-5-(0-terc-dimetil-szilil)-22,23- -C-076-Blb-aglükon elkülönítése 30 mg, 84% (13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Bla-aglükont és 12% (13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilü)-22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükont tartalmazó kiindulási anyagot feloldunk 300 pl metanolban, majd 100 és 200 pl-es aliquotokat kromatografálásnak vetünk alá a Whatman cég Partisii M9 10/50 ODS—2 jelzésű, fordított fázisú nagynyomású folyadékkromatográfiás oszlopán, szobahőmérsékleten eluálva 4,0 ml/perc sebességgel metanol és víz 19:1 térfogatarányú elegyével. Az eluálódást refraktometriásán követjük, majd a (13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Blb-aglükonnak megfelelő, 30,1 perces retenciós idejű csúcsot elkülönítjük és szárazra pároljuk. A maradékot 20 x 20 cm méretű, 500 p vastag, szilikagélből készült vékonyrétegkromatográfiás lemezen kromatografáljuk, a futtatást metilén-kloriddal végezve. A 0,31—0,41 R-értékű terméksávot lekapaijuk, majd 10—10 ml etil-acetáttal ötször eluáljuk és az eluátumot szárazra pároljuk. A visszamaradó üveges anyagot benzolból liofilizáljuk, 2,4 mg mennyiségben fehér port kapva. Nagynyomású folyadékkromatográfiás elemzés eredményei: Vegyüld A keverékben a %-os menynyi ség Retenciós idő (perc) ismeretlen 3 2,4, 3,5, 11,8 (13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-B1 b-aglükon 97 14,8 11. példa 13-Dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-Bla-aglükon és 13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-dihidro-C-076-B 1 b-aglükon előállítása Keverés közben 110 mg, 84% (13R)-13-klór-13-dezoxi-5- -(O-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-C-076-B 1 a-aglükont és, 12% (13R)-13-klór-13-dezoxi-5-(0-terc-butil-dimetil-szilil)-22,23-C-076-Blb-aglükont tartalmazó kiindulási anyag 5,83 ml tri-n-butil-ón-hidriddel készült oldatához 16,7 mg azo-bisz-izobutironitrilt adunk, majd az így kapott keveréket nitrogénatmoszférában 85 °C-on tartjuk 3,5 órán át. A reakcióelegyet ezután szobahőmérsékletre hűtjük, majd 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
